華蟾素膠囊聯(lián)合FOLFOXIRI方案對晚期直腸癌患者免疫功能和腫瘤標(biāo)志物水平的影響*

程功名 韓建波 單留群 劉旭呈 石文杰 丁永斌

晚期直腸癌患者常伴有腫瘤細(xì)胞遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或侵犯周圍器官組織，一般手術(shù)治療無法進(jìn)行根治性切除，可采取化療[1]。FOLFOXIRI [伊立替康+奧沙利鉑+亞葉酸鈣+5-氟尿嘧啶（5-FU）]是臨床上較為常用的晚期直腸癌化療方案，各藥物聯(lián)合應(yīng)用可產(chǎn)生協(xié)同的細(xì)胞毒作用和抗腫瘤活性，具有一定的臨床療效。但晚期直腸癌患者的代謝功能明顯降低、免疫機(jī)制嚴(yán)重紊亂，而上述細(xì)胞毒性藥物具有無差別性，對機(jī)體免疫功能并無明顯改善作用[2]。血管新生與腫瘤細(xì)胞的生長、繁殖、轉(zhuǎn)移等過程密切相關(guān)。華蟾素膠囊可通過抑制腫瘤血管生成、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能等產(chǎn)生抗腫瘤作用[3]，可能更適用于晚期直腸癌患者?；诖?，南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬南京醫(yī)院進(jìn)行相關(guān)研究，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬南京醫(yī)院2020 年1 月-2022 年1 月收治的62 例晚期直腸癌患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合直腸癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；（2）預(yù)計(jì)生存期＞3 個月；（3）TNM 分期為ⅢB、Ⅳ期；（4）可耐受化療。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）對本研究所用藥物過敏；（2）近3 個月接受過生物治療、放療等其他抗腫瘤治療；（3）合并其他部位腫瘤；（4）合并神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)等重大疾病。按照隨機(jī)數(shù)字表法分為聯(lián)合組和化療組，各31 例。本院醫(yī)學(xué)倫理委員會已批準(zhǔn)本研究。試驗(yàn)獲得患者及家屬同意并簽署知情同意書。

1.2 方法（1）化療組予以FOLFOXIRI 方案治療。治療第1 天：①予以180 mg/m2伊立替康（生產(chǎn)廠家：江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H20061276，規(guī)格：5 mL∶100 mg）+0.9% 氯化鈉250 mL 靜脈滴注，維持90 min；②予以85 mg/m2奧沙利鉑（生產(chǎn)廠家：江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H20000337，規(guī)格：50 mg）+5%葡萄糖注射液500 mL 靜脈滴注，維持2 h；③予以200 mg/m2亞葉酸鈣（生產(chǎn)廠家：廣東嶺南制藥有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H20057260，規(guī)格：50 mg）+0.9% 氯化鈉溶液250 mL 靜脈滴注；④予以400 mg/m25-FU（生產(chǎn)廠家：天津金耀藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H12020959，規(guī)格：10 mL∶0.25 g）+0.9%氯化鈉溶液250 mL 靜脈滴注，維持2 h。治療第2 天：予以相同劑量的亞葉酸鈣及5-FU 靜脈滴注。以21 d 為1 個治療周期，共治療6 個周期。（2）聯(lián)合組在化療組基礎(chǔ)上予以華蟾素膠囊（生產(chǎn)廠家：陜西東泰制藥有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字Z20050846，規(guī)格：0.25 g）口服，0.5 g/次，3 次/d，于每個治療周期的第1～14 天持續(xù)服用，治療6 個周期。

