何冰桃,黨 斌,2,鄭萬財,2,張文剛,2,張 杰,2,楊希娟,2
(1. 青海大學(xué)農(nóng)林科學(xué)院,青海省青藏高原農(nóng)產(chǎn)品加工重點實驗室,青海西寧 810016;2. 青藏高原種質(zhì)資源研究與利用實驗室,青海 西寧 810016)
青稞,又稱裸大麥,是青藏高原地區(qū)主要糧食作物,具有“三高兩低”的營養(yǎng)特點[1]。青稞還含有β - 葡聚糖、γ - 氨基丁酸、多酚等多種具有獨特生理功效的成分,可有效預(yù)防糖尿病、高血壓等多種疾病[2-3]。青稞不僅是制曲、釀造啤酒、糧食加工制品的主要原料,其還可制造藥品、糖化劑、飴糖等,對牲畜也是很好的精飼料。青稞的營養(yǎng)健康作用已被證實,青稞產(chǎn)業(yè)快速發(fā)展,產(chǎn)品類型越來越豐富,備受消費者青睞,青稞正在由一個區(qū)域性口糧作物轉(zhuǎn)向健康食源作物發(fā)展[4-5]。
青稞釀酒的歷史悠久,青稞除了可釀制蒸餾白酒,還可制作青稞發(fā)酵酒。目前,市面上青稞酒主要分為非蒸餾型的青稞咂酒,蒸餾型的青稞烤酒和青稞白酒,以青稞、大麥為原料的青稞啤酒、青稞清酒及調(diào)配青稞酒等[6]。相較于高濃度的青稞白酒,青稞黃酒的酒精度偏低,一般為8~15%Vol,香醇而不烈,老少皆宜,且保留了青稞豐富的營養(yǎng)成分,具有更加廣闊的市場,但是市面上的青稞黃酒多以根霉菌、黃酒酵母作為發(fā)酵劑,青稞中的多酚成分也大多損失,并沒有在青稞酒中較好地保留下來。
紅曲霉中含有包括糖化酶、酸性蛋白酶、酯化酶等各種酶類,在發(fā)酵過程中能代謝產(chǎn)生γ - 氨基丁酸、紅曲色素、洛伐他汀等多種活性物質(zhì)[7-8]。有研究表明,紅曲霉產(chǎn)生的水解酶可以破壞細胞壁結(jié)構(gòu),斷裂酚類物質(zhì)與其他物質(zhì)相互作用的化學(xué)鍵,促進植物基質(zhì)或者谷類食品多酚類活性成分的釋放,并且在大豆、燕麥、薏米、大麥等谷物的研究中已有相關(guān)報道[9-12],也有研究證明了紅曲霉發(fā)酵能夠有效提高酒體的多酚含量和抗氧化活性[13-14],但是將紅曲霉菌應(yīng)用于發(fā)酵高原特色的青稞酒的相關(guān)研究未見報道,因此進行紅曲霉固態(tài)發(fā)酵青稞酒工藝研究對豐富青稞發(fā)酵產(chǎn)品、推動青稞產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要意義。以青稞為原料,對青稞籽粒進行前處理,通過紅曲霉固態(tài)發(fā)酵青稞酒,以多酚質(zhì)量濃度、黃酮質(zhì)量濃度、酒精度和感官評分作為主要評價指標(biāo),優(yōu)化富含酚類物質(zhì)的紅曲青稞酒發(fā)酵的工藝參數(shù),并對其抗氧化活性進行研究,為青稞低度酒的開發(fā)及產(chǎn)業(yè)化提供技術(shù)支撐。
ACCC 30352 紫紅曲霉,上海瑞楚生物科技有限公司菌種保藏中心(RCCC) 提供;昆侖20 號青稞、昆侖15 號青稞米,青海省農(nóng)林科學(xué)院作物所提供;安琪甜酒曲,湖北安琪酵母股份有限公司提供;食用檸檬酸,濰坊英軒實業(yè)有限公司提供;食用小蘇打,山東圣琪生物有限公司提供。
SX-500 型蒸汽滅菌器,日本TOMY KOGYO 公司產(chǎn)品;SW-CJ-2FD 型雙人單面凈化工作臺,蘇州凈化設(shè)備有限公司產(chǎn)品;THZ-98AB 型恒溫振蕩器,上海一恒科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品;LRH-150 型生化培養(yǎng)箱,上海齊欣科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品;FW 100 型高速萬能粉碎機,上海科恒實業(yè)發(fā)展有限公司產(chǎn)品;DL-5M 型低速冷凍離心機,湖南長沙湘儀離心機儀器有限公司產(chǎn)品;SHB-III 型循環(huán)水式多用真空泵,鄭州長城科工貿(mào)有限公司產(chǎn)品;R-210 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,瑞士BUCHI 公司產(chǎn)品;N4S 型紫外線可見分光光度計,上海儀電分析儀器有限公司產(chǎn)品;SGD- IV型全自動還原糖測定儀,中國遼寧塞亞斯科技有限公司產(chǎn)品。
1.3.1 青稞紅曲米制作工藝流程

