重慶市某兒童醫(yī)院食源性疾病病原體檢測及結果分析

李佳琪，羅昱玥，唐小靜，李英杰，周瑩冰△

(1.重慶市渝中區(qū)疾病預防控制中心，重慶 400010；2.重慶醫(yī)科大學附屬兒童醫(yī)院，重慶 400015)

食源性疾病是指食品中致病因素通過飲食進入人體引起的感染性、中毒性疾病，是全球最受關注的公共衛(wèi)生問題之一。目前，我國在全國范圍內建立起食源性疾病監(jiān)測網絡體系，就是為了根據食源性疾病的發(fā)病及流行趨勢，發(fā)現食品安全隱患，為提高食源性疾病的預警與防控能力提供依據，以便及時采取相應的風險管控和監(jiān)管措施，控制食源性疾病危害。哨點醫(yī)院則是通過對食源性疾病特定病原體的主動監(jiān)測，為食源性疾病診斷提供病原學確證，并結合流行病學調查，了解重要食源性疾病的發(fā)病及流行趨勢，在食源性疾病監(jiān)測網絡體系中發(fā)揮重要作用。食源性腹瀉為小兒常見疾病，其發(fā)病率、病死率在世界范圍內居高不下，嚴重威脅著患兒身體健康和生命安全。有研究發(fā)現，腹瀉每年導致超過100萬人死亡，在低收入和中等收入國家，腹瀉仍然是5歲以下兒童患病和死亡的主要原因之一[1-2]。引起小兒感染性腹瀉的病原復雜多樣，但主要由病毒和細菌感染所致[3-4]，為了解本市兒童群體中食源性疾病流行病學及病原學特征，以重慶市某兒童醫(yī)院為哨點醫(yī)院，對2019-2021年主動監(jiān)測的病例進行了病原體檢測，分析其主要構成情況，現總結如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 2019-2021年在重慶醫(yī)科大學附屬兒童醫(yī)院門診就診，由食品或懷疑由食品引起的，以腹瀉癥狀為主訴的感染性病例(腹瀉是指每日排便 3 次或 3 次以上，且糞便性狀異常，如稀便、水樣便、黏液便或膿血便等)，經診斷為感染性腹瀉的病例。

1.2方法

1.2.1樣品采集 對符合病例定義的就診病例，采集患者的新鮮糞便或肛拭子標本，盡量在用藥之前采集，如有膿血或黏液等，應注意挑取含有膿血、黏液或血液部分的大便，液體糞便應取絮狀物，置于清潔、干燥、無吸水性的無菌容器內，及時送檢，用于細菌和病毒的檢測。

1.2.2試劑與儀器 顯色培養(yǎng)基為法國科瑪嘉顯色培養(yǎng)基，其余培養(yǎng)基購自北京陸橋技術有限公司；志賀氏菌、沙門氏菌、致瀉大腸埃希氏菌診斷血清均為寧波天潤生物藥業(yè)有限公司生產；病毒核酸提取試劑盒(磁珠法)為江蘇碩世生物科技股份有限公司生產；諾如病毒 GⅠ/GⅡ 雙重熒光 PCR檢測試劑盒和5種致瀉大腸埃希氏菌多重核酸檢測試劑盒為北京卓誠惠生生物科技股份有限公司生產。全自動核酸提取儀(江蘇碩世生物科技股份有限公司 AW1000)；全自動微生物生化鑒定儀(法國梅里埃公司 VITEK 2 Compact)；實時熒光定量 PCR儀(美國 Bio-Rad公司 CFX96)； 所有試劑均在有效期內使用。

1.2.3檢測項目及方法 檢測方法依據《食源性疾病主動監(jiān)測工作手冊》中規(guī)定的檢驗標準操作程序進行沙門氏菌、志賀氏菌、副溶血性弧菌、致瀉性大腸埃希氏菌的分離鑒定和諾如病毒核酸檢測。

2 結 果

2.1基本情況 2019-2021年累計報告食源性疾病有效病例438例，男女比例為1.26∶1 (244∶194)；共采集了354份糞便標本進行病原學檢測，占病例數的80.82%(354/438)，126 份標本檢出致病菌或病毒，檢出率為35.59%(126/354)，其中男75例，女51例，男女性別比1.47∶1。

2.2不同病原體檢出情況 對采集的354份樣本，全部進行了沙門氏菌、志賀氏菌、致瀉大腸埃希氏菌和副溶血性弧菌和諾如病毒的檢測，見表1。有106份標本檢出致病菌106株，檢出率為29.94%(106/354)，其中沙門氏菌檢出率最高，為29.10%(103/354)，致瀉大腸埃希氏菌檢出率為0.85%(3/354)，未分離出志賀氏菌和副溶血性弧菌；33份標本檢出諾如病毒，檢出率為9.32%(33/354)；有13份標本發(fā)現有致病菌和諾如病毒的混合感染，占總數的3.67%(13/354)。

表1 患兒糞便標本中不同病原體的檢出情況(n=354)

