蛙病毒(Ranavirus)是一類能跨種感染全球各地變溫動物(包括魚類、兩棲類、爬行類等)的核質大DNA病毒(NCLDVs)成員,但其復制和轉錄機制在較大程度上仍屬未知。近日,中國科學院水生生物研究所水生病毒學學科組基于建立高效蛙病毒重組、基因復制及功能測試系統(tǒng),以及從魚類細胞新生DNA中分離特定蛋白、重組病毒親和層析和納米熒光素酶NanoLuc互補及質譜分析技術,鑒定并揭示了蛙病毒復制和轉錄機器的組織架構及相關作用機制。
蛙病毒的復制和轉錄機器是一個由至少30種病毒蛋白和6種宿主蛋白構成的復雜裝置,其核心復制體由病毒DNA聚合酶(vDPOL)、增殖細胞核抗原(vPCNA)、單鏈DNA結合蛋白(vSSB)、解旋酶/引物酶(vhelicase/primase)等構成,而轉錄復合物的核心病毒RNA聚合酶則包含宿主RNA聚合酶II(RNAPII)亞單位Rpb3、Rpb6和Rpb11等蛋白。經實驗驗證,蛙病毒復制和轉錄機器中多種蛋白之間有關聯與相互作用。其中,轉錄復合物核心包含宿主聚合酶亞基,這在核質大DNA病毒群虹彩病毒科(Iridoviridae)、痘病毒科(Poxviridae)、非洲豬瘟病毒科(Asfarviridae)、藻類DNA病毒科(Phycodnaviridae)及擬菌病毒科(Mimiviridae)等中屬首次涉及。研究進一步證實,作為病毒DNA復制和轉錄的連接體與調節(jié)中心,蛙病毒復制體核心蛋白vDPOL可與不同病毒及宿主蛋白相互作用,預示著該機器在蛙病毒跨種感染過程中具有關鍵作用,這為進一步闡釋子代蛙病毒的高效復制及跨物種感染機制提供了全新視野。
相關研究成果以“Replication and transcription machinery for ranaviruses:components,correlation,and functional architecture”《蛙病毒的復制和轉錄機器:組件、相關性及功能架構》)為題,在線發(fā)表在Cell&Bioscience上。該研究由水生病毒學科組與中科院院士桂建芳團隊合作完成。
此外,基于揭示涵蓋虹彩病毒、皰疹病毒、彈狀病毒、呼腸孤病毒、線頭病毒、雙RNA病毒、肌尾病毒、短尾病毒等病毒科中數十種水生病毒的完整基因組架構及關鍵基因功能,已在水產動物病毒基因組及病毒-宿主相互作用、蛙病毒跨種感染轉錄組測試分析及其特征、魚類呼腸孤病毒量子點單粒示蹤及其胞內動力學、水生病毒的多樣性/進化貢獻/生態(tài)作用、蛙病毒經同源細胞受體入侵不同水生動物物種細胞及鯽皰疹病毒環(huán)指蛋白的結構與功能等方面取得了進展。
(來源:中科院水生生物研究所)