(1) 麥芽汁瓊脂固體培養(yǎng)基配方。麥芽汁培養(yǎng)基質(zhì)量濃度131.0 g/L,瓊脂粉質(zhì)量濃度15 g/L。
(2) 種子液配方。葡萄糖用量6.0 g,蛋白胨用量0.5 g,磷酸二氫鉀用量0.25 g,硝酸鈉用量0.3 g,硫酸鎂用量0.1 g,蒸餾水用量100 mL。
(3) 菌懸液。自培養(yǎng)平板中勾取5 環(huán)菌絲接入50 mL 無菌生理鹽水中,于28 ℃下以轉(zhuǎn)速180 r/min恒溫振蕩1.5 h。
(4) 種子液。將100 mL 種子液裝于250 mL 錐形瓶中,于121 ℃下高壓滅菌20 min,冷卻至室溫后,用移液槍(使用高壓蒸汽滅菌的槍頭) 取5 mL菌懸液,移入種子液培養(yǎng)基中,于28 ℃下以轉(zhuǎn)速180 r/min 恒溫振蕩培養(yǎng)63 h,即得種子液,用于接種發(fā)酵培養(yǎng)基。
1.3.2 紅曲霉固態(tài)發(fā)酵青稞酒工藝流程

(1) 預(yù)處理方式的篩選。①不同脫皮層數(shù)青稞原料的篩選。分別取50 g 未脫皮、脫皮1 次、脫皮2 次、脫皮3 次、脫皮4 次的昆侖15 號青稞米作為原料,洗凈后以3 倍質(zhì)量的蒸餾水浸泡12 h,洗凈瀝水后,加入1.2 倍蒸餾水,封口膜封口后于121 ℃下高壓蒸汽滅菌20 min,待冷卻后拌入10%紅曲粉和1%安琪甜酒曲共同發(fā)酵,25 ℃下發(fā)酵1 d 后轉(zhuǎn)入28 ℃發(fā)酵。5 d 后取發(fā)酵液測定還原糖含量,篩選出最優(yōu)脫皮層數(shù)。②不同紅曲米處理方式的篩選。粉曲處理,稱量5 g 青稞紅曲米用萬能粉碎機粉碎15 s,間歇5 s,重復(fù)粉碎3 遍。浸曲處理,稱量5 g 青稞紅曲米至三角瓶中,加入無菌溫水20 mL,攪勻,28 ℃下保溫浸泡12 h,此時青稞紅曲多數(shù)浮起,表面有小氣泡(發(fā)酵現(xiàn)象),略有輕微酒氣。采用加曲發(fā)酵前12 h 預(yù)浸紅曲,有利于紅曲中酶類物質(zhì)大量溶出,加速液化,提高糖化速度。以篩選出的青稞米作為發(fā)酵基物,分別加入粉曲處理和浸曲處理的紅曲作為發(fā)酵劑,進行發(fā)酵,并通過測定前發(fā)酵過程中液體發(fā)酵物中的還原糖含量篩選出最優(yōu)的原料處理方式。
(2) 紅曲霉固態(tài)發(fā)酵青稞酒工藝優(yōu)化。在傳統(tǒng)半干型黃酒釀造工藝的基礎(chǔ)上,設(shè)計單因素試驗,以感官評定、酒精度、氨基酸態(tài)氮及多酚、黃酮類物質(zhì)為指標(biāo),確定紅曲霉固態(tài)發(fā)酵青稞酒的料液比、加曲量、初始發(fā)酵pH 值、發(fā)酵溫度及發(fā)酵時間等工藝條件。進行單因素試驗和正交試驗,優(yōu)化釀造條件。①單因素試驗設(shè)計。以每個單因素試驗的最優(yōu)結(jié)果進行下一單因素試驗。②正交試驗設(shè)計。在單因素試驗基礎(chǔ)上,設(shè)計四因素三水平正交試驗L9(34)工藝條件。
單因素試驗設(shè)計見表1,正交試驗因素與水平設(shè)計見表2。

