高效液相色譜串聯質譜對氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯在桃中的殘留檢測方法研究

張 雙，賈福艷，郭紅霞，劉良月，黃 鑫，楊沛文，楊雪葳，劉修園，黃成田

（1.沈陽沈化院測試技術有限公司，沈陽 110021；2.沈陽化工研究院有限公司，沈陽 110021）

氟啶蟲酰胺是由日本石原產業株式會社發現的酰胺類殺蟲劑，它可以有效防治刺吸式口器害蟲，對蚜蟲尤其高效，對蜜蜂低毒[1-2]；聯苯菊酯是擬除蟲菊酯類殺蟲殺螨劑，其特點顯著，擊倒作用強、長殘效，對番茄白粉虱和桃小食心蟲等有較好的防效[3]。

目前，氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯的分析測定方法主要有氣相色譜法、氣相色譜質譜聯用法、液相色譜法等[4-10]，但未見同時采用乙腈（含1%乙酸）作為提取劑測定桃樣品的前處理方法及采用高效液相色譜串聯質譜測定兩者的殘留。本文采用乙腈（含1%乙酸）進行振蕩提取，方法簡單，回收率好，能夠快速準確地對氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯進行定量分析，能為桃上氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯的殘留量測定提供理論參考和技術支持。

1 材料和方法

1.1 供試試劑

氟啶蟲酰胺標準品（純度98.9%），北京勤誠亦信科技開發有限公司；聯苯菊酯標準品（純度99.5%），國家農藥質量監督檢驗中心（沈陽）；乙腈（色譜純）、甲醇（色譜純），Sigma-Aldrich公司；乙酸（分析純）、氯化鈉（分析純），國藥集團化學試劑有限公司；N-丙基乙二胺（PSA），博納艾杰爾科技有限公司；尼龍濾膜（0.22 μm），天津市科億隆實驗設備有限公司；純凈水，沈陽娃哈哈啟力食品有限公司。

1.2 供試儀器

島津LC-30AD高效液相色譜，日本島津公司；TRIPLE QUAD 5500質譜儀，美國AB SCIEX公司；BP211D分析天平，德國賽多利斯公司；JJ300電子天平，常熟市雙杰測試儀器廠；HY-5回旋振蕩器，常州國華電器有限公司。

1.3 樣品前處理

稱取10.00 g粉碎后的桃樣品于150 mL錐形瓶中，加入20 mL乙腈（含1%乙酸），振蕩提取30 min，再加入約6 g氯化鈉，漩渦混勻約30 s。靜置分層后取2.00 mL提取液，加入約100 mg PSA，混勻后靜置至溶液澄清，取上清液過0.22 μm有機濾膜，后經HPLC-MS/MS檢測。

1.4 儀器分析條件

1.4.1 氟啶蟲酰胺液相色譜條件

色譜柱Agilent Extend C18（50 mm×2.1 mm，3.5 μm）；柱溫：40℃；進樣體積：2 μL；流動相A、B分別為水和乙腈；流速：0.5 mL/min。采用梯度洗脫模式，洗脫程序見表1。

表1 流動相梯度洗脫參數

1.4.2 聯苯菊酯液相色譜條件

色譜柱Agilent Extend C18（50 mm×2.1 mm，3.5 μm）；柱溫：40℃；進樣體積：2 μL；流動相A、B分別為水和甲醇；流速：0.5 mL/min；采用等度洗脫模式，A相∶B相=10∶90，運行時間為3 min。

1.4.3 質譜條件

采用多離子反應監測（MRM）；正離子模式；電噴霧離子源（ESI）；離子源溫度：500℃；離子化電壓：4500 V；GS1：50 psi；GS2：55 psi；EP電壓：10 V；CXP電壓：9 V（氟啶蟲酰胺）、7 V（聯苯菊酯）。質譜參數見表2。

表2 質譜參數

1.5 標準溶液配制

分別稱取0.01011 g氟啶蟲酰胺標準物質和0.02513 g聯苯菊酯標準物質于小燒杯中，用乙腈充分溶解，分別定容至10和25 mL容量瓶中，配得質量濃度為1000 mg/L氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯儲備液備用，于-4℃避光保存。儲備液分別用乙腈稀釋配制成1、10和100 mg/L的標準溶液用于基質標準曲線的配制和回收率試驗的添加。

1.6 添加回收率試驗

取不含有氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯的桃空白樣品，分別加入一定量的氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯標準溶液，在0.01、1.0和5.0 mg/kg 3個添加水平下分別設置5個重復進行添加回收率試驗。按照1.3樣品前處理方法進行處理，在1.4儀器分析條件下進行分析，計算試驗的準確度和精密度。

2 結果與分析

2.1 儀器條件

氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯分別以乙腈和水、甲醇和水作為洗脫溶劑，選擇C18色譜柱進行分離。2種化合物分析時間均為3.0 min。在上述條件下，氟啶蟲酰胺的出峰時間約為1.26 min，聯苯菊酯的出峰時間約為0.88 min。從圖1～4可以看出，在選擇的色譜條件下氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯受基質提取物影響較小，且取得了較好峰形。

2.2 前處理條件選擇

本研究參考賈福艷等[11]方法考察了乙腈、乙腈（含0.1%乙酸）、乙腈（含1%乙酸）、甲醇、甲醇（含0.1%乙酸）、甲醇（含1%乙酸）對目標化合物的提取情況，結果發現乙腈的提取效果好于甲醇，隨著乙酸的加入量增加，回收率逐漸增加（表3），繼而選擇乙腈（含1%乙酸）作為提取溶劑。提取液經過PSA凈化后，樣品中雜質量降低，目標化合物峰型得到改善。該前處理過程簡單、快速。

表3 不同提取溶劑的添加回收率

2.3 線性相關性分析

用空白桃提取液配制氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯的混合標準溶液，線性范圍為0.002、0.005、0.01、0.02、0.05、0.1和0.2 mg/L。按照1.4儀器分析條件，以進樣濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標進行線性分析（表4），線性相關性較好。

表4 氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯在桃中的線性關系

2.4 方法的準確度和精密度

在0.01、1.0和5.0 mg/kg 3個添加水平下，氟啶蟲酰胺在桃中回收率為80%～91%，相對標準偏差為4.3%～7.7%；聯苯菊酯在桃中回收率為85%～94%，相對標準偏差為2.7%～5.2%（表5），方法的定量限均為0.01 mg/kg，符合農藥殘留試驗準則的要求。

表5 氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯在桃中的添加回收試驗（n=5）

3 結 論

本研究建立了能夠檢測桃樣品中氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯殘留量的高效液相色譜串聯質譜法。結果表明，該方法具有較高的精密度和準確度。氟啶蟲酰胺在桃中的平均回收率為80%～91%，相對標準偏差為4.3%～7.7%，聯苯菊酯在桃中的平均回收率為85%～94%，相對標準偏差為2.7%～5.2%。本方法簡便、高效，滿足樣品殘留分析的要求，可為桃的食用安全性的初步評估提供參考。