1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) 治療前及治療后（治療6 個周期后）觀察兩組免疫功能、腫瘤標(biāo)志物及血管生成因子水平。（1）免疫功能：治療前后抽取患者肘部靜脈血5 mL，采用流式細(xì)胞儀（賽默飛世爾科技，型號Attune NxT）檢測兩組NK 細(xì)胞、CD4+細(xì)胞、CD8+細(xì)胞水平，并計(jì)算CD4+/CD8+。（2）腫瘤標(biāo)志物：治療前后抽取患者肘部靜脈血5 mL，采用電化學(xué)發(fā)光法檢測兩組糖類抗原19-9（CA19-9）、糖類抗原125（CA125）、癌胚抗原（CEA）水平。（3）血管生成因子：治療前后抽取患者肘部靜脈血5 mL，檢測兩組轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）及缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）水平，檢測方法為放射免疫法。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)錄入SPSS 22.0 軟件中分析，計(jì)數(shù)資料用率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料用（±s）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用配對t檢驗(yàn)；等級資料采用秩和檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組基線資料對比 兩組性別、年齡、TNM分期、腫瘤分化程度比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性，見表1。

表1 兩組基線資料對比

2.2 兩組免疫功能對比 治療前，兩組免疫功能各指標(biāo)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，聯(lián)合組NK 細(xì)胞、CD4+、CD4+/CD8+水平均高于治療前，且聯(lián)合組均高于化療組，聯(lián)合組CD8+水平低于治療前，且聯(lián)合組低于化療組（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組免疫功能對比（±s）

表2 兩組免疫功能對比（±s）

*與治療前比較，P＜0.05。

2.3 兩組腫瘤標(biāo)志物對比 治療前，兩組各腫瘤標(biāo)志物比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，聯(lián)合組CA19-9、CA125、CEA 水平均低于治療前，且聯(lián)合組均低于化療組（P＜0.05）。見表3。

表3 兩組腫瘤標(biāo)志物對比（±s）

表3 兩組腫瘤標(biāo)志物對比（±s）

*與治療前比較，P＜0.05。

2.4 兩組血管生成因子對比 治療前，兩組各血管生成因子比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，聯(lián)合組TGF-β1、VEGF、HIF-1α 水平均低于治療前，且聯(lián)合組均低于化療組（P＜0.05）。見表4。

表4 兩組血管生成因子對比（±s）

表4 兩組血管生成因子對比（±s）

*與治療前比較，P＜0.05。

3 討論

晚期直腸癌患者主要表現(xiàn)為腹痛、里急后重、便血、肛門疼痛、大便失禁、排便習(xí)慣改變等癥狀，嚴(yán)重影響患者日常生活[5]。晚期直腸癌常用的治療方案為化療，本研究中選用了FOLFOXIRI 方案，奧沙利鉑、伊立替康、5-FU 等藥物均可通過抑制腫瘤細(xì)胞內(nèi)DNA 的合成、復(fù)制而產(chǎn)生抗腫瘤作用。但由于晚期直腸癌患者腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散范圍較大，病情嚴(yán)重，單一途徑的抗腫瘤藥物已無法滿足患者需要[6]。中醫(yī)藥物治療具有多途徑、多靶點(diǎn)、副作用小的優(yōu)勢。中醫(yī)認(rèn)為直腸癌屬“癥瘕”“腸蕈”范疇，病機(jī)為機(jī)體脾胃受損或外感濕熱致水汽運(yùn)化失調(diào)，水濕內(nèi)生，郁結(jié)于腸，阻滯氣機(jī)，久而化毒，結(jié)積成塊，發(fā)為本病，故治療以清熱解毒、散結(jié)消瘀為主[7]。華蟾素膠囊是一種以干蟾皮為主的中成藥，具有解毒、止痛、消腫的作用。吳宏磊等[8]研究指出，該藥物可通過干擾細(xì)胞周期、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)自噬、破壞腫瘤微環(huán)境、減少腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移、提高機(jī)體免疫功能、抑制腫瘤血管生成等多途徑、多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)發(fā)揮抗腫瘤作用，輔助用于晚期直腸癌患者可能效果更好。

