桂利嗪片的溶出行為研究及溶出曲線繪制

敦 康，付 莉，王若琳

（1.河北省藥品審評中心，河北 石家莊 050091 ；2.河北科技大學材料科學與工程學院，河北 石家莊 050018）

桂利嗪的化學分子式為C26H28N2，其分子結構式如圖1 所示。桂利嗪片與許多藥物聯合使用時，其藥效會根據聯合用藥的不同而發生變化。例如，與催眠藥或鎮靜藥聯合使用時會增加鎮靜的作用；與苯妥英鈉、卡馬西平聯合使用時會降低桂利嗪片的血藥濃度；接受放射治療的患者聯合使用桂利嗪片會提高放射線對腫瘤細胞的殺傷力；與抗癲癇藥物聯合使用可以提高抗癲癇效果。桂利嗪片可治療多種疾病。此藥是一種鈣通道阻滯劑，可通過阻止血管平滑肌鈣內流促使血管擴張，從而改善腦部供血，屬于周圍血管擴張藥。桂利嗪片能緩解血管痙攣，其解痙作用比罌粟堿強，但鎮靜作用不明顯。此藥還能改善前庭微循環，保護心肌，減輕心肌缺血性損傷。目前，臨床上多使用桂利嗪片治療腦血管疾病，如腦血栓、腦動脈硬化、血管性偏頭痛等[1-7]。最新的研究表明，桂利嗪片在抗曼氏血吸蟲[8]、治療新型冠狀病毒肺炎（COVID-19）相關凍瘡樣病變[9]等領域也能取得一定的療效，發揮“舊藥治新病”的作用。溶出度是指片劑等口服固體制劑在規定溶劑中溶出的速度和程度，該數據可以準確體現口服固體制劑的生物吸收性能。體外溶出試驗中通常選擇三、四種溶出介質，并繪制溶出曲線進行考察，以評價口服固體制劑的內在質量。本文按照2020 年版《中華人民共和國藥典》四部通則中的溶出度測定方法[10]進行桂利嗪片仿制藥的溶出試驗，采用紫外- 可見分光光度法測定溶出度，并繪制溶出曲線，以期為完善該制劑的質量標準提供參考。

圖1 桂利嗪結構式

1 儀器與試藥

1.1 儀器

TU-1901 型紫外- 可見分光光度儀（北京普析通用儀器公司）；SOTAX AT 7 smart 溶出試驗儀（美國SOTAX 公司）；XS105 型電子天平（瑞士Mettler-Toledo 公司）。

1.2 試藥

桂利嗪片仿制藥（三個廠家）；磷酸二氫鉀、氫氧化鈉、醋酸鈉、鹽酸、醋酸、乙酸銨、冰醋酸均為分析純，乙腈為色譜純，水為純化水。

2 方法與結果

2.1 溶出和測定方法的選擇

參照《中華人民共和國藥典》2020 版（通則0931 溶出度與釋放度測定法 第一法）和桂利嗪片劑項下的溶出度測定方法，選擇籃法，轉速為100 r/min，介質體積為900 mL。取不同介質條件下的溶出液10 mL，濾過，精密量取續濾液5 mL，置于10 mL 量瓶中，用溶出介質稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。按照紫外-可見分光光度法（通則0401），在253 nm的波長處測定吸光度，以吸收系數法計算溶出量。桂利嗪為堿性化合物，而鹽酸溶液（pH 1.0）、醋酸鹽緩沖液（pH 4.0）、磷酸鹽緩沖液（pH 6.8）、水這四種溶出介質為堿性化合物考察溶出曲線時常規采用的溶出介質，同時參照仿制藥質量一致性評價- 普通固體口服制劑溶出度試驗技術指導原則，桂利嗪片溶出度的測定選擇這四種溶出介質。在取樣時間上，考慮到制劑在上述四種不同介質中的溶出速率不同，我們將這四種介質的溶出時間均做了相同的延長以方便比對，溶出時間定為5 min、10 min、15 min、30 min、45 min、60 min、90 min、120 min。

2.2 溶出介質的制備

鹽酸溶液（pH 1.0）的制備：取鹽酸9 mL，加水稀釋至1000 mL，即得。醋酸鹽緩沖液（pH 4.0）的制備：取醋酸鈉1.22 g，加2 mol/L 醋酸溶液20.5 mL，加水稀釋至1000 mL，即得。磷酸鹽緩沖液（pH 6.8）的制備：取0.2 mol/L 磷酸二氫鉀溶液250 mL 和0.2 mol/L 氫氧化鈉溶液112 mL，加水至1000 mL，即得。水為純化水。

