類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎特異性自身抗體研究進(jìn)展

苗繼珍

（桂林市中醫(yī)醫(yī)院，廣西 桂林，541001）

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎疾病是一種慢性關(guān)節(jié)疾病，具有較高的致殘率，該疾病病變部位主要在關(guān)節(jié)，患者起病最初對關(guān)節(jié)損傷較為嚴(yán)重，且早期診斷難度較大，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量。臨床治療主要以使用免疫抑制劑為主，可有效控制病情，減輕關(guān)節(jié)受損程度，以此避免關(guān)節(jié)功能降低[1]。在對該疾病進(jìn)行早期診斷期間，尋找特異性檢測指標(biāo)是臨床研究的重要內(nèi)容。本文深入分析類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者特異性自身抗體研究進(jìn)展，綜述如下。

1 抗核周因子

在本研究疾病患者機(jī)體中檢測出一種細(xì)胞核周圍的抗體，臨床稱之為抗核周因子[2]。該抗原成份存在于人頰粘膜上皮細(xì)胞胞漿內(nèi)的不溶性蛋白質(zhì)，通過間接免疫熒光法顯微鏡下呈現(xiàn)出圓形顆粒，研究者使用抗人球蛋白血清對核周熒光進(jìn)行阻斷，以此對抗原抗體性質(zhì)有效確定，且分為lgG、IgA、Ign 等類型，主要以lgG 型為主，IgG 型抗核周因子對該疾病診斷的敏感性發(fā)生率約為49%，特異性為73%-99%[3]。抗核周因子對該疾病診斷特異性與血清稀釋呈正比關(guān)系，隨著血清不斷稀釋，疾病特異性逐漸增加，其敏感性降低[4]。李玲等[5]對不同血清稀釋度下抗核周因子檢測結(jié)果進(jìn)行對比，對判斷實驗方法優(yōu)劣實施判斷時采用正確診斷指數(shù)，最佳血清稀釋倍數(shù)為l：20。

本研究疾病早期時極易出現(xiàn)抗核周因子，由于患者病程與檢出率無關(guān)，抗核周因子與類風(fēng)濕因子、抗角蛋白抗體高度密切相關(guān)，且與抗RA33 抗體無相關(guān)性[6]。有學(xué)者認(rèn)為[7]，抗核周因子與病情活動性指標(biāo)呈正相關(guān)，也有學(xué)者認(rèn)為，抗核周因子陽性與放射學(xué)病情進(jìn)展相關(guān)，提示該疾病預(yù)后不良指標(biāo)中，抗核周因子是其指標(biāo)之一。IgM—APF、IgA—APF 與IsG—APF 三種抗體之間不具有替代性，且檢測具有補(bǔ)充性；若三種抗體聯(lián)合檢測，其特異性與陽性預(yù)測值分別為98%、96.9%[8]。

2 抗角蛋白抗體

研究發(fā)現(xiàn)，在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者中采用間接免疫熒光法在血清中發(fā)現(xiàn)角質(zhì)層中的抗體，臨床將此叫做角質(zhì)蛋白抗體。與該疾病相關(guān)的角質(zhì)蛋白抗體屬于IgGl 型，在檢測時可在關(guān)節(jié)液以及血清部位檢出，但該抗體很難在關(guān)節(jié)液中濃集[9]。報道顯示[10]，角質(zhì)蛋白抗體對一般患者診斷敏感度、特異性分別為60%、98%。抗角蛋白抗體與核周因子之間具有相關(guān)性，主要是因核周因子檢測抗原底物為人頰粘膜細(xì)胞，該細(xì)胞中含有filaggrin。患者在患病早期極易出現(xiàn)角質(zhì)蛋白抗體。分析發(fā)現(xiàn)，角質(zhì)蛋白抗體檢測可對該疾病進(jìn)行早期診斷。

3 抗Sa 抗體

Sa 抗體主要在機(jī)體脾臟器官中，研究者采用蛋白質(zhì)免疫印跡法在患者機(jī)體中檢測出此抗體，具有較高特異性，約為98.9%，同時患病時間＜12 個月患者陽性率約為29%。sa 抗原是一種非酰基化多肽，最早在脾臟器官中，而后又在類風(fēng)濕滑膜翳與胎盤中，由此可見該抗體可存在于機(jī)體正常組織中，是機(jī)體正常組織中的一部分。本研究患者中類風(fēng)濕因子無無論是陽性還是陰性，sa 抗體均可呈現(xiàn)陽性，所以抗Sa 抗體是類風(fēng)濕因子的有效補(bǔ)充，特別是類風(fēng)濕因子陰性患者，可將此抗體作為診斷的重要指標(biāo)。實驗顯示[11]，若患者患病時間＜12 個月，抗Sa 抗體陽性患者中X 線病情分期與陰性患者相比較高，抗體為陽性患者在患病12 個月期間發(fā)病較快。

4 抗Ⅱ型膠原抗體

在動物內(nèi)體中，膠原含量較為豐富，在人體中膠原含量約占總蛋白的1/3。在機(jī)體關(guān)節(jié)透明板軟骨中，膠原類型含量有明顯差異，Ⅱ型膠原含含量最高。臨床研究了抗Ⅱ型膠原抗體檢測方法，如免疫熒光、間接血凝、固相放免等方法，目前主要常用方法為酶聯(lián)免疫法。臨床采用新鮮兔血清封閉酶標(biāo)反應(yīng)板分析，提示在該疾病早期診斷中，該抗體可作為重要的診斷指標(biāo)。報道顯示[12]，采用改進(jìn)后的ELISA 法對II 型膠原抗體水平檢測發(fā)現(xiàn)，對照組抗天然II 型膠原抗體陽性率相對較低，特異性為96.9%，對于初期患者中敏感性更高，提示在對此病進(jìn)行診斷時，II 型膠原抗體可作為疾病診斷的有效補(bǔ)充指標(biāo)。實驗發(fā)現(xiàn)，Ⅱ型膠原抗體與患者互動指標(biāo)無相關(guān)性，對患者病情變化監(jiān)測時，該抗體無法起到病情監(jiān)測的目的。

