犢牛大腸桿菌病的診斷與防治

馮明祥，徐 雨，韋登雄，圖 雅，陳 穎

（貴州省關嶺縣動物疫病預防與控制中心 561300）

犢牛大腸桿菌病是由致病性大腸桿菌引起的消化道疾病，感染犢牛消瘦﹑腹瀉﹑脫水甚至死亡，部分犢牛治療不及時，恢復后生長發育遲緩，給養殖業造成嚴重的經濟損失[1]。大腸桿菌分為非致病性大腸桿菌和致病性大腸桿菌，致病性大腸桿菌常在飼養環境不良﹑過度擁擠﹑營養不足等情況下引起犢牛發病，并常與其他致病菌混合感染，導致犢牛病情復雜，治療不及時，甚至導致死亡。

該病目前在全國各地均有發生，通常使用抗菌藥物進行治療，這也導致細菌耐藥性不斷加強，一方面是大腸桿菌自身的改變，如產生滅活或鈍化抗菌藥物的酶﹑抗菌藥物靶基因改變﹑細胞漿膜的通透性改變以及代謝途徑改變等；一方面是藥物的選擇壓力，如聯合使用藥物﹑長期使用同類藥物﹑低劑量使用藥物等，不合理的使用藥物導致治療效果越來越差[2-3]。大腸桿菌病屬于人畜共患病，病菌可以通過動物傳染動物，動物傳染人，人傳染人，最終導致人類感染，其耐藥質粒可以遺傳，當人感染了耐藥性高的細菌時，治療費用過高，甚至無藥可醫[4]。因此，本文通過對大腸桿菌的流行特點﹑臨床特點﹑診斷﹑預防和治療等進行討論，以期為制定科學合理的防治措施奠定基礎。

1 流行特點

犢牛大腸桿菌病是由致病性大腸桿菌引起的消化道疾病，患病犢牛的主要臨床表現為消瘦﹑腹瀉和脫水。該病在初生犢牛中發病率較高，特別是10日齡內的犢牛，其余日齡的牛感染但不發病[5]。該病全年均可發生，但以冬春季發病率較高。全國各地均有發生，呈地方性流行。犢牛大腸桿菌病的傳染源主要是患病犢牛以及帶菌犢牛，主要通過消化道感染患病，也能夠通過產道和臍帶感染患病。

2 臨床癥狀

根據臨床癥狀將其分為敗血癥型﹑腸毒血癥型和腸炎型三種[6]。

2.1 敗血癥型

多發于2～3d齡犢牛，精神萎靡﹑被毛凌亂﹑體溫升高至40℃以上，食欲下降甚至廢絕，淡黃色水樣腹瀉，通常發病后1d內急性死亡，個別病犢還未出現臨床癥狀就突然死亡，死亡率50%～80%。

2.2 腸毒血癥型

多發于1周齡犢牛，此發病率和死亡率較高，達70%～100%，常無任何癥狀突然死亡。部分病程稍長的，有典型的中毒性神經癥狀，發病初期興奮，后期沉郁，昏迷直至死亡，常有白色帶氣泡的腹瀉。

2.3 腸炎型

又叫犢牛白痢，多發于1～2周齡犢牛，患病初期犢牛體溫上升至40℃以上，數小時后開始腹瀉，初期糞便呈淡黃色﹑粥樣，隨病程發展，糞便顏色變為灰白色，水樣，有時可見未消化的凝乳塊﹑凝血塊及泡沫，有酸敗氣味。發病末期，犢牛會出現肛門失禁，可因脫水或酸中毒死亡。如果及時治療，通常能夠治愈，但是康復后的犢牛生長發育遲緩，常繼發臍炎﹑關節炎﹑肺炎的炎癥。

3 病理解剖

敗血癥型﹑腸毒血癥型病死的犢牛，通常剖檢無明顯的病理變化。腸炎型病死的犢牛胃黏膜充血﹑出血；小腸黏膜充血﹑出血，部分黏膜上皮脫落；腸系膜淋巴結腫大；心臟內膜出血；肝臟和腎臟蒼白，可見出血點。

4 實驗室診斷

采集病死犢牛的內臟﹑血液和糞便等，其中對敗血型和腸毒血型的采集內臟和血液，無菌劃線與麥康凱培養基和伊紅美藍培養基，大腸桿菌麥康凱培養基中生長為圓形﹑表面光滑﹑粉紅色，在伊紅美藍瓊脂培養基中菌落為圓形﹑表明光滑帶有金屬光澤﹑深紫黑色，對符合分離特征的進行革蘭氏染色鏡檢，顯微鏡下觀察呈紅色﹑短桿狀，為革蘭氏陰性菌；對符合染色特征的分離菌進行生化鑒定，大腸桿菌在靛基質﹑甲基紅﹑動力﹑產氣﹑山梨醇等實驗中為陽性，在VP﹑硫化氫﹑苯丙氨酸﹑枸櫞酸鹽﹑尿素等實驗中為陰性，進一步確診還可以使用聚合酶鏈式反應技術﹑酶免疫分析技術﹑免疫磁珠分離技術和血清學診斷技術等。

