一例集約化豬場偽狂犬的診斷及防控

關金連 ，趙志偉 ，韋錦福 ，賀東生

（1.華南農業大學獸醫學院 廣東省動物源性人獸共患病預防與控制重點實驗室，廣東 廣州 510640；2.廣西賀州市八步區動物疫病預防控制中心，廣西 賀州 542800）

筆者團隊開展了一個豬場暴發偽狂犬病（Pseudorabies，PR）后的確診和防控實踐。通過發病情況調查、觀察臨床癥狀和剖解組織病變，初步判斷某集約化豬場暴發了偽狂犬病。采集2頭典型病豬的病料經PCR鑒定為偽狂犬病毒（PRV）陽性，采集10頭病豬的血清經PRV gE-ELISA檢測為陽性（9/10），確診該豬場流行和暴發的為豬偽狂犬病。確診后對該場豬群采取了隔離、消毒和緊急接種等綜合防控措施，快速制止了該豬場PR的流行，取得顯著的防控效果。

1 發病情況調查

某集約化養豬場于2021年7月出現定位欄懷孕母豬流產、產房母豬出現早產、產死胎及產木乃伊胎的數量增加，死胎率達30%，并且母豬產后出現高燒不食，產后乳房炎、子宮炎增多現象；產房內10日齡仔豬出現高燒扎堆、口吐白沫大量流涎、間歇式發抖抽搐、運動不協調、頸部肌肉僵硬、四肢劃水游泳樣等神經癥狀，最后昏迷死亡，部分仔豬還出現腹瀉，發病率高達100%，死亡率達 95%，腹瀉仔豬按大腸桿菌使用常用抗生素治療無效。

回顧該豬場最近引種情況，發現豬場同年4月份從某種豬場引進了70頭后備母豬和2頭后備公豬，在豬場發病時，這批后備豬已投入使用。經統計，后備母豬配種后返情率高占35%，此批后備豬流產率也占流產豬總數的50%。通過臨床癥狀和引種史分析，懷疑是新引進的這批種豬帶有PRV野毒，因為引種前后和混群前都沒有進行PRV野毒抗體和病原檢測，可能攜帶PRV野毒。

2 臨床癥狀

產房15日齡內仔豬癥狀表現最為明顯，表現在體溫升高到41℃左右、食欲廢絕；出現耳部皮下、腹下潮紅；出現中樞神經系統癥狀，開始為運動不協調、身體震顫、唾液分泌增多、頸部肌肉僵硬、四肢劃水樣運動、眼球震顫，發展至角弓反張，最后昏迷死亡，病程不超過72 h，病死率高達100%。部分48 h內新生仔豬發病，會出現嘔吐、甚至腹瀉，并在24～36 h內死亡。15日齡以上仔豬表現略為輕點，癥狀沒那么明顯，病死率約70%。

保育舍仔豬體溫升高；出現噴嚏、流涕及劇烈咳嗽等呼吸系統癥狀，仔豬表現為腹式呼吸，呼吸困難，部分7 d后自行恢復，部分發生死亡；部分豬還出現肌肉震顫、劇烈抽搐、驚厥，部分豬后軀麻痹，運動失衡；保育舍發病率約為50%，死淘率約為30%。

懷孕舍的妊娠母豬返情率達到了30%，比往年同期返情率顯著升高。妊娠35日以上的母豬發生部分流產。產房母豬出現產死胎和木乃伊胎，產弱仔和死胎等現象增多。

3 病理變化

剖檢病死仔豬的大體病變有：扁桃體出現充血、出血點、部分扁桃體及咽喉頭出現明顯壞死；出現神經癥狀的仔豬的腦膜表面出血或充血，腦脊液增多；肝臟和脾臟表面出現灰白色壞死病灶；腎臟布滿針尖樣大小出血點；肺表現充血、出血、水腫；卡他性胃炎和腸炎；淋巴結出血等病變。流產母豬的胎衣可見白色壞死灶。

4 病料采集與處理

無菌采集3頭發病典型的病死仔豬的腦、扁桃體、肝、腎、脾等組織病料，加冰保存送檢。將采集的病料剪碎、同時添加無菌PBS，用組織搗碎機搗碎研磨制成懸液；組織懸液于-80℃與4℃反復凍融3次；低速離心后小心吸取上清液。上清液置-80℃冰箱凍存備用。

全場使用一次性采血管采用前腔靜脈采血法采集乳豬發病對應的母豬和發病保育豬群的血液各5份，每頭豬至少采集2 mL。所采集的血液在常溫下靜置30 min后，血清析出來后，置于4℃運輸送檢。