表1 單因素試驗設(shè)計

表2 正交試驗因素與水平設(shè)計
1.3.3 青稞紅曲酒質(zhì)量評價
(1) 感官品質(zhì)評價標(biāo)準(zhǔn)。感官品質(zhì)評價在品酒室中進行,品酒室要求光線充足、柔和、適宜,溫度20~25 ℃,空氣新鮮,無香氣及邪雜氣味。感官評定參考GB/T 13662—2018《黃酒》中傳統(tǒng)型半干黃酒的感官要求。
青稞紅曲酒感官要求見表3。

表3 青稞紅曲酒感官要求
(2) 酒精度、總酸、氨基酸態(tài)氮、還原糖、總糖等理化指標(biāo)的測定參照GB/T 13662—2018《黃酒》。
(3) 總黃酮含量的測定。參考黃丹丹等人[15]的測定方法,繪制蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到線性回歸方程:Y=0.007 7X-0.051 9,R2=0.998。①樣品的制備。移取1 mL 酒液至10 mL 容量瓶中,以濃度為0.1 mol/L的NaOH 溶液調(diào)pH 值至中性,再多加2 滴,水定容至刻度,搖勻,備用。②樣液測定。取2 mL 樣液4 等份,置于10 mL 具塞試管中,加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的亞硝酸鈉溶液0.3 mL,靜置6 min,加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.3 mL 10%硝酸鋁溶液(以不加硝酸鋁作為空白),靜置 6 min,加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%的氫氧化鈉溶液2 mL,混勻后,以體積分?jǐn)?shù)30%的乙醇定容,放置15 min 后測定波長510 nm 處吸光度。
(4) 總酚含量的測定。參考黃丹丹等人[15]的測定方法,繪制沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到線性回歸方程:Y=0.016 4X-0.038 4,R2=0.998。樣液測定:試驗組加酒液0.05 mL,去離子水4.95 mL,以水作空白,分別加入福林酚0.5 mL,充分搖勻后加入7.5%碳酸鈉溶液1 mL,于45 ℃下反應(yīng)15 min,于波長765 nm處測吸光度,平行測定3 次。
(5) 抗氧化指標(biāo)測定。參考楊希娟等人[16]的方法。①清除DPPH·自由基活性測定。吸取酒液50 μL于試管中,再加入濃度為0.1 mmol/L 的DPPH·甲醇溶液4.5 mL,充分搖勻后避光反應(yīng)30 min,以無水甲醇代替提取液作空白調(diào)零,于波長517 nm 處測定吸光度,平行測定3 次。②清除ABTS 自由基活性測定。吸取酒液20 μL 于試管中,再加入ABTS 自由基工作液4 mL,充分搖勻后避光反應(yīng)30 min,以無水甲醇代替提取液作空白調(diào)零,于波長734 nm 處測定吸光度,平行測定3 次。③FRAP 鐵還原能力測定。吸取酒液50 μL 于試管中,再加入FRAP 工作液4.5 mL,充分搖勻后避光反應(yīng)30 min,以無水甲醇代替提取液作空白調(diào)零,于波長593 nm 處測定吸光度,平行測定3 次。
所有的試驗數(shù)據(jù)都是3 次試驗的平均值,應(yīng)用Excel 和SPSS-26 軟件進行統(tǒng)計分析。
2.1.1 不同脫皮層數(shù)青稞原料的篩選
脫皮層數(shù)對前發(fā)酵還原糖含量的影響見圖1。

