枯草芽孢桿菌對87～93 w蛋雞生產性能、蛋品質、血清生化的影響

任躍昌， 趙恬玉， 李林葵， 朱政奇， 張凱瑛，馬璐璐， 張鵬飛， 孫作為， 楊維仁*

（1.山東農業大學動物科技學院，山東泰安 271018；2.山東農業大學食品科學與工程學院，山東泰安 271018；3.山東玖瑞農業集團有限公司，山東青島 266000；4.山東省萊陽市柏林莊畜牧獸醫站，山東煙臺 265200）

枯草芽孢桿菌屬于革蘭氏陽性菌，是農業農村部批準添加的飼用益生菌之一，能夠誘導產生在高溫、酸性環境下具有極強的環境適應能力的抗逆性較強的內源孢子（Fortec等，2016；賈久滿等，2015）。枯草芽孢桿菌能夠泌蛋白酶和纖維素酶等多種生物活性因子，并且可以有效地改善腸道菌群組成，促進動物機體對飼糧營養的消化利用（張安榮等，2020；裴躍明等，2016）；同時枯草芽孢桿菌還可以產生細菌素、多不飽和脂肪酸，能夠調節腸道pH，對多種致病菌產生抑制作用（Duc等，2004）。產蛋后期蛋雞由于氧化應激的長期積累，抗應激能力變差，出現產蛋性能降低、破蛋率增加、哈氏單位下降以及蛋清稀釋等現象，而哈氏單位則直接與貨架期相關（Vlěcková等，2019）。大量的研究結果表明，飼糧添加枯草芽孢桿菌能夠調節腸道菌群，提高養分的表觀代謝率；在蛋雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌能夠提高產蛋率、平均蛋重、哈氏單位，降低料蛋比（Liu等，2018；黃晨軒等，2018；趙姝嫻等，2018；范彧等，2012）。但目前枯草芽孢桿菌對600日齡后的蛋雞生產性能、蛋品質等指標研究較少，因此本試驗旨在探究在87 w蛋雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌對產蛋性能、血清生化及蛋品質的影響，為應用枯草芽孢桿菌延長產蛋周期提供數據。

1 材料與方法

1.1 試驗設計 采用單因子試驗設計，選取健康狀況、產蛋性能相近的87 w海蘭褐商品蛋雞2400只，隨機分為4個處理，每個處理6個重復，每個重復100只雞。處理Ⅰ組飼喂玉米-豆粕型基礎飼糧，處理Ⅱ組在基礎飼糧中添加0.05%博落回提取物作為陽性對照，處理Ⅲ、Ⅳ組分別添加0.2%和0.4%的枯草芽孢桿菌。預試期1 w，正試期6 w。

1.2 試驗材料 試驗所用枯草芽孢桿菌由煙臺深海生物科技有限公司提供，枯草芽孢桿菌含量≥5.5×108CFU/g。博落回提取物由北京科為博生物科技有限公司提供，有效成分為白屈菜紅堿（≥900 mg/kg）和血根堿（≥1500 mg/kg）。

1.3 試驗飼糧與飼養管理 《基礎飼糧參照雞飼養標準》（NY/T 33—2004）配制，基礎飼糧組成及營養水平見表1；采用半開放式雞舍3層立體籠養，每天光照時間保證16～17 h。自由采食和飲水。

表1 基礎飼糧組成及營養水平（風干基礎）

1.3 測定指標與方法

1.3.1 生產性能 以重復為單位，記錄產蛋總數、產蛋總重、破蛋數。計算產蛋率、平均蛋重、料蛋比和平均日采食量。

1.3.2 蛋品質 試驗結束前連續3 d每個重復隨機選5枚雞蛋，使用Robotmation EMT-5 200多功能蛋品質分析儀測定哈氏單位、蛋白高度、蛋黃顏色等蛋品質指標。