患者的Ⅱ型膠原抗體陽性率表現(xiàn)相對較低，主要原因表現(xiàn)在以下幾個方面：①II 型膠原抗體與關(guān)節(jié)遺傳易感性相關(guān)，相關(guān)遺傳基因可產(chǎn)生此抗體，如HLA-DR4，在發(fā)病的整個過程中均有參與，因此此抗體僅在有遺傳的部分患者中起到一定作用。②在對抗II 型膠原抗體采用ELISA 法測定期間，需確保Ⅱ型膠原包板的完整性，但認(rèn)為只有Ⅱ型膠原中CB10 多肽片段與患者有相關(guān)性，完整Ⅱ型膠原包板無法使致病基團(tuán)充分暴露，導(dǎo)致抗體陽性率很難提高。

5 抗聚角蛋白微絲蛋白抗體

聚角蛋白微絲蛋白主要在人表皮中提取，是一種居間纖維，可使角蛋白不斷聚集形成粗大纖維，能夠構(gòu)成真核細(xì)胞骨架細(xì)絲間。Filaggrin 的理化性質(zhì)是一酸/中性蛋白，等電點介于58—74 間，可溶于水。報道顯示，可將此作為抗原，采用免疫印跡法與酶聯(lián)免疫吸附法對患者血清中針對filaggrin 特異性自身抗體進(jìn)行檢測，在該疾病診斷中，該抗體可作為重要的診斷指標(biāo)。在對此抗體進(jìn)行檢測期間，主要方法有WB、IIF 以及ELISA，診斷敏感性與特異性分別為達(dá)75%、95%。在患者早期發(fā)病時，機(jī)體出現(xiàn)此抗體，可對早期患者通過檢測抗聚角蛋白微絲蛋白抗體實施診斷。報道顯示[13]，此抗體與患者病程、年齡等無相關(guān)性，學(xué)者認(rèn)為若此抗體呈陽性，其病情具有較高的活動性，同時該抗體與HLA-DR4 有密切相關(guān)性，提示HLA-DR4與患者疾病嚴(yán)重程度相關(guān)，同時可顯著改善患者預(yù)后，若該抗體為陽性，表明患者病情相對較重，同時預(yù)后較差。曾小峰等[14]研究者通過研究發(fā)現(xiàn)，抗核周因子、抗角蛋白抗體、抗聚角蛋白微絲蛋白抗體的靶抗原均是filaggrin，且三種抗體之間存在相關(guān)性，但處于不完全重疊狀態(tài)，主要是因抗原通過不同形式存在，致使抗原表位暴露不同。本抗體可用于該疾病的診斷，與抗核周因子、抗角蛋白抗體檢測形成有效補(bǔ)充，以此能夠提升患者早期診斷率。

6 抗環(huán)瓜氨酸肽抗體

目前，臨床在研究期間發(fā)現(xiàn)，抗聚角蛋白微絲蛋白抗體、抗核周因子在對該疾病診斷時，特異性相對較高，但因抗原底物個體差異，同時采用的免疫熒光檢測方法模型判斷具有一定主觀性等因素，使臨床實驗室普及與推廣受到一定限制。對該疾病深入研究顯示，抗聚角蛋白微絲蛋白抗體、抗核周因子中的靶抗原是上皮細(xì)胞分化終末階段的細(xì)胞骨架成分filaggrin，抗聚角蛋白微絲蛋白抗體、抗核周因子是這族抗體中不同抗原表位的抗體，通過對filaggrin 研究顯示，在對此成分識別時主要采用瓜氨酸。近年來，臨床在研究期間，將瓜氨酸肽鏈中絲氨酸轉(zhuǎn)化為半胱氨酸，以此產(chǎn)生二硫鍵，且與B 轉(zhuǎn)角相似性較高，以此可建立ELISA 檢測方法。臨床常采用環(huán)瓜氨酸多肽對抗環(huán)瓜氨酸多肽抗體進(jìn)行有效的檢測，可對早期患者起到較好的診斷效果。該抗體在患者早期發(fā)病時可出現(xiàn)，Kroot 等[15]研究者對本研究患者進(jìn)行研究，采用影像學(xué)評分對患者進(jìn)行觀察，顯示患者骨破壞該抗體陽性較陰性相對嚴(yán)重，表明該抗體緩釋片與患者疾病嚴(yán)重程度相關(guān)。報道顯示，該抗體與類風(fēng)濕因子、抗聚角蛋白微絲蛋白抗體、抗核周因子陽性率有差異，不同方法檢驗結(jié)果密切相關(guān)，抗CCP 抗體評價指標(biāo)較類風(fēng)濕因子、抗聚角蛋白微絲蛋白抗體、抗核周因子優(yōu)。研究證實，對患者診斷期間，CCP 抗體是其重要的診斷指標(biāo)。

結(jié)語

綜上所述，類風(fēng)濕因子陽性率相對較高，且抗Sa 抗體特異性最高，對以上抗體實施檢測可對患者進(jìn)行早期診斷，以此能夠提升疾病診斷的特異性，彌補(bǔ)類風(fēng)濕因子對該疾病診斷的不足，且不同抗體進(jìn)行聯(lián)合診斷可顯著提升診斷陽性率。