劉英杰 ,齊六衛,董彥龍,羿 巖
(沈陽偉嘉生物技術有限公司,遼寧 沈陽 110027)
豬藍耳病是由高致病性豬藍耳病毒(PRRSV)引起的一種豬場常見疾病,又稱豬呼吸與繁殖系統綜合征,具有高傳播性、高致病性、高死亡性的特點。該病主要影響妊娠后期母豬和仔豬,會造成妊娠母豬大范圍流產,引發仔豬呼吸系統疾病、生長發育遲緩甚至死亡,成為目前制約集約化生豬養殖發展的一大阻礙。日常防治措施包括疫苗的定期免疫和藥物治療。藥物治療主要包括以黃芪多糖、杜仲提取物為主的增強免疫力的藥物和以泰萬菌素、替米考星等防止繼發感染的抗生素。本文就河北某規模化豬場使用杜仲提取物治療藍耳病前后抗原抗體檢測報告為例展開討論,旨在給生豬集約化養殖過程中一些新的意見和方向。
河北省唐山市豐潤區某豬場,母豬存欄50頭,保育豬存欄210頭,采取自繁自養模式,場內母豬在2周前注射藍耳病疫苗,因怕出現排毒感染,故保育豬沒有注射疫苗。后續保育豬出現咳嗽癥狀,推測為藍耳病。
治療方式采取杜仲提取物連續飼喂21 d,隨機選擇取整齊度差,精神狀態差的保育豬15頭進行抗原抗體檢測分析。具體方法如下:并分別于藥前、給藥后,進行豬前腔靜脈采血3~5 mL,按3 000 rpm/min離心10 min,分離血清。
通過熒光定量聚合酶鏈式反應檢測豬繁殖與呼吸綜合征病毒核酸(藍耳病毒抗原),采用酶聯免疫吸附測定試劑盒方法檢測抗體(藍耳病毒抗體),操作方法和結果判定標準均參照試劑盒說明書。
藍耳病抗體的判定:通過藍耳病抗體檢測到樣本和對照的吸光度值換算出每個樣本的樣本/陽性對照比率(S/ P),根據S/ P值進行判定抗體。當S/P值大于等于0.4判定為陽性;當S/ P值小于0.4判定為陰性,體內無抗體的存在。
藍耳病抗原CT值的判定:通過試劑盒CT值及曲線形狀對標本結果進行判定。當標本檢測結果CT值≤35或有明顯指數增長期時判定為陽性;當標本檢測結果CT值在35-38范圍內。此時應對標本進行重復檢測,如重復實驗結果CT值仍在35~38范圍內,有明顯的指數增長期,則判定為陽性,否則為陰性;當樣本檢測結果CT值>38或無CT值判定為陰性。
見表1 ,在給杜仲提取物治療藍耳病之前,抗原檢測報告結果顯示:15份血清經合樣之后形成3份報告,3份均為陽性;抗體分析結果顯示:所檢測的15份血清樣本,血清抗體陽性率為100%。因為保育豬并沒有注射過藍耳疫苗,故血液中檢測出抗原可以分析出保育豬群暴發了藍耳病感染,機體因藍耳病毒的存在,產生了部分抗體。具體結果如表2、表3。

表1 檢測報告結果

表2 給藥前豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗原熒光PCR定量檢測明細
連續飼喂 21 d 杜仲提取物后抗原抗體檢測報告結果見表4、表5、表6。

表4 檢測報告結果

表5 給藥后豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗原熒光PCR定量檢測明細

表6 給藥后豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗體酶聯免疫吸附檢測明細
連續飼喂 21 d 杜仲提取物后抗原抗體檢測統計分析結果見表7和圖1。

圖1 給藥前后抗原抗體變化情況

表7 連續飼喂21天杜仲提取物后抗原抗體檢測統計分析結果
抗體值 spss 分析結果見表8、表9、表10。

表8 成對樣本統計量

表9 成對樣本相關系數

表10 成對樣本檢驗
因15號豬只人為原因淘汰,剩余14頭試驗豬只前后抗體結果對比分析:(1)抗原由100%的陽性率降低到35%,使用杜仲提取物后對于豬群更好的清除藍耳病毒具有一定的促進作用。(2)抗體的離散度從38%降低到19%,降低了19個百分比,說明豬群的整個抗體水平更趨于一致,更有利于大群的整體藍耳防控。(3)從統計分析的結果看,給藥前與給藥后抗體值差異極顯著(P<0.05)也充分證明在用藥前后抗體水平有顯著變化。
該試驗通過檢測使用杜仲提取物前后豬群抗原抗體的變化情況,進一步證明了當藍耳病毒暴發時豬群出現病毒血癥后表現出呼吸困難,咳嗽,流產等情況時藥物治療的必要性。
使用藥物治療藍耳病時應遵循兩個原則:(1)使用增強免疫力藥物,加快機體清除藍耳病毒,減少血液中藍耳病毒滴度,縮短病毒血癥時間;(2)使用抗生素快速控制因藍耳病毒引起的繼發感染。
除了選擇合適的藥物減少藍耳病毒引起的損失外,還應該做好綜合防控。首先應做好環境衛生和消毒工作,其次做好豬群藍耳疫苗的科學免疫,還要注意引種及病死豬的處理問題。只有做到綜合防控,綜合管理,才能在藍耳病毒活躍時獲得最大的養殖效益。