圖1 脫皮層數(shù)對前發(fā)酵還原糖含量的影響
由圖1 可知,隨著脫皮層數(shù)的增多,紅曲霉發(fā)酵青稞產(chǎn)生的還原糖呈現(xiàn)先增多后減少的趨勢。脫皮3 次的青稞經(jīng)發(fā)酵后還原糖含量最高為6.21%。這可能是由于脫皮去除了部分青稞堅硬的穎殼,使得紅曲霉菌及根霉菌可充分與青稞胚乳接觸,生長繁殖并分泌水解酶系,將淀粉和纖維素等大分子物質(zhì)分解為可供微生物生長的葡萄糖[16-17],促進微生物的快速生長和發(fā)酵,由此產(chǎn)生的正反饋系統(tǒng)為后期酒精發(fā)酵提供了充足的碳源反應(yīng)物。當(dāng)青稞米進行4 次脫皮處理時,發(fā)酵前期產(chǎn)生的還原糖含量下降,這可能與青稞的過度碾磨、糊粉層和亞糊粉層被完全剝離、胚乳層的淀粉顆粒受到磨損有關(guān)。
2.1.2 不同紅曲米處理方式的篩選
紅曲米預(yù)處理方式對前發(fā)酵還原糖含量的影響見圖2。

圖2 紅曲米預(yù)處理方式對前發(fā)酵還原糖含量的影響
由圖2 可知,粉曲處理組紅曲霉發(fā)酵青稞產(chǎn)生的還原糖質(zhì)量濃度要顯著高于浸曲處理組(p<0.05)。相較于浸曲處理,粉碎處理使紅曲與青稞物料混合更加均勻,紅曲霉能夠充分依附在青稞表層,迅速地向內(nèi)生長繁殖,分解胚乳中的淀粉組織,釋放出還原糖。而且,在實際生產(chǎn)過程中,浸曲處理在投入生產(chǎn)時不便控制,極易引發(fā)雜菌侵染,不如粉曲使用時便捷可控,因此以粉碎處理的紅曲作為發(fā)酵劑更加有利于后期的酒精發(fā)酵。
2.2.1 料液比對紅曲霉發(fā)酵青稞酒的影響
料液比對青稞酒品質(zhì)的影響見圖3。

圖3 料液比對青稞酒品質(zhì)的影響
由圖3 可知,隨著料液比變小,發(fā)酵后青稞酒中的多酚、黃酮質(zhì)量濃度和酒精度呈現(xiàn)出先增大后減小的趨勢,在料液比為1∶1.5(g∶mL) 時達到最高,而酒體的感官評分隨著料液比的增大持續(xù)降低。這可能是因為較高的料液比使發(fā)酵液中總糖含量偏高,青稞酒滋味更加香醇;加水量少和粉曲處理形成的高滲環(huán)境抑制了紅曲霉菌和根霉菌的生長繁殖,發(fā)酵不充分,酒精度偏低,青稞中的多酚和黃酮成分也難以釋放;而隨著料液比降低,蒸熟后青稞的黏性增強,高黏環(huán)境使青稞基料中透氧量大幅下降,紅曲霉和根霉生長受阻,發(fā)酵后期更容易受到雜菌侵染,成品酒發(fā)酸發(fā)澀,感官品質(zhì)變差。因此,綜合考慮酒精度、感官指標(biāo)和功能性多酚類物質(zhì)的質(zhì)量濃度,確定最佳料液比為1∶1.2(g∶mL)。
2.2.2 加曲量對紅曲霉發(fā)酵青稞酒的影響
加曲量對青稞酒品質(zhì)的影響見圖4。
由圖4 可知,隨著加曲量增大,青稞酒的酒精度和感官評分先增大后趨于平緩,總酚質(zhì)量濃度先增大后減小,黃酮質(zhì)量濃度略有減少。加曲量對青稞酒的影響是直觀可視的,隨著加曲量的增加,青稞酒越發(fā)紅潤透亮,感官評分增大;當(dāng)加曲量較低時,紅曲霉產(chǎn)生的蛋白酶無法充分分解青稞中的蛋白質(zhì),發(fā)酵前蛋白質(zhì)大量殘留,促使發(fā)酵時細菌過度繁殖產(chǎn)酸[18-19],青稞酒口感酸澀;但加曲量過高,紅曲霉大量生長抑制了根霉菌的活性,2 種菌的協(xié)同發(fā)酵效果變差,紅曲特征過于濃厚,會使青稞酒口感發(fā)澀,損害青稞酒的整體協(xié)調(diào)性;且紅曲霉的過度生長,會導(dǎo)致后發(fā)酵底物不足,加速酸類物質(zhì)積累,抑制多酚類物質(zhì)的產(chǎn)生。當(dāng)加曲量為15%時,酒體中總酚質(zhì)量濃度最高為1 457.20 mg/L,此時青稞酒色澤明麗氣味芳香,酒體的酒精度最高,感官評分達69.11 分。
2.2.3 初始發(fā)酵pH 值對紅曲霉發(fā)酵青稞酒的影響
初始發(fā)酵pH 值對青稞酒品質(zhì)的影響見圖5。
由圖5 可知,相較于中性環(huán)境,較低的初始發(fā)酵pH 值更有利于酒精發(fā)酵和多酚組分的釋放,隨著初始發(fā)酵pH 值的增大,酒體中的總酚質(zhì)量濃度和酒精度都呈現(xiàn)出先增加后降低的趨勢,黃酮質(zhì)量濃度基本保持穩(wěn)定,但在初始發(fā)酵pH 值為6 時,酒體中黃酮質(zhì)量濃度突然降低,這可能與中性環(huán)境下受到雜菌侵染有關(guān)。當(dāng)初始發(fā)酵pH 值為3.5~5.0 時,酸性環(huán)境有效地抑制了雜菌的生長,保證有益菌的大量繁殖,紅曲菌產(chǎn)生大量的淀粉酶、蛋白酶等水解酶系,將與多糖或蛋白通過酯鍵和醚鍵的形式連結(jié)的結(jié)合酚釋放出來[20-21];在初始發(fā)酵pH 值為4 時,紅曲酒總酚質(zhì)量濃度最高為1 602.32 mg/L,酒精度達到9.4%Vol,青稞酒醇香濃郁,感官評分最高達68.33 分,確定最佳初始發(fā)酵pH 值為4。
2.2.4 發(fā)酵溫度對紅曲霉發(fā)酵青稞酒的影響
發(fā)酵溫度對青稞酒品質(zhì)的影響見圖6。

