貴州山區小反芻獸疫綜合防控措施

楊家禹，袁曉娟，梁 均

1 貴州省天柱縣動物疫病預防控制中心，貴州天柱 5566032 貴州省黔東南州動物疫病預防控制中心，貴州凱里 556000

0 引言

小反芻獸疫（Peste des Petits Ruminants，PPR）被世界動物衛生組織（OIE）列為必須報告的動物疫病，在我國被列為一類動物疫病。該病是由副粘病毒科麻疹病毒屬小反芻獸疫病毒（PPRV）引起小反芻動物的嚴重烈性、接觸性傳染病，發病率和死亡率都非常高。2007年，該病在我國西藏首次發現，2014年迅速擴散，國內20 多個省份陸續爆發，嚴重制約了畜牧業的健康發展及畜產品的公共衛生安全。據原農業部通報，2014年貴州省黔東南州凱里市、黃平縣和榕江縣發生4 起該病，累計發病羊744 只，死亡109 只，撲殺1126 只；2016年貴州省黔東南州從江縣發生一起PPR疫情，該地從廣西運進一批羊（扶貧項目羊）共516 只，累計發病羊420 只，死亡416 只，撲殺疫點羊516 只，對周邊疫區和受威脅區1068 只羊進行了緊急免疫接種，該疫情給養羊戶造成了重大經濟損失，影響了畜牧業的健康可持續發展。本文從該病的流行病學、臨床癥狀、病理變化、實驗室診斷方法以及綜合防控措施等方面進行闡述，為廣大養殖戶提供參考。

1 流行病學

PPR的最長潛伏期可達21 天，一般為3～6 天，一年四季皆可發病，主要感染山羊、綿羊，也可以感染羚羊、巖羊、野山羊。山羊更易感，幼羊比成羊易感率更高。傳染源為患病羊和帶毒羊，可通過直接接觸、間接接觸、呼吸等方式傳播。病羊的鼻液、糞便、尿液、精液、乳汁等分泌物和排泄物含有大量的病毒，可以在接觸、授精、哺乳時進行直接傳播；接觸被污染的飼料、飲水、工具、圈舍等進行間接傳播；在飼養密度較高的羊群，病毒形成氣溶膠，偶爾發生近距離呼吸傳播。

2 臨床癥狀

病羊主要表現出眼鼻黏液性或膿性分泌物增多、發熱、口腔發炎、腹瀉、肺炎、腸炎等癥狀，嚴重時發生突發性死亡。發病初期體溫可達40 ℃以上，發熱持續3 天左右，病羊死亡多集中在發熱后期[1]。病初有水樣鼻液，此后大量的黏膿性卡他樣鼻液，阻塞鼻孔造成呼吸困難，鼻內膜發生壞死；眼流分泌物，遮住眼瞼，出現眼結膜炎。發熱癥狀出現后，病羊口腔內膜輕度充血，繼而出現糜爛。病情持續，羊群出現腹瀉、脫水，懷孕母羊出現流產。

3 病理變化

病羊在解剖時可發現，口腔黏膜、鼻腔黏膜、腸黏膜出現不同程度的糜爛與壞死，有的可見眼結膜炎，支氣管肺炎、肺尖炎及胸腔積液等典型病變，脾和淋巴結出現腫大壞死性病變狀態，腸道出現壞死或者出血，呈特征性斑馬樣條紋狀[2]。

4 實驗室診斷

4.1 血清學檢測方法

血清學檢測方法主要包括病毒中和試驗和酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。兩種方法各有優缺點，可以根據實際情況進行選擇。病毒中和試驗是最早檢測PPRV抗體的血清學方法，該方法可以區分PPR與牛瘟（RP）的血清抗體，具有很強的特異性，但缺點是耗時長且不適用于大批量檢測。

ELISA是20世紀70年代發展起來的一種靈敏性高、特異性強的抗體檢測新技術，是將可溶性抗原或抗體吸附于固相載體上，利用酶標抗體或抗原結合形成酶標記的免疫復合物，加入相應酶底物顯色，通過反應液顏色在反應酶標儀讀數的方式判定待檢血清中是否含有PPRV抗體。該方法操作方便、檢測迅速、靈敏度高、特異性強，但并不能區分是免疫接種產生的抗體還是野毒感染產生的抗體。ELISA主要有間接ELISA、阻斷ELISA、夾心ELISA、競爭ELISA。錢榜等[3]以篩選的H蛋白B細胞為基礎建立的針對PPRV H蛋白抗體的間接ELISA檢測方法具有良好的穩定性、特異性和敏感性，對羊痘、口蹄疫、藍舌病陽性血清的檢測均為陰性，與商品化cELISA試劑盒平行檢測符合率為92.81%，此法操作簡便快捷，可用于臨床PPR抗體檢測。目前，競爭ELISA是OIE規定的標準檢測方法之一，具體操作按照《GB∕T 27982—2011小反芻獸疫診斷技術》執行。