5 PRV gE-ELISA檢測

將采集的血清樣品使用離心機低速離心，將析出血清轉移至潔凈EP管并保存于4℃冰箱。采用IDEXX的PRV gE ELISA試劑盒按說明書進行偽狂犬野毒抗體檢測。

6 PRV的PCR鑒定結果

瓊脂糖凝膠電泳結果出現了與PRV陽性結果預期大小（805 bp）相同的DNA條帶（圖1）。

圖1 PRV gE的PCR擴增結果

7 PRV gE-ELISA檢測

10份樣品的PRV gE-ELISA檢測結果為：母豬偽狂犬野毒抗體陽性率為5/5，保育豬的為4/5。提示豬群為偽狂犬感染。

綜合上述的豬場發病情況、引種史、臨床發病癥狀，剖檢病豬組織病變、病料PRV的PCR鑒定和gE ELISA檢測，確診該豬場豬群為偽狂犬的急性爆發。

8 防控措施

（1）病死豬處理。按臨床表現區分發病豬和健康豬群，將發病豬集中隔離飼養。對病死豬、流產胎兒、死胎、胎衣無害化處理。用碘酸、醛類、酚類等消毒劑對全場進行嚴格消毒，尤其是發病豬舍及周圍環境，保證每24 h消毒1次，連續消毒7 d。

（2）野毒抗體檢測和緊急免疫。對全場所有母豬抽血進行實驗室PRV gE-ELISA檢測，將所有gE抗體陽性豬群集中隔離至一棟豬舍中單獨飼養，不可繼續混養，由專人專用工具飼養。全場母豬緊急肌肉注射接種優質的PRV基因缺失活疫苗，按照正常量的2倍劑量進行肌肉免疫，3周后再加強免疫1次。母豬免疫注射執行1頭豬使用1個針頭。淘汰2頭PRV gE-ELISA檢測結果為陽性的公豬，其它幾頭公豬緊急接種PRV活疫苗，按照正常量的2倍劑量進免疫。3周后再加強免疫1次。對剛出生10日以內的仔豬滴鼻免疫1頭份，對10日齡以內發病豬直接淘汰無害化處理。對10日以上的發病仔豬進行緊急肌肉免疫1頭份，3周后再加強免疫1次。對保育舍仔豬緊急免疫2頭份，3周后再加強免疫1次。

（3）治療和保健。所有豬群飼料添加替米考星、卡巴匹林鈣及電解多維，連用7 d。發病的乳豬和保育豬都統一肌注長效頭孢、控制細菌的繼發感染。

（4）加強豬群的科學飼養管理。做好各項環控指標的控制，創造優良飼養環境，執行全進全出的飼養方法，減少不同豬群疾病的交叉感染，提高營養水平，提高豬群的自身免疫力。采取嚴格的生物安全措施，重點加強滅蚊蠅及滅鼠的相關工作；各棟豬舍工作人員相對固定，盡量避免流動，若非生產工作需要，減少串舍，禁止發病豬舍與健康豬舍之間的人流與物流；嚴格執行生產線衛生防疫制度與消毒規范；嚴禁貓、狗在豬場內隨意活動，加強滅鼠、滅蚊、滅蠅工作。若發生母豬流產或產死胎，必須要用不滲漏的膠桶收集，收集完后密封，并盡快做無害化處理，對于污染過地面要進行徹底消毒；及時淘汰各階段低價值的病殘豬，減少傳染源，降低環境的病毒裁量。

9 防控結果

通過采取上述防控措施，7日后豬群新發病率開始減少，新發病的癥狀開始逐漸減輕、總的死亡率也開始逐漸下降。1個月后，發病率降低約為30%、死亡率顯著下降。三周后，對豬群再次加強免疫偽狂犬活苗一次，之后一個月的生產成績基本恢復正常水平，產房成活率從55%恢復到了90%；保育成活率從78%恢復到了95%；育肥成活率從90%恢復到了95%。

豬群穩定后，重新調整整個豬場執行的免疫程序，公豬、母豬按1頭份/頭每3個月免疫1次；后備種豬按1頭份/頭配種前6周和3周各免疫1次；產房仔豬按1頭份/頭1天齡之內滴鼻免疫1次；商品豬按1頭份/頭8周齡1免，3周后加免1次。使用該防控措施后，3至6個月期間多次回訪該豬場，期間無再次爆發，則防控效果良好。