2.3 供試品溶液

取樣品適量，按2.1 項下的溶出測定方法，分別以pH 1.0 鹽酸溶液、pH 4.0 醋酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液和水作為溶出介質，體積為900 mL，轉速為100 r/min，溫度為37.0 ℃，分別于不同時間點各取樣10 mL，不進行補液操作，以0.45 μm 濾膜濾過，取續濾液作為供試品溶液。

2.4 四條溶出曲線的測定

按照2.2 中的方法分別配置pH 1.0 的鹽酸溶液、pH 4.0 的醋酸鹽緩沖液、pH 6.8 的磷酸鹽緩沖液和水作為溶出介質，按照2.1 中的試驗方法，取3 個廠家的樣品各12 片，依照上述方法進行操作，分別經5 min、10 min、15 min、30 min、45 min、60 min、90 min、120 min 取樣，按照2.1 中的檢測方法進行檢測。

2.5 濾膜吸附試驗

分別取“2.3”項下的四種溶出介質制備的供試品溶液適量，不濾過直接測定；再經過0.45 μm 濾膜濾過，棄去3 mL 濾液，取續濾液，在253 nm 波長處分別測定吸光度。結果表明，四種供試品溶液經濾膜濾過后，與濾過前測定結果相比無差異，說明0.45 μm 濾膜對桂利嗪基本沒有吸附作用。

2.6 溶出曲線的繪制

取三批桂利嗪片劑樣品，每批12 片，按“2.3”項下的方法制備供試品溶液，在253 nm 波長處測定吸光度，分別繪制溶出曲線，結果見圖2 和圖3。桂利嗪在堿性條件和水中無溶出行為。

圖2 桂利嗪片在pH 1.0 鹽酸溶液中的溶出曲線

圖3 桂利嗪片在pH 4.0 醋酸鹽緩沖液中的溶出曲線

3 討論

桂利嗪片是一種鈣通道阻滯劑，能顯著增加腦血流量，改善腦循環及冠狀動脈循環，抑制血管活性物質，對腦動脈硬化、高血壓導致的腦循環障礙、蛛網膜下腔出血等均有較好的治療作用。此外，桂利嗪片還能改善暈動癥患者的頭暈、耳鳴等癥狀，并在不影響心率和耗氧量的情況下增加冠狀動脈血流量和心輸出量。溶出度是指片劑等口服固體制劑的溶出速度和程度，它是口服固體制劑質量控制的一個重要指標。分析桂利嗪片在本研究中四種溶出介質中的溶出行為，發現其以水為介質時為難溶片劑。桂利嗪片屬于pH 依賴型藥物，其溶出量會隨著pH 的升高而減少，甚至完全不溶出。本研究嘗試延長溶出時間，結果也未改變桂利嗪片的溶出行為。在醋酸鹽緩沖液中，桂利嗪片隨著溶出時間的延長，溶出量逐漸增加，但隨著時間的延長增加逐漸緩慢。

對桂利嗪溶出效果有影響的因素包括制劑的包衣成分、片劑本身的硬度、脆碎度、崩解時限、聯合用藥情況及其他輔料的影響等。輔料有時會明顯影響桂利嗪的吸收效果，如臨床上使用桂利嗪的同時聯合使用分子結構較大的表面活性劑，就會加快桂利嗪的溶解速度。本研究中采用四種不同pH 值的溶出介質及三批不同廠家的桂利嗪片樣品進行溶出試驗，并分別繪制溶出曲線，試驗數據表明，三批桂利嗪片樣品在四種不同pH 值溶出介質中的溶出曲線走形相似，說明三批樣品的生產工藝對質量的控制基本無差異，三批桂利嗪片劑的制備工藝較為成熟穩定。桂利嗪片屬于pH 依賴型片劑，在水中難溶，pH 值升高可導致桂利嗪片的溶出效率降低，即使延長溶出時間也不能改變溶出效率低的行為。本研究中，桂利嗪片在磷酸鹽緩沖液和水兩種溶出介質中均無溶出，而在醋酸鹽緩沖液中很快達到了80% 的溶出量。但根據文獻報道的原研藥的溶出曲線，在醋酸鹽緩沖液中，桂利嗪片原研藥在溶出時間達到6 h 時仍未溶出到80%，這說明國產桂利嗪片與原研制劑在制備工藝上仍有一定的差異。在鹽酸溶液中，此三批桂利嗪片的溶出行為與原研藥差異同樣明顯，這提示我們國產制劑可能在體內血藥濃度上與原研制劑會存在差異，因此國產桂利嗪片的制備工藝還有提升的空間。

綜上所述，桂利嗪片在強酸溶液中溶出更完全，溶出曲線更趨近于水平，在堿性和水介質中無溶出。本試驗方法能夠有效測出桂利嗪片的體外溶出度，通過繪制溶出曲線能夠直觀體現桂利嗪片的溶出行為，為桂利嗪片廠家改進生產工藝提供參考。