4.2 病毒核酸檢測方法

常見的病毒核酸檢測方法包括反轉錄聚合酶鏈式反應（RT-PCR）和環介導等溫核酸擴增（LAMP）。RT-PCR是20世紀80年代中期發展起來的一種在體外迅速大量擴增特異性DNA的新技術，具有高度的靈敏性和特異性。簡單來說，當需要檢測某種目的DNA片段是否存在時，該片段的量比較少，如果是直接檢測，則不容易檢測出來，這時如果采用該技術，可以在體外（比如EP管內）對該DNA片段進行擴增。何世成等[4]對GenBank中的PPRV及疫苗毒株設計引物和特異探針建立PPRV野毒與疫苗毒株的雙重熒光RT-PCR鑒別檢測方法，可以有效區分野毒和疫苗毒株，特異性、靈敏度、重復性均表現較好，適用于臨床檢測。在PPR與其他病種（山羊痘、藍舌病、口蹄疫等）的鑒別診斷方法建立上，目前國內外學者已經建立了雙重和多重RT-PCR檢測方法。

21世紀初，Notomi等[5]發明的LAMP是根據目的基因的保守序列設計出1組引物，即內外引物（FIP、BIP，F3、B3），利用Bst DNA聚合酶的相關功能對目的基因片段進行特定的指數式體外擴增，以檢測出目的基因。徐瀅等[6]根據GenBank公布的PPRV F基因設計特異性LAMP引物建立的方法對臨床樣品檢測，建立特異性、靈敏度均好，適用于基層養殖場快速、可視化的PPRV LAMP檢測方法。另外，范晴等[7]比對GenBank中PPRN基因和藍舌病NS3基因保守區域建立一種可視化多重熒光RTLAMP方法用于檢測PPRV和藍舌病病毒的核酸，該方法對PPRV和藍舌病病毒高度特異，與口蹄疫病毒、鹿流行性出血熱病毒、牛瘟病毒、山羊痘病毒等其他反芻動物病毒均無交叉反應，具有較好的臨床應用價值。

5 綜合防控措施

5.1 加強引種調運、檢疫監管工作

貴州省黔東南州先后發生5 起PPR，主要原因是養殖戶在引種調運時，未經輸出地、調入地動物監督機構衛生檢疫或檢疫不嚴格，造成疫情發生，因此建議養殖戶在引種時，要到無疫病發生地區調運活羊，開展嚴格產地檢疫，到場后再隔離飼養45 天。在這段時間若發生疫病可將其控制在隔離點內，避免病原大范圍傳播。隔離期滿45 天后，經當地動物衛生監督機構批準后，才能逐步合群飼養（同時避免打架），在隔離程中發現患病或者疑似患病的羊要及時撲殺和無害化處理；同時嚴格羊群產地和屠宰檢疫，要加強對養殖戶疫病防控意識的培訓和屠宰場的日常監管巡查。

5.2 加強免疫預防，做好疫情監測

疫苗接種是預防PPR最重要的措施。免疫后的有效保護期一般為2 年。推薦免疫程序：羊群在出生1 個月后肌內注射疫苗1 頭份，以后每間隔2 年再免疫1 次。在每年春、秋兩防后，各縣市疫病預防控制中心完成PPR免疫抗體監測和病原檢測抽樣工作，根據監測和檢測情況及時進行反饋、分析、總結、預警、預報。對抗體合格率低于70%以下羊群，需要再次加強免疫。

5.3 增強管理水平，提高羊群抵抗力

日常飼養管理中，堅持自繁自養，在春、秋兩季進行科學驅蟲，在補充精料時，要適當添加電解多維以及礦物質，在母羊懷孕后期、哺乳期限制遠距離放牧，提高精料比例，從而提高羊群的抵抗能力。保證空氣流通與飼料、飲水的清潔，定期做好羊群及養殖環境清掃和消毒工作，將羊群排泄物及其他垃圾進行清理和無害化處理，避免細菌和病毒滋生，最大限度降低PPR的發生率。

5.4 科學規范選址，合理優化布局

貴州省黔東南州為典型的山區地貌，林地200 多萬公頃，有著豐富的喬木、灌木、蔓藤、山草、植被，同時具有良好的自然氣候以及生態環境，為羊只提供了優質豐盛牧草。養殖場的選址和圈舍的布局要充分結合當地的養殖模式、地形、地勢、環保、防疫、交通、水電等因素，符合動物防疫辦證要求，最好能夠與大自然形成天然屏障，從而減少羊群患病以及大范圍傳播幾率，提高養殖戶的經濟效益。

5.5 加強宣傳，建立健全應急預案機制

各級相關部門應加強對PPR防控知識宣傳，開展知識培訓講座，提高畜牧部門人員及養殖戶對該病的認知與重視。當發生PPR后不允許治療，應限制羊群移動，立即上報疫情，及時采取樣品，迅速送檢確診；確診后進行劃定疫點、疫區，嚴格按照“早、快、嚴、小”的原則，對疫區實施封鎖；撲殺疫點所有羊群，對病死羊及產品、排泄物、污染草料、污水嚴格進行無害化處理；對污染車輛、工具、用具、環境進行徹底消毒；對疫區內的羊群進行疫病監測；對疫區、受威脅區健康羊群進行緊急免疫接種；經驗收合格后，方能解除封鎖。

6 小結

PPR應堅持預防為主，增強日常飼養管理水平，做好免疫和補免接種，加強引種調運檢疫，做好抗體、病原檢測和疫情監測，強化培訓宣傳建立應急機制。結合流行病學、臨床癥狀，解剖變化及時發現診斷、及時隔離撲滅等綜合防控，控制PPR傳播和擴散，把損失降到最低。