老年慢性心力衰竭患者血漿miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3p水平與其營養(yǎng)狀況和睡眠質(zhì)量的相關(guān)性

陳少鵬， 李秀芩， 邵偉華， 姚麗霞， 李芳， 李紹冰

(河北省人民醫(yī)院 1.預(yù)防保健科，2.老年心血管病內(nèi)二科，河北省石家莊市 050051)

慢性心力衰竭(chronic heart failure，CHF)多發(fā)于老年人，CHF會(huì)造成患者食欲下降，而長期營養(yǎng)攝入不足將會(huì)導(dǎo)致患者代謝紊亂[1]，且對(duì)于CHF患者，心力衰竭越嚴(yán)重，營養(yǎng)狀態(tài)越差[2]。CHF患者睡眠障礙發(fā)生率高，睡眠障礙導(dǎo)致交感神經(jīng)過度亢奮和體內(nèi)炎癥反應(yīng)的發(fā)生，將加重心力衰竭進(jìn)展[3]。研究表明，miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3p可通過調(diào)節(jié)心肌重構(gòu)相關(guān)基因的表達(dá)，參與心力衰竭的病理生理過程[4]。本文選取住院老年CHF患者便于對(duì)患者營養(yǎng)及睡眠進(jìn)行監(jiān)測(cè)和控制，避免不同飲食及不同環(huán)境對(duì)觀察結(jié)果造成影響，并分析患者血漿miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p的水平與營養(yǎng)狀況和睡眠質(zhì)量間的相關(guān)性。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取2018年12月—2020年6月確診為CHF的住院患者106例作為研究對(duì)象，其中男性62例，女性44例，冠心病61例，房顫34例，擴(kuò)張型心臟病11例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥80歲；②CHF的診斷標(biāo)準(zhǔn)符合《慢性心力衰竭診斷治療指南2018》[5]；③患者及其家屬對(duì)本研究知情并同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并急性大面積心肌梗死、嚴(yán)重腦出血及惡性腫瘤；②入院前3個(gè)月接受大手術(shù)；③合并消化道出血、自身免疫性疾病、感染性疾病等。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 營養(yǎng)狀況和睡眠質(zhì)量的評(píng)估

依據(jù)美國心臟病學(xué)會(huì)(NYHA)提出的心功能分級(jí)劃分為Ⅱ級(jí)33例，Ⅲ級(jí)54例，Ⅳ級(jí)19例。采用微型營養(yǎng)評(píng)價(jià)量表[6](mini nutritional assessment，MNA)對(duì)老年CHF患者住院期間的營養(yǎng)狀態(tài)進(jìn)行評(píng)分，總分30分，≤17分為營養(yǎng)狀況不良，18～23分為營養(yǎng)不良危險(xiǎn)者，≥24分為營養(yǎng)狀況良好。采用匹茲堡睡眠質(zhì)量指數(shù)量表[7](pittsburgh sleep quality index，PSQI)對(duì)老年CHF患者住院期間的睡眠質(zhì)量進(jìn)行評(píng)分，總分21分，得分越高睡眠質(zhì)量越差，≤4分為睡眠質(zhì)量好，4～8分為睡眠質(zhì)量一般，≥8分為睡眠質(zhì)量差(即睡眠障礙)。

1.3 指標(biāo)檢測(cè)

采集患者入院后第2天清晨空腹肘靜脈血4 mL，4 ℃，3 000×g離心10 min。取上清液，4 ℃、16 000×g離心10 min。取上清等量分裝，保存至-80 ℃冰箱備用。qRT-PCR法檢測(cè)血漿miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3P水平，以U6作為內(nèi)參，配制5 μL反應(yīng)體系(5×Prime Script RT Master Mix 2 μL，RNase-free ddH2O 3 μL)，37 ℃、60 min，85 ℃、5 s。配置20 μL PCR反應(yīng)體系：SYBR Premix Ex TaqⅡ(2×)10 μL，PCR正反向引物(10 μmol/L)各0.8 μL，ROX Reference Dye(50×)0.4 μL，cDNA 2 μL，滅菌蒸餾水6 μL。進(jìn)行定量PCR反應(yīng)，條件為95 ℃、5 s，60 ℃、20 s，40個(gè)循環(huán)。miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3P的相對(duì)表達(dá)水平采用2-ΔΔCt方法表示。采用心臟超聲診斷儀檢測(cè)心功能指標(biāo)左心室射血分?jǐn)?shù)(left ventricular ejection fraction，LVEF)，左室內(nèi)徑(left ventricular diameter,LVD)和左房內(nèi)徑(left atrium diameter,LAD)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 不同心功能分級(jí)患者各指標(biāo)比較