在確定分離出的大腸桿菌后，還需要進一步進行動物致病性實驗，分析分離株的致病力，還可以進行血清型鑒定，確定分離株血清型，以及耐藥性實驗，分析分離株耐藥情況，為后續用藥進行指導。

5 防治措施

5.1 預防措施

5.1.1 加強飼養管理

管理不當導致犢牛腹瀉的外在原因，如環境臟亂﹑圈舍陰冷潮濕﹑舍內過熱或過冷﹑營養不足等都會引起犢牛腹瀉，因此，加強飼養管理，保持圈舍干燥衛生﹑保溫通風﹑合理飼養密度等都可以減低犢牛發病率。

第一，妊娠母牛的飼養管理。逐漸增加精料，增強妊娠母牛的體質，保證每日定時運動，防止便秘，并根據不同孕期添加適當的蛋白質和電解多維等。分娩前一周消毒擦干后轉入產房，保持產房干燥通風，每日更換墊料。

第二，產后母牛的飼養管理。及時處理胎衣，促進排惡露，對陰道周圍每天定時溫水洗凈消毒，定期清理牛舍內的糞污，保持干燥衛生，同時控制室溫。產后以飼喂干草或青草為主，少喂精料，飲水使用溫水。每日溫水清洗消毒乳房一次，同時定時按摩擠壓。產后一周內的母牛，如無其他問題，轉出產房。

第三，新生犢牛的飼養管理。犢牛出生后，應立即清除口鼻中的污物，剪斷臍帶，長度在10～12cm，用碘酊消毒處理傷口，再包上紗布，同時盡快擦干身體。新生犢牛消化道系統如胃腸道黏膜尚未發育完全，對疾病的抵抗能力弱，而牛初乳可以有效保護胃腸黏膜，對犢牛抵抗疾病有很大作用，在犢牛出生后盡快飼喂初乳，獲得被動抗體。后期保持環境衛生干燥，避免突然刺激犢牛，減少應激，可以降低疾病的發生。

5.1.2 清洗消毒

大腸桿菌對外界的抵抗力不強，通常能在室溫下存活數周，在土壤和水中能存活120d，而一般50℃ 30min或者60℃15min即可被滅活，大部分的消毒藥物也可以將其快速殺死，但是當其在黏液和糞便中，消毒藥物的效果會減弱[7]，因此，在消毒之前，日常清洗至關重要。

產房需要提前準備，先用消毒液噴濕地面后，再清掃場地，鏟除污物，確保不留死角，清掃完成后，關閉好圈舍門窗，用消毒液對圈舍地面﹑四周墻壁﹑門窗﹑欄柱等進行噴灑消毒，飼槽﹑飲水槽用消毒液洗刷，待2h后打開門窗通風，用清水沖洗，干燥后備用。

在妊娠母牛分娩前后對母牛乳房﹑外陰﹑肛門和后驅用溫熱水清洗消毒，接生相關工作人員做好接產相關器具和自身的消毒，全程進行無菌操作，避免臍帶感染，后續做好日常清洗消毒工作。圈舍消毒可選用氫氧化鈉﹑戊二醛類﹑氯制劑類等；器具消毒可選用季銨鹽類﹑復方含碘類（碘﹑磷酸﹑硫酸復合物）﹑過硫酸氫鉀類；皮膚消毒可選用含碘類﹑來蘇兒﹑高錳酸鉀等。

5.1.3 疫苗免疫

對于常有犢牛大腸桿菌病發病的牛場，推薦接種大腸桿菌疫苗，目前，已經研究出O78﹑O26和O15三價苗﹑O2﹑O86﹑O101三價苗﹑K99-F41二價滅活苗以及亞單位疫苗和基因疫苗等[8-11]，這些疫苗通常在產前15～45d注射，因此，注射時要注意動作迅速輕柔，避免母牛受驚，同時，大腸桿菌的血清型多達幾百種，并存在交叉性，因此，不同地區﹑不同場流行的血清型差異很大，當市場上的疫苗不能滿足養殖場防疫需求的時候，可以考慮制備該場分離株的滅活疫苗。

5.2 治療措施

5.2.1 抗菌消炎：對剛養殖的發病牛場主要采用常用抗生素藥物進行治療，如鏈霉素﹑慶大霉素﹑氧氟沙星等，應嚴格按照說明書進行使用，不要過量或者少量，精準用藥，盡量避免聯合使用抗生素。對于老場或是耐藥性嚴重的養殖場不要盲目用藥，因立刻采樣送實驗室檢測，根據藥敏實驗針對性用藥，避免耐藥性的進一步加重。