1.3.3 輸卵管指數 試驗結束時，每個處理選取5只雞屠宰后取輸卵管，生理鹽水洗凈、擦干、稱重，計算輸卵管指數。

1.3.4 血清生化 試驗結束，每個重復隨機選取2只雞進行翅下靜脈采血，采血前禁食12 h，2500 r/min離心10 min，取上清液-20℃保存。使用山東農業大學全自動生化分析儀測定血清堿性磷酸酶（ALP）活性以及甘油三脂（TG）、膽固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）含量。

1.4 統計分析 數據使用SAS 9.2軟件進行單因子分析，結果以“平均值±標準差”表示，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標準。

2 結果

2.1 枯草芽孢桿菌對87～93 w蛋雞生產性能的影響 由表2可見，與對照組相比，飼糧添加0.05%博落回提取物組以及0.2%、0.4%枯草芽孢桿菌組的產蛋率分別提高了1.65%、3.07%、0.97%，次蛋率分別降低17.65%、55.89%、55.88%；料蛋比顯著降低，以0.2%枯草芽孢桿菌組的料蛋比最低，達到了2.23；與陽性對照組博落回提取物組相比，枯草芽孢桿菌組的次蛋率顯著降低。

表2 枯草芽孢桿菌對87～93 w蛋雞生產性能的影響

2.2 枯草芽孢桿菌對87～93 w蛋雞蛋品質的影響 由表3可見，不同處理組的蛋品質指標均無顯著差異（P＞0.05）。

表3 枯草芽孢桿菌對87～93 w蛋雞蛋品質的影響

2.3 枯草芽孢桿菌對87～93 w蛋雞蛋殼顏色的影響 由表4可知，與對照組相比，博落回提取物組和枯草芽孢桿菌組的紅度值（a*）和黃度值（b*）顯著升高，蛋殼顯示紅色的程度更深。

表4 枯草芽孢桿菌對87～93 w蛋雞蛋殼顏色的影響

2.4 枯草芽孢桿菌對87～93 w蛋雞血清生化的影響 由表5可知，與對照組相比，飼糧添加枯草芽孢桿菌能顯著降低血清TC和HDL的含量，并且0.4%枯草芽孢桿菌組更為顯著。

表5 枯草芽孢桿菌對87～93 w蛋雞血清生化的影響

2.5 枯草芽孢桿菌對87～93 w蛋雞輸卵管指數的影響 由圖1可知，與對照組和博落回提取物組相比，飼糧添加0.2%枯草芽孢桿菌能夠提高87～93 w蛋雞輸卵管指數。

圖1 枯草芽孢桿菌對87～93 w蛋雞輸卵管指數的影響

3 討論

3.1 枯草芽孢桿菌對87～93 w蛋雞生產性能的影響 裴躍明等（2016）在47周齡新楊黑蛋雞的基礎飼糧中分別添加0.25%、0.5%、0.75%的枯草芽孢桿菌 （活菌數分別為16.25×105、32.5×105、48.75×105CFU/g），顯著提高了蛋雞產蛋率，增加蛋重，降低破蛋率、料蛋比。徐海燕等（2012）的研究結果表明，在80周齡海蘭褐蛋雞飼糧中添加5×105CFU/g的枯草芽孢桿菌可提高產蛋率和蛋殼質量，降低料蛋比。Ribeiro等（2014）添加8×105CFU/g的枯草芽孢桿菌，結果表明，平均蛋重和蛋品質指標提高。李俊波等（2009）在45周齡尼克珊瑚粉蛋雞飼糧中添加250 mg/kg和500 mg/kg枯草芽孢桿菌制劑（活菌數分別為5×105、10×105CFU/g），顯著降低了破蛋率，并且在一定程度上提高了平均蛋重以及蛋殼厚度。本次試驗結果表明，在87～93 w海蘭褐蛋雞飼糧中添加0.2%、0.4%的枯草芽孢桿菌（活菌數分別為11×105、22×105CFU/g）提高了產蛋率和平均蛋重，降低了料蛋比和破蛋率。分析原因可能是由于枯草芽孢桿菌進入腸道后可以迅速復活并分泌活性物質，將復雜的大分子營養物質降解；同時活菌發酵物產物含有大量的多糖、寡糖、肽類、磷活性物質，能夠抑制病原微生物的繁殖，維持腸道健康，提高養分消化吸收率（祝天龍等，2015）。

