陳 晗 福州市倉山區城門鎮綜合保障技術中心 福州 350018
雞病毒性關節炎(Viral arthritis)是由不同血清型和致病型禽呼腸孤病毒(Avian reovirus)引起的,主要感染肉雞,特征性癥狀為跗關節腫脹,腱鞘炎,肌腱斷裂、化膿,跛行。 1957 年Oslen 首次報道從有慢性呼吸道疾病的雞呼吸道內分離到禽呼腸孤病毒,其后在歐洲、美洲和亞洲等國家相繼報道該病。我國從20 世紀80 年代中期起,先后在河北、山東、黑龍江、上海、四川、云南、湖北、福建等分離到呼腸孤病毒,并報道該病的發生。該病不僅會導致肉雞出現跛行、生長受阻,還可引起免疫抑制,增加沙門氏菌、大腸桿菌、球蟲等感染幾率,對肉雞養殖業發展造成極大經濟損失,必須引起足夠 重視。
福州地區某肉雞養殖戶飼養的一批1 000 多羽32 日齡黃羽肉雞,2022 年4 月12 日出現數十羽以撇腿、癱坐為主要癥狀的患雞,飲水和采食下降后雞群陸續出現死亡。養殖戶聯系到筆者,經筆者聯合福建省農業科學院專家共同會診并進行實驗室檢測,確診為雞病毒性關節炎。
2.1 急性型 在急性感染的情況下,患雞通常表現為精神不振,食欲減退,不愿行走,發病死亡的雞眼窩下陷,脫水嚴重,全身皮膚發紺。隨著病程延長、病情加重,雞冠變深最后變紫,最終衰竭死亡,急性型患雞關節炎癥狀不明顯。
2.2 慢性型 臨床病例多數以慢性型為主,患雞主要癥狀表現為跛行,部分患雞喜坐于關節上,跗關節紅腫,不愿走動,人為驅趕時雙翅撲扇行走,但步態不穩。 患雞采食量和飲水量下降, 導致生長發育受阻,機體消瘦,最終衰竭死亡,病情嚴重時死淘率達5%以上。
剖檢病死雞,可見跗關節上部腓腱水腫,滑膜內常見充血或點狀出血, 關節腔內含有黃色炎性滲出物,嚴重時呈膿性物。 爪墊一般不出現腫脹,腱部炎癥多發展為慢性型病變。
雞發病初期表現為行動遲緩、跛行、跗趾關節腫大等癥狀,剖檢患雞觀察到跗關節周圍腫脹,切開皮膚后可見腓腱和滑膜充血或點狀出血, 關節腔內有黃色或紅色滲出物等病理變化,可作出初步診斷。但該病臨床癥狀與滑液囊支原體病、葡萄球菌病、維生素E 缺乏癥、硒缺乏癥、痛風等十分相似,因此,確診需進行實驗室檢測。
4.1 病原學檢測方法 病毒分離需要的時間較長,但檢測結果比較準確,所以,病原學檢測常用于該病毒的分離鑒定。取病死雞腫脹的腱鞘、跗關節的關節液,氣管和支氣管,腸道內容物、肝臟、脾臟或全血,接種5~7 日齡SPF 雞胚卵黃囊內,接種后4~5 d,雞胚胎出現死亡,胚體出現明顯的出血,內臟器官充血或出血,肝呈淡紫色,脾臟腫大。 若通過雞胚絨毛尿囊腔接種10 日齡SPF 雞胚, 接種6~7 d 后雞胚死亡, 雞胚的死亡病變與卵黃囊接種結果基本一致。分離到病毒后, 可進行病毒理化特性測定、 電鏡觀察、病毒核酸電泳和血清學試驗等。 除雞胚外,病毒還可以在原代雞胚成纖維細胞、 肝、 睪丸細胞以及DF-1、Vero、BHK-21 等傳代細胞中生長, 主要的細胞病變為合胞體的形成。