隨著心功能分級(jí)的增加，患者LVEF及MNA評(píng)分逐漸降低，LAD、LVD、miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3p及PSQI評(píng)分逐漸升高(P<0.05；表1)。

表1 不同心功能分級(jí)的老年CHF患者各指標(biāo)比較

2.2 miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平的相關(guān)性

患者miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平間均呈正相關(guān)(P<0.05；表2)。

表2 miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平間的相關(guān)性

2.3 不同MNA和PSQI評(píng)分時(shí)miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平比較

隨著MNA評(píng)分增加，miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平逐漸下降(P<0.05)；隨著PSQI評(píng)分增加，miR-423-5p、miR-499-5p水平逐漸上升(P<0.05；表3)。

表3 不同MNA和PSQI評(píng)分miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平比較

2.4 miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平與營養(yǎng)狀況的關(guān)系

CHF患者miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平與營養(yǎng)狀況呈負(fù)相關(guān)(P<0.05；圖1)。

圖1 老年CHF患者血漿miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平與營養(yǎng)狀況的關(guān)系

2.5 miR-423-5p、miR-499-5p水平與睡眠質(zhì)量的關(guān)系

CHF患者miR-423-5p及miR-499-5p水平與睡眠質(zhì)量呈正相關(guān)(P<0.05；圖2)。

圖2 老年CHF患者血漿miR-423-5p、miR-499-5p水平與睡眠質(zhì)量的關(guān)系

3 討 論

miRNA參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化、免疫及癌變。研究發(fā)現(xiàn)，多種miRNA在CHF中起重要作用[8-9]。miR-423-5p與心肌損傷及心室重構(gòu)中相關(guān)基因的表達(dá)相關(guān)[10]。miR-499-5p可作為CHF患者潛在的預(yù)后診斷標(biāo)志物[11]。而miR-210可抑制心肌細(xì)胞的凋亡、促進(jìn)血管的生成，改善心臟功能[12]。晚期CHF患者miR-210-3p表達(dá)明顯上調(diào)，且較其他miRNA差異最大[13]。

睡眠障礙在CHF患者中常見。患者睡眠質(zhì)量差，將導(dǎo)致患者疲乏，無精力，機(jī)體代謝混亂，從而易造成患者高血壓、心肌梗塞、中風(fēng)及夜間心律失常，進(jìn)而使CHF病情復(fù)雜化。除睡眠障礙外，營養(yǎng)不良也是CHF常見并發(fā)癥，且老年CHF患者營養(yǎng)不良發(fā)生率更高[14]。CHF患者由于腸水腫及腸血流量減少，將影響進(jìn)食及腸道營養(yǎng)吸收，而營養(yǎng)不良可誘發(fā)機(jī)體過度炎癥反應(yīng)，最終加重患者病情，影響患者預(yù)后[15]。

研究表明，足夠的睡眠在控制血糖水平方面發(fā)揮重要作用，長期的睡眠障礙對(duì)碳水化合物代謝和內(nèi)分泌功能具有不利影響，導(dǎo)致患者營養(yǎng)失衡[16]。本文結(jié)果顯示，老年CHF患者隨著心功能分級(jí)的增加，患者血漿miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平逐漸增加，且三者間的水平均呈正相關(guān)。老年CHF患者隨著心功能分級(jí)的增加，MNA評(píng)分逐漸減少，PSQI評(píng)分逐漸增加，同時(shí)CHF患者miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平與營養(yǎng)狀況具有相關(guān)性，miR-423-5p、miR-499-5p水平與睡眠質(zhì)量具有一定相關(guān)性。

老年CHF患者心力衰竭程度與血漿miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3p水平密切相關(guān)。同時(shí)，血漿miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3p水平與營養(yǎng)狀況和睡眠質(zhì)量具有相關(guān)性。但本研究中納入的病例數(shù)較少，需后期擴(kuò)大樣本和進(jìn)一步臨床證實(shí)。