3.2 枯草芽孢桿菌對87～93 w蛋雞蛋品質和蛋殼顏色的影響 哈氏單位和蛋白高度是衡量蛋品質的重要指標，關于枯草芽孢桿菌對蛋品質影響，不同的試驗結果不完全一致。Neijat等（2019）的研究結果表明，枯草芽孢桿菌能夠提高哈氏單位和蛋白高度。王源昊等（2021）在69周齡海蘭褐蛋雞飼糧添加活菌數為10×105CFU/g的枯草芽孢桿菌發現，顯著提高了哈氏單位和蛋黃顏色等級，且有提高蛋白高度的趨勢。本次試驗發現，博落回提取物組和枯草芽孢桿菌組雞蛋的蛋白高度、哈氏單位、蛋黃顏色、蛋殼強度無顯著的差異，造成這種差異的原因可能與試驗周期、飼養環境、動物日齡有關聯，同時枯草芽孢桿菌商品菌株來源不一，活性也不同，因此還需要進行大量篩選對比研究，以便于在飼料配方中的廣泛應用。

蛋殼顏色是消費者判斷商品雞蛋優劣的直接參考指標。褐殼蛋的蛋殼色素主要是原卟啉，但也存在膽綠素以及膽綠素的鋅螯合物等其他色素（王晶晶，2008）。本次研究發現，枯草芽孢桿菌組的紅度值（a*）和黃度值（b*）顯著升高，蛋殼顯示紅色的程度更深。Hooge（2007）研究報道，羅曼布朗母雞飼糧添加枯草芽孢桿菌至63周，蛋殼顏色深度得到增強。Hansson等（2007）研究提出，枯草芽孢桿菌鐵螯合酶中的His183和Glu264能夠促進金屬離子插入原卟啉中氨基酸殘基的作用機制。枯草芽孢桿菌對蛋殼顏色調控的作用方式還需要進一步的深入研究。

3.3 枯草芽孢桿菌對87～93 w蛋雞血清生化指標的影響 血液生化指標能夠直接反映動物機體的物質代謝以及組織機能狀態。血清TP、ALB是衡量機體免疫水平和肝臟功能是否正常的重要指標。郭軍蕊等（2017）研究發現，產蛋雞飼糧添加枯草芽孢桿菌對血清TP、ALB無顯著影響，本次的試驗結果與其一致。而鄭超等（2020）在飼糧添加2×106CFU/g的枯草芽孢桿菌顯著提高了380日齡京粉2號蛋雞的血清TP、ALB。不同的試驗結果可能是由于菌株、用量以及蛋雞品種不同造成。TC和TG是反映脂肪代謝水平的重要指標，TC含量不正常上升往往會引起腎臟、心血管疾病，TG含量的異常升高通常反映出脂蛋白代謝異常（李衛芬等，2014）。血清TC含量受參與膽固醇合成的關鍵酶-羥甲基戊二酸單酰輔酶A活性的影響。Fukushima等（1995）研究結果表明，益生菌能夠抑制膽固醇合成過程中的關鍵酶。李衛芬等（2014）在肉雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌發現，血清TC和TG含量顯著降低；查翹楚等（2017）在19周齡大午金鳳蛋雞上的研究證明，添加枯草芽孢桿菌能夠降低血清膽固醇。本次試驗結果表明，在87～93 w海蘭褐蛋雞飼糧添加枯草芽孢桿菌能夠降低血清膽固醇含量，表明枯草芽孢桿菌能在維持脂質代謝方面發揮作用。

4 結論

在本試驗條件下，87～93 w蛋雞基礎飼糧中添加枯草芽孢桿菌能顯著提產蛋率、平均蛋重，明顯改善蛋殼顏色和脂類代謝。綜合考慮養殖生產、飼糧成本，在飼糧中添加0.2%枯草芽孢桿菌較為合適（活菌數為11×105CFU/g）。