圖6 發(fā)酵溫度對青稞酒品質(zhì)的影響
由圖6 可知,隨著發(fā)酵溫度的提高,青稞酒中的總酚、黃酮質(zhì)量濃度和酒精度先升高后降低。在29 ℃時,黃酮質(zhì)量濃度和酒精度達到最高,但酒體中的總酚質(zhì)量濃度低于32 ℃發(fā)酵酒。高溫能夠有效釋放青稞中的功效成分及芳香物質(zhì),但當(dāng)發(fā)酵溫度高于29 ℃時,微生物在發(fā)酵初期產(chǎn)生大量的呼吸熱,使發(fā)酵液溫度急劇升高,達到36 ℃以上,過度的高溫可能會使紅曲霉提前老化,導(dǎo)致發(fā)酵不徹底,酒精度降低[22],甚至使發(fā)酵液污染其他霉菌,影響成品酒的感官品質(zhì)。因此,最適發(fā)酵溫度應(yīng)控制為29 ℃。
2.2.5 發(fā)酵時間對紅曲霉發(fā)酵青稞酒的影響
發(fā)酵時間對青稞酒品質(zhì)的影響見圖7。

圖7 發(fā)酵時間對青稞酒品質(zhì)的影響
由圖7 可知,隨著發(fā)酵時間延長,酒體中的多酚和黃酮質(zhì)量濃度都呈現(xiàn)出先增加后降低的趨勢,酒精度則是隨著發(fā)酵程度的加深逐漸增大,到發(fā)酵后期保持穩(wěn)定。青稞酒釀造時發(fā)酵時間過短會使發(fā)酵不充分,糖類物質(zhì)不能充分轉(zhuǎn)化為酒精,影響酒體的品質(zhì),發(fā)酵時間過長,營養(yǎng)物質(zhì)過度消耗,不利于紅曲霉的生長繁殖,代謝產(chǎn)生不良產(chǎn)物,使酒變得渾濁,且易受到雜菌污染,酒體發(fā)酸。當(dāng)發(fā)酵時間為15 d 時,紅曲酒的總酚和總黃酮質(zhì)量濃度分別為1 489.51 mg/L 和105.06 mg/L,高于其他發(fā)酵組,酒精度為9.6%Vol 達到最高。因此,確定紅曲霉固態(tài)發(fā)酵青稞酒的時間為15 d。
2.2.6 正交試驗結(jié)果
正交試驗結(jié)果見表4,方差分析結(jié)果見表5。

