阿糖腺苷對EB病毒相關性傳染性單核細胞增多癥患兒 T淋巴細胞亞群的影響

祁 鑫

（鹽城市第三人民醫院兒內科，江蘇 鹽城 224000）

EB病毒（EBV）屬于人類皰疹病毒4型，主要通過唾液傳播，也可經輸血傳染，與多種惡性腫瘤的發生密切相關。EBV感染是導致傳染性單核細胞增多癥（infectious mononucleosis，IM）的重要因素之一，好發于兒童群體，患兒常見發熱、咽峽炎、頸部淋巴結腫大等癥狀，若未及時得到有效治療，威脅患兒生命安全。對于此癥，臨床上主要進行退熱、抗感染、護肝等對癥治療，但效果不明顯[1]。更昔洛韋為臨床常用抗病毒藥，對于因免疫功能缺陷而感染巨細胞病毒的患兒治療效果較好，但該藥具有細胞毒性，且對于EBV相關性傳熱性單核細胞增多癥（EBV-IM）患兒的抗病毒作用無法達到理想效果[2]。阿糖腺苷為抗病毒藥，主要通過抑制病毒DNA多聚酶活性，以阻斷病毒DNA的合成，對多種病毒的殺滅作用較強[3]。基于此，本研究旨在探討阿糖腺苷治療EBV-IM患兒后，其T淋巴細胞亞群水平的變化，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月至2022年9月鹽城市第三人民醫院收治的54例EBV-IM患兒，并以隨機數字表法分為對照組和觀察組，各27例，對照組中男患兒15例，女患兒12例；年齡3～13歲，平均（8.00±1.21）歲；病程6～13 d，平均（9.50±1.02） d。觀察組中男患兒16例，女患兒11例；年齡2～13歲，平均（8.00±1.23）歲；病程5～14 d，平均（9.50±1.05） d。兩組患兒一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。診斷標準：參照《諸福棠實用兒科學（第8版）》[4]中關于 EBV-IM的診斷標準。納入標準：符合上述診斷標準，有發熱、咽峽炎、肝臟腫大、脾臟腫大等癥狀者；EB病毒DNA（EBV-DNA）陽性、EB病毒早期抗原免疫球蛋白G抗體（EBV-EA-IgG）及EB病毒衣殼抗原免疫球蛋白M抗體（EBV-VCA-IgM）等EBV特異性抗體陽性等。排除標準：有心肌炎、重癥基礎性疾病者；有全身感染性疾病者；有自身免疫性疾病者等。本研究已通過院內醫學倫理委員會批準，所有患兒法定監護人均簽署知情同意書。

1.2 治療方法 對照組患兒行退熱、抗感染、護肝等對癥治療后，加以10 mg/kg體質量注射用更昔洛韋（湖北科益藥業股份有限公司，國藥準字H10980189，規格：50 mg/支）靜脈滴注，2次/d，治療1周后劑量變更為5 mg/kg體質量，1次/d，并繼續持續給藥1周。觀察組患兒對癥治療后，加以注射用單磷酸阿糖腺苷（瑞陽制藥股份有限公司，國藥準字H20084333，規格：0.1 g/支）靜脈滴注，10 mg/kg體質量，1次/d，持續治療2周。

1.3 觀察指標 ①對患兒臨床療效進行判定，分為顯效（用藥5 d內體溫開始下降，7 d內恢復正常，肝臟、脾臟體積縮小，咽峽炎好轉，異型淋巴細胞比例恢復正常）、有效（用藥7 d內體溫開始下降，10 d內恢復正常，肝臟、脾臟體積縮小，咽峽炎好轉，異型淋巴細胞比例下降但未恢復正常）、無效（用藥治療10 d內體溫仍未恢復正常水平，肝臟、脾臟體積等均未見明顯縮小，異型淋巴細胞比例未見明顯改變）[4]。總有效率=顯效率+有效率。②統計兩組患兒臨床癥狀恢復時間（退熱、咽峽炎改善、淋巴結腫大消退、肝臟回縮至正常、脾臟回縮至正常）。③于治療1、2周后采集患兒靜脈血5 mL，抽取其中2 mL，加入淋巴細胞分離液2 mL，以2000 r/min的轉速，離心10 min，吸取白細胞層，然后以12000 r/min離心5 min，去除上清液，在沉淀中加入DNA提取液，應用熒光定量聚合酶鏈反應擴增法檢測EBV-DNA（陽性：擴增曲線呈S形，且EBV-DNA＞1×103copies/mL）；另取3 mL樣本，以3000 r/min離心5 min后采集上層血清，以酶聯免疫吸附實驗法檢測EBV-EA-IgG（陽性：標本吸光度/標準品吸光度＞0.50）、EBV-VCA-IgM（陽性：標本吸光度/標準品吸光度≥0.80）。④血樣采集方法同③，隨后采用流式細胞儀對患兒CD3+、CD4+、CD8+百分比進行檢測，并對 CD4+/CD8+比值進行計算。

1.4 統計學方法 采用SPSS 22.0統計學軟件分析數據，計數資料以[例(%)]表示，行χ2檢驗；經K-S檢驗證實計量資料均符合正態分布，以(±s)表示，行t檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患兒治療效果比較 觀察組患兒治療總有效率[96.30%（26/27）]相比于對照組[70.37%（19/27）]升高，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患兒治療效果比較[ 例(%)]

2.2 兩組患兒臨床癥狀恢復時間比較 觀察組患兒臨床癥狀恢復時間相比于對照組均縮短，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表2。

表2 兩組患兒臨床癥狀恢復時間比較(d，±s)

表2 兩組患兒臨床癥狀恢復時間比較(d，±s)