CA19-9、CA125、CEA 均為臨床常用的腫瘤標(biāo)志物，在惡性腫瘤患者體內(nèi)呈高表達(dá)水平，可用于直腸癌的診斷[9]。在本研究中，治療后聯(lián)合組CA19-9、CA125、CEA 水平均低于化療組（P＜0.05），說明華蟾素膠囊有助于降低晚期直腸癌患者腫瘤標(biāo)志物水平，提高臨床療效?？赡艿脑蚴菉W沙利鉑屬鉑類衍生物，為細(xì)胞毒性抗腫瘤藥物，可通過產(chǎn)生烷化結(jié)合物作用于DNA，形成鏈內(nèi)和鏈間交聯(lián)，抑制DNA 的合成、復(fù)制，從而達(dá)到抗腫瘤作用；伊立替康是喜樹堿的衍生物，可通過特異性地作用于拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ，阻止斷開的DNA 單鏈再連接，從而阻止腫瘤細(xì)胞的分裂、繁殖；5-FU 可通過干擾胸腺嘧啶核苷酸合成酶合成過程而抑制DNA 合成，也可轉(zhuǎn)化為氟尿嘧啶核苷酸，摻入進(jìn)RNA 鏈條中，干擾蛋白質(zhì)合成，進(jìn)而產(chǎn)生殺滅腫瘤細(xì)胞的作用；亞葉酸鈣可增強(qiáng)5-FU 的臨床療效[10-12]。華蟾素膠囊可通過干預(yù)腫瘤細(xì)胞內(nèi)核酸代謝，阻斷DNA 和RNA 合成過程，進(jìn)而影響細(xì)胞有絲分裂，直接滅殺腫瘤細(xì)胞[13-14]；也可通過干擾拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ、Na+/K+ATP 酶、PKC 同工酶等活性，影響細(xì)胞分裂的各信號通路，加速腫瘤細(xì)胞凋亡[15-16]；還可通過抑制腫瘤血管生成、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能等方面產(chǎn)生抗腫瘤作用。

在本研究中，治療后聯(lián)合組NK 細(xì)胞、CD4+、CD4+/CD8+水平高于化療組，CD8+水平均低于化療組（P＜0.05），說明華蟾素膠囊有助于增強(qiáng)晚期直腸癌患者機(jī)體免疫功能?？赡艿脑蚴侨A蟾素膠囊具有免疫調(diào)節(jié)的作用，可通過上調(diào)CD4+水平及誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞分泌產(chǎn)生白細(xì)胞介素-2，從而提高機(jī)體細(xì)胞、體液免疫功能；也可通過增強(qiáng)機(jī)體NK 細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等活性而增強(qiáng)免疫功能。沙曉鋒等[17]通過對晚期直腸癌患者進(jìn)行分組用藥6周后發(fā)現(xiàn)，聯(lián)用華蟾素組患者的免疫功能有明顯增強(qiáng)，進(jìn)一步說明華蟾素對機(jī)體免疫功能的積極影響。

腫瘤細(xì)胞的生長、繁殖過程中，血管生成具有重要作用。TGF-β1、VEGF 具有調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長和分化的作用，可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞血管生成；HIF-1α 可在缺氧狀態(tài)下促進(jìn)細(xì)胞分化和血管新生[18-19]。在本研究中，治療后聯(lián)合組TGF-β1、VEGF、HIF-1α 水平均低于化療組（P＜0.05），說明華蟾素膠囊有助于抑制晚期直腸癌患者腫瘤血管生成。可能的原因是腫瘤細(xì)胞為滿足自身生長、繁殖的需求，通常會以自身為中心，向四周擴(kuò)散腫瘤血管汲取營養(yǎng)，故可從抑制血管生成的角度進(jìn)行抗腫瘤治療。華蟾素膠囊可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抑制細(xì)胞增殖，并可通過下調(diào)VEGF、TGF-β1 等表達(dá)，破壞腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)，阻止細(xì)胞分化、增殖，從而加快腫瘤細(xì)胞凋亡過程[20]。

綜上所述，華蟾素膠囊聯(lián)合FOLFOXIRI 方案治療晚期直腸癌患者有助于抑制腫瘤血管生成，降低腫瘤標(biāo)志物水平，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能。