4.2 血清學檢測方法
4.2.1 熒光抗體法 (FA) 是用熒光物標記抗體來檢測細胞或組織中相應抗原或抗體的技術, 有速度快、操作簡單、敏感性高等優點,適合在呼腸孤病毒定量分析和特異性抗體檢查中應用。
4.2.2 瓊脂擴散試驗(AGP) AGP 是檢測呼腸孤病毒最常用的診斷方法,病毒自然感染2~3 周后應用該方法能檢測出抗體。 該方法主要是利用標準抗原對未接種呼腸孤病毒病疫苗的雞群進行特異性抗體檢測,還適用于雞群流行病學調查。
4.2.3 酶聯免疫吸附試驗(ELISA) 采取ELISA 方法檢測呼腸孤病毒病抗體,有較高的敏感度、特異性強、檢測快速,更適合對群體呼腸孤病毒病的抗體水平進行分析。 通過ELISA 對患雞關節滑膜、腱鞘和脾臟中病毒的檢出率為100%。
4.3 分子生物學檢測方法(PCR) 采集患雞肝臟、脾臟以及關節液等組織樣品, 進行無菌處理, 利用RT-PCR 檢測方法,通過設計病毒的引物進行檢測。該方法具有更加靈敏、特異、快速等特點,成為當前呼腸孤病毒檢測方法的主要發展方向。
5.1 疫情處理 目前,對雞病毒性關節炎尚無有效的治療藥物,只有通過加強飼養管理減少該病發生。一旦確診為該病,要盡快將患雞隔離、淘汰,并對雞舍內外環境及各種生產工具進行嚴格清洗消毒。 首先空欄消毒, 將雞舍內可移動的物品和用具搬離雞舍,雞舍地面用3%燒堿進行潑灑消毒;其次對雞舍的墻壁用泡沫消毒液進行覆蓋消毒; 最后將雞舍密封,對空雞舍按立方米用40%甲醛10 mL、高錳酸鉀5 g 進行熏蒸消毒。 用具可使用含碘消毒液進行浸泡消毒,雞舍外環境常用生石灰覆蓋進行消毒。發病期間嚴格遵守生物安全規范, 做好人員和物品的管理工作,禁止人員串崗、串舍,禁止工具串用。
5.2 加強飼養管理 做好雞苗的引種工作,要到規模大、管理規范的種苗場進苗。 提供品質高的飼料,禁止使用含霉菌毒素的飼料,確保飲水充足、衛生,保持雞舍內干凈,且干燥通風。 做好免疫保健程序,定期觀察雞群情況,做好患雞隔離和診治。定期做好雞舍內外的消毒工作, 在飲水或飼料中添加電解多維,保證雞群健康。
對進出場區的車輛進行嚴格消毒, 切斷病毒水平傳播途徑。 禁止將交易市場使用過的雞籠或裝雞袋帶入雞舍,或經過嚴格的消毒后方可重新使用。采取批次化的飼養模式, 每批成年雞出欄后都要對雞舍進行全面清掃、消毒和熏蒸,再經過至少14 d 空欄期后,下一批雞苗方可入舍。
5.3 免疫接種 由于養殖水平的差異,要根據自身飼養管理經驗及發病情況, 并結合當地雞病毒性關節炎流行情況,制定科學的免疫保健程序。 目前,我國雞病毒性關節炎的流行毒株以Ⅰ型、 Ⅱ型和Ⅴ型為主,各毒株之間交叉保護性較弱,建議選擇免疫抗原譜廣、毒株針對性強的疫苗進行免疫。建議染疫地區的肉雞場,5 日齡時皮下注射雞病毒性關節炎活疫苗1 頭份,25 日齡時肌肉注射“新支法關”四聯滅活疫苗0.5 mL/羽。疫苗免疫前后可在飲水或飼料中添加電解多維,減少因疫苗免疫引起的應激反應。