組別 例數 退熱時間 咽峽炎改善時間 淋巴結腫大消退時間 肝臟回縮至正常時間 脾臟回縮至正常時間對照組 27 4.98±0.60 5.27±0.67 10.87±2.12 7.23±0.81 10.65±1.73觀察組 27 3.65±0.45 4.13±0.48 7.49±2.03 6.21±0.76 7.23±1.68 t值 9.215 7.187 5.984 4.772 7.369 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.3 兩組患兒各項抗體陰轉率比較 治療1、2周后，相較于對照組，觀察組患兒EBV-DNA、EBV-EA-IgG及EBV-VCA-IgM陰轉率均升高，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表3。

表3 兩組患兒各項抗體陰轉率比較[ 例(%)]

2.4 兩組患兒T細胞亞群水平比較 相較于治療前，治療后兩組患兒CD3+、CD8+百分比均降低，觀察組低于對照組；CD4+百分比、CD4+/CD8+比值均升高，觀察組高于對照組，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表4。

表4 兩組患兒T淋巴細胞亞群水平比較( ±s)

表4 兩組患兒T淋巴細胞亞群水平比較( ±s)

注：與治療前比，*P＜0.05。

組別 例數 CD3+(%) CD4+(%) CD8+(%) CD4+/CD8+治療前 治療2周后 治療前 治療2周后 治療前 治療2周后 治療前 治療2周后對照組 27 62.32±2.89 60.21±3.60* 22.91±5.78 30.21±5.87* 39.27±11.98 29.33±2.67* 0.42±0.14 1.06±0.28*觀察組 27 63.02±2.91 58.30±3.21* 22.95±5.80 34.10±6.10* 39.30±12.01 24.10±2.58* 0.43±0.15 1.42±0.26*t值 0.887 2.058 0.025 2.388 0.009 7.319 0.253 4.896 P值 ＞0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＜0.05

3 討論

IM主要是一種由EBV引起的、以侵犯淋巴系統為主的急性感染性疾病，因 EBV-IM 為免疫病理學疾病，其病理特征是EBV感染下的CD8+T淋巴細胞被過度激活，產生大量細胞因子，引起相關臟器損害。臨床治療分為對癥治療、抗病毒治療兩部分，可在一定程度上緩解患兒癥狀，但單一治療效果不佳[5]。更昔洛韋是目前臨床治療EBV-IM使用率較高的抗病毒藥物，通過競爭性抑制脫氧鳥苷三價磷酸鹽與DNA聚合酶的結合，起到抗病毒效應，但其不良反應較多，導致患兒耐藥性較差，進而影響療效[6]。

阿糖腺苷的代謝產物可通過作用于病毒DNA多聚酶表達，阻斷病毒DNA的復制，抗病毒作用顯著，可促進患兒疾病的有效改善，其作用機制與更昔洛韋類似，但阿糖腺苷在停藥后血漿濃度會快速降低，減少不良反應的發生情況，從而避免因不良反應的發生影響患兒依從性，導致治療效果不佳[7]。本研究發現，相較于對照組，觀察組患兒各項臨床癥狀恢復時間均縮短，治療總有效率升高，提示阿糖腺苷治療EBV-IM患兒，可有效縮短臨床癥狀恢復時間，療效顯著。

EBV不僅會感染B淋巴細胞，還會對NK細胞、T淋巴細胞亞群等其他細胞產生感染，使患兒免疫功能受到損傷，抵抗病毒功能的能力下降，且無法清除感染病毒的免疫細胞，刺激淋巴細胞釋放大量的細胞因子，降低患兒機體免疫力，不利于病情恢復[8]。本研究中，治療1、2周后，觀察組患兒EBV-DNA、EBV-EA-IgG及EBV-VCA-IgM陰轉率均高于對照組，提示阿糖腺苷可清除EBV，糾正免疫紊亂，作用明顯。分析其原因可能是，阿糖腺苷為嘌呤核苷類抗病毒藥物，其通過抑制病毒信使RNA（mRNA）和轉移RNA（tRNA）的甲基化，發揮抗病毒作用，同時阿糖腺苷作為病毒DNA聚合酶活性抑制劑和病毒核苷酸還原酶活性劑，具有雙倍的抑制病毒復制能力，相比于更昔洛韋（病毒DNA聚合酶活性抑制劑）的抗病毒效果 更好[9]。

EBV進入B淋巴細胞循環后，會造成全身性感染，導致T淋巴細胞出現強烈的免疫應答，并轉化為病毒性T淋巴細胞，對周圍器官組織造成損害[10]。本研究中，治療2周后觀察組患兒CD3+、CD8+均低于對照組，CD4+、CD4+/CD8+均高于對照組，提示阿糖腺苷可有效增強EBV-IM患兒機體T淋巴細胞亞群活力，改善免疫系統的功能，提高患兒機體抵抗疾病的能力，促進病情恢復。分析原因可能為，更昔洛韋的半衰期為2.9 h，相比于阿糖腺苷3.5 h的半衰期更短，雖然能通過發揮抗病毒作用來改善免疫功能，但維持時間短，因此整體治療效果并不理想；而阿糖腺苷水溶性好、起效快，在進入細胞后，磷酸化為阿糖腺苷二磷酸和阿糖腺苷三磷酸，抗病毒活性主要由三磷酸所引起，通過競爭性地結合病毒DNA上的結合位點，抑制病毒DNA上的轉移酶活性，滲入病毒并與DNA鏈末端位置進行連接，抑制病毒DNA的繼續合成，進而改善機體狀態，減輕EBV對免疫功能的損傷，調節T淋巴細胞，增強患兒免疫力[11]。

綜上，阿糖腺苷治療EBV-IM患兒，可有效清除EBV，糾正免疫紊亂，調節T淋巴細胞，從而縮短臨床癥狀恢復時間，且療效顯著，值得臨床推廣。