對于抗菌藥物的使用，嚴禁使用禁止藥物和假冒偽劣的藥物，根據抗菌藥物分級分類使用，從低到高，從窄到廣，謹慎聯合使用抗菌藥物。可選用高效﹑休藥期短和低殘留的品種以及中藥﹑微生態制劑等綠色獸藥。

5.2.2 補液：腹瀉導致大量水分流失，可根據脫水量進行補水。針對脫水不嚴重的，犢牛仍具有食欲能夠自己吮吸的情況，可以服補充溫熱的糖鹽水。對脫水嚴重的，犢牛不能吮吸的情況，可以靜脈注射5%葡萄糖生理鹽水。一旦犢牛出現酸中毒癥狀，緩慢靜脈注射5%的碳酸氫鈉。

5.2.3 調節腸胃機能：可使用乳酸和魚石脂，用溫熱水混勻后灌服，連續使用3次。也可以口服吸附劑，保護胃腸黏膜，如硝酸鉍﹑活性炭等，避免犢牛吸收大量的毒素。

5.2.4 調節腸道的微生態平衡：口服生態制劑，補充益生菌群，如促菌生﹑乳酶生或者其他乳桿菌制劑，讓腸道的菌群盡快恢復到正常微生態平衡的狀態。

6 討論

犢牛大腸桿菌病在牛場養殖中時有發生，敗血癥型和腸毒血癥型通突然發病，還未進行治療就已死亡，死亡率高，腸炎型通常使用敏感抗生素藥物治療即可控制痊愈。然而，不規范的使用藥物，導致大腸桿菌的耐藥性不斷增強。目前，大多數規模牛場主﹑散養戶還沒意識到細菌耐藥性對養殖場的危害，而越來越多的文獻報道，大腸桿菌多重耐藥性的普遍性，韓和祥在四川部分規模化肉牛場中分離的50株致病性大腸桿菌進行耐藥性實驗，結果表明對強力霉素﹑多粘菌素﹑慶大霉素﹑磺胺間甲氧嘧啶﹑氨芐西林﹑阿莫西林和青霉素的耐藥率分別為72%﹑78%﹑78%﹑84%﹑92%﹑94%和96%，并且有多重耐藥現象[12]。肖躍強等在黃河三角洲部分地區肉牛場中分離出33株大腸桿菌，對強力霉素﹑阿莫西林﹑紅霉素﹑磺胺甲基唑84.8%﹑81.8%﹑75.8%和81.85%，也有多重耐藥現象[13]。有的病例甚至出現無藥可以的狀態，王海瑞對分離菌進行藥敏實驗，結果表明部分分離株對使用藥物全部耐藥[14]。因此，作為基層獸醫部門必須提高對細菌耐藥性的警惕，引導和培訓規模養殖場主和散養戶對細菌耐藥性的防范意識，根據當地流行情況結合各場自身條件制定合理長期可行的用藥制度，逐步降低細菌耐藥性，減少耐藥性對養殖業造成的危害，為百姓帶來更大的經濟效益。

大腸桿菌的耐藥性，不單單影響養殖業的發展，同時對食品安全和公共衛生安全產生重大隱患，耐藥菌株隨著糞便﹑尿液等排出體外，進入外界環境中，對環境和人類造成嚴重危害，世界各國每年都有人通過不同途徑感染致病性大腸桿菌，如飲用污染的食物等，最終導致發病或死亡的報道[15]。而且，大腸桿菌病是人畜共患病，致病菌株可以在人和動物，動物和動物之間傳播，耐藥基因可以遺傳，可以不斷轉移，耐藥基因的傳播范圍不斷擴大，最直接反應在人類醫療上，新藥物的研發速度趕不上細菌耐藥性的增強速度，最終一起常見細菌病的感染，也可能會無藥可醫[4]。因此，制定合理的用藥規章制度，減緩耐藥性產生的速度，以延長抗菌藥物的使用時間，對全世界都至關重要。

2021年10月，為遏制細菌的耐藥，維護國家的公共衛生安全以及生物安全，我國農業農村部發布《全國獸用抗菌藥使用減量化行動方案（2021年—2025年）》，方案中要求到2025年末，50%以上的規模養殖場將從飼養管理﹑生物安全防護﹑規范用藥﹑謹慎用藥﹑替代用藥五個方面進行獸藥減量化行動[16]。因此，抗菌藥物的減量行動勢在必行，各部門和機構都應該提前做好準備工作。目前，發達國家對致病性大腸桿菌高度重視，并形成規范的國家監測網絡，而我國在該病監測和研究等方面還有不足，但建立致病性大腸桿菌的監測網已成為大趨勢，各地區提前做好流行病學調查，建立監測網絡，并根據地方實際情況制定健康監測檢測方案，以期為指導后續行動做好準備工作。