表4 正交試驗結(jié)果

表5 方差分析結(jié)果
由表4 和表5 可知,影響青稞酒中黃酮質(zhì)量濃度的因素主次順序為B>A>C>D,其中加曲量對青稞酒中的黃酮質(zhì)量濃度具有顯著影響(p<0.05),料液比和發(fā)酵溫度對酒體中的黃酮質(zhì)量濃度影響較小。此時,紅曲霉固態(tài)發(fā)酵青稞酒的最優(yōu)工藝條件為A2B1C1D1,即料液比1∶1.2(g∶mL),加曲量12.5%,發(fā)酵溫度27 ℃,發(fā)酵時間14 d。
影響青稞酒中總酚質(zhì)量濃度的因素主次順序為C>A>B>D,其中發(fā)酵溫度對酒體中的多酚質(zhì)量濃度影響較顯著(p<0.05),料液比和加曲量影響較小。此時,紅曲霉固態(tài)發(fā)酵青稞酒的最優(yōu)工藝條件為A1B2C1D3,即料液比1∶1.0(g∶mL),加曲量15%,發(fā)酵溫度27 ℃,發(fā)酵時間16 d。
影響青稞酒中酒精度的因素主次順序為C>B>D>A,其中發(fā)酵溫度、加曲量、發(fā)酵時間和料液比對酒體中的酒精度影響均不顯著(p>0.05)。此時,紅曲霉固態(tài)發(fā)酵青稞酒的最優(yōu)工藝條件為A2B2C1D2,即料液比1∶1.2(g∶mL),加曲量17.5%,發(fā)酵溫度27 ℃,發(fā)酵時間15 d。
影響青稞酒感官評分的因素主次順序為C>A>D>B,其中發(fā)酵溫度對酒體中的感官評分影響較顯著(p<0.05),料液比、發(fā)酵時間和加曲量影響不顯著(p>0.05)。此時,紅曲霉固態(tài)發(fā)酵青稞酒的最優(yōu)工藝條件為A1B2C1D3,與總酚質(zhì)量濃度條件下的最優(yōu)工藝一致。
2.2.7 驗證試驗
根據(jù)正交試驗結(jié)果,選取高黃酮質(zhì)量濃度組合A2B1C1D1,高總酚質(zhì)量濃度和高感官評分組分A1B2C1D3,高酒精度組分A2B2C1D2進行驗證試驗。
驗證試驗結(jié)果見表6。

表6 方差分析結(jié)果
由表6 可知,在3 組驗證試驗中,A1B2C1D3組合的成品酒中總酚質(zhì)量濃度為1 823.31 mg/L 顯著高于其他2 個組合,此時青稞酒的黃酮質(zhì)量濃度為127.00 mg/L,感官評分為82.2 分,達到最高,酒精度為8.53%Vol,略低于A2B2C1D2組合,說明此工藝條件下制備的青稞酒具有較強的抗氧化活性。A1B2C1D3組合的青稞酒中FRAP 鐵還原能力、ABTS·清除能力和DPPH·清除能力分別為2 000.50 μmol/L,5 577.00 μmol/L 和1 202.11 μmol/L。因此,確定紅曲霉固態(tài)發(fā)酵青稞酒的最優(yōu)工藝條件為A1B2C1D3組合,即料液比1∶1.0(g∶mL),加曲量15%,發(fā)酵溫度27 ℃,發(fā)酵時間16 d。
青稞脫皮的層數(shù)及紅曲米粉碎的方式等均對青稞紅曲酒品質(zhì)有一定的影響。結(jié)果表明,以3 次脫皮的青稞為原料,接種紅曲粉、甜酒曲進行固態(tài)發(fā)酵,青稞紅曲酒的發(fā)酵工藝為料液比1∶1.0(g∶mL),加曲量15%,發(fā)酵溫度27 ℃,發(fā)酵時間16 d。在此優(yōu)化條件下,青稞酒的總酚質(zhì)量濃度為1 823.31 mg/L,黃酮質(zhì)量濃度為127.00 mg/L,酒精度為8.5%Vol,感官評分為82.2 分,DPPH·清除能力為1 202.11 μmol/L,ABTS·清除能力為5 577.00 μmol/L,F(xiàn)RAP 鐵還原能力為2 000.50 μmol/L。青稞酒產(chǎn)品色澤紅潤清透,酒體芳香濃郁、醇厚細膩、營養(yǎng)豐富,生物活性成分多酚質(zhì)量濃度顯著高于傳統(tǒng)青稞酒,具有較強的抗氧化活性。