2.3病原菌分型情況 在分離到的106株致病菌中，沙門氏菌有103株，占97.17%(103/106)，沙門氏菌共分離出16種血清型，其中以鼠傷寒沙門氏菌為主，共70株，占所有致病菌的66.04%(70/106)，其次為腸炎沙門氏菌(7株)，占 6.60%；3 株致瀉性大腸埃希氏菌均為腸道致病性大腸埃希氏菌(EPEC)，占所有致病菌的2.83%(3/106)，見表2。

表2 食源性致病菌的血清學分型情況

續(xù)表2 食源性致病菌的血清學分型情況

2.4不同年齡段的病原體檢出情況 病例主要集中在小于或等于2歲年齡段，在此年齡段共采集標本數278份，占標本總數的78.53%，此年齡段檢出的陽性標本數也較高，占陽性標本總數的82.08%(食源性致病菌)和84.85%(諾如病毒)，陽性標本均集中在小于或等于6歲年齡段，>6歲年齡段未檢出陽性。見表3。

表3 不同年齡段的病原體檢出情況

2.5不同食物來源的病原體檢出情況 對食源性疾病的可疑食品來源進行調查發(fā)現，病例可疑食品來源以家庭自制為主，共315例，占所有病例71.92%(315/438)，采集相關標本274份，陽性標本有97份，陽性率為35.40%，其次為餐飲場所和零售店。見表4。

表4 不同來源可疑食物的分布

3 討 論

近年來,由食源性致病微生物污染食物導致中毒或死亡事件在全球頻發(fā),食源性致病微生物引起的疾病已成為危害人類健康的高危因素，由此引起的感染性腹瀉的發(fā)病率居各類疾病發(fā)病率的前列,是當前世界上最突出的公共健康問題[5]。在中國全人口腹瀉發(fā)病率平均為 0.17～0.70 次/人年，而5 歲以下兒童為 2.50～3.38 次/人年，遠高于平均水平[6]。小兒感染性腹瀉嚴重影響患兒的身體健康和生長發(fā)育，是造成小兒營養(yǎng)不良、生長發(fā)育障礙及死亡的重要原因之一[7]，正確評估小兒感染性腹瀉的病因對患兒預后至關重要。因此，開展兒童腹瀉病防控工作意義重大，而監(jiān)測是防控的重要手段之一，持續(xù)的病原學監(jiān)測可較全面地掌握兒童腹瀉病原譜和流行特征，為制定針對性的防控策略提供依據。

本研究對重慶市某兒童醫(yī)院2019-2021年主動監(jiān)測的感染性腹瀉病例進行病原體檢測發(fā)現，主要以細菌感染為主，為29.94%(106/354)，同時，諾如病毒感染也處于較高水平，為9.32%(33/354)，與其他研究者的結論不一致[8-11]；在細菌性感染的病例中以沙門氏菌感染為主，其中又以鼠傷寒沙門氏菌最為常見，占所有致病菌的66.04%，其次為腸炎沙門氏菌和德爾卑沙門氏菌，分別為6.60%和5.66%，與江蘇省部分地區(qū)的兒童沙門氏菌感染的血清型類似[12]，而與上海市和玉溪市報道的細菌性腹瀉的主要病原體為致瀉性大腸埃希氏菌的報道不同[13-14]，提示不同地區(qū)兒童感染性腹瀉病原譜排序存在差異。這可能與不同地區(qū)經濟水平、飲食結構、衛(wèi)生條件、衛(wèi)生習慣的差異有關。

從年齡分布來看，陽性病例數均集中在小于或等于6歲低年齡段，這可能與低年齡兒童消化系統(tǒng)發(fā)育還不健全，功能還不完善，腸道免疫功能尚未充分建立，機體抵抗力低下，衛(wèi)生意識差，更容易受到致病因素的侵害有關。隨著年齡的增長，兒童飲食衛(wèi)生習慣不斷進步，機體免疫功能逐漸發(fā)育完善，感染風險也逐步降低。針對兒童食源性疾病的發(fā)病年齡特點，應加強嬰幼兒的衛(wèi)生管理，以降低感染性腹瀉的發(fā)病率。從就診患兒人數比例來看，多為小于或等于2歲低年齡段，提示低幼年齡段的患兒監(jiān)護人就診意識較強，對兒童的腹瀉癥狀更為重視。本研究結果顯示，可疑食品大部分來源于家庭自制食物，表明兒童食源性疾病的發(fā)生與家庭食品衛(wèi)生管理相關性更強。有研究顯示，感染性腹瀉患兒的監(jiān)護人對疾病認知水平較低，普遍存在疾病治療方法欠佳、缺乏科學性，不合理飲食等問題[15]。因此，加強日常食品的清洗、制作、保存等方面的食品衛(wèi)生安全知識宣傳，對預防兒童食源性疾病具有重要作用。

總之，食源性致病菌所導致的腹瀉對兒童影響遠高于成人，小兒感染性腹瀉作為全球高發(fā)疾病，對引起相關疾病的病原體的監(jiān)測至關重要。只有密切監(jiān)測病原動向，及時制定防控方案，同時加強食源性疾病知識宣傳、健康教育和科普教育等工作，提高居民科學喂養(yǎng)意識，促進健康行為養(yǎng)成，從源頭減少和消除食品污染，才能有效減少兒童食源性疾病的發(fā)生。