新生兒壞死性小腸結腸炎患兒血清SAA、IL-8的表達及其與臨床預后的相關性

許俊,張金玉,王東麗,丁若雨

(南陽市第一人民醫院 兒科,河南 南陽 473000)

壞死性小腸結腸炎(necrotizing enterocolitis,NEC)的病死率較高,有研究報道可高達20%～30%,特別是胎齡不足33周的早產兒病死率更高[1]。雖然大部分早期患兒經保守治療后可痊愈,但若病情不斷進展需外科干預,術后常伴有一系列并發癥(如腸狹窄、神經系統發育異常等)[2]。目前影像學應用于診斷和評估患兒病情進展存在明顯的滯后性,而既往的研究顯示,血清標志物在評估NEC病情進展及預后中具有一定的臨床指導意義。且血清標志物檢查具有無創、快速等特點,更適用于評估新生兒疾病進展情況。NEC的確切病因尚不明確,但目前較多研究發現,NEC多與免疫調節異常、急性炎癥瀑布反應等有關[3-4]。白細胞介素-8(interleukin,IL-8)在炎癥反應中起到重要的調控作用,且有研究表明,在NEC發生中,攜帶的IL-8-251 A/T等位基因可在外界刺激下,擴大炎癥反應,增加NEC的易感性[5]。越來越多的證據也表明,各種炎癥遞質(如IL-6、IL-8)在NEC病情進展中出現升高[6-7]。但是IL-6、IL-8等炎癥遞質的特異性較低,在評估病情進展、預后等方面可能準確度較低。血清淀粉樣蛋白A(serum amyloid,SAA)在炎癥啟動8～24 h內水平急劇升高,對中性粒細胞和肥大細胞具有誘導作用,表現出較強的免疫活性[8]。SAA也被證明可激活炎性小體級聯反應,在激活免疫反應中起到關鍵作用。基于上述研究,為了進一步改善患兒的預后情況,本研究采用巢式病例對照研究,分析新生兒SAA患兒血清SAA、IL-8的表達及其與臨床預后的關系,旨在為改善NEC患兒的預后提供臨床支持。

1 資料與方法

1.1 臨床資料本研究經南陽市第一人民醫院醫學倫理委員會審核批準,倫理號(2020016),患兒家屬均簽署知情同意書。以2020年6月至2022年6月南陽市第一人民醫院兒科收治的NEC新生兒為研究對象,通過對入選對象臨床資料的判定,最終126例患兒進入隊列。病例納入標準:(1)NEC符合第9版《兒科學》[9]中相關標準,患兒主要表現為體溫不穩、喂養困難、嘔吐、便血等癥狀;且經實驗室、腹部X線平片、腹部超聲等綜合檢查確診;(2)入院日齡0～28 d;(3)修正后的Bell-NEC分期[10]為Ⅱ～Ⅲ期;(4)均為單胎。病例排除標準:(1)先天性消化道畸形;(2)合并有先天性免疫缺陷病、遺傳代謝性疾病;(3)近期接受過白蛋白或血小板輸注治療:(4)合并其他類型感染性疾病,如新生兒肺炎、腹膜炎;(5)外院診斷為NEC,但無完整的臨床資料。隨訪時間為60 d(以院內記錄或出院后電話或門診方式隨訪記錄為依據),至2022年8月。以隨訪期間患兒入院治療開始至終點事件發生(全因死亡)為預后判定標準,該隊列60 d內有18例患者納入病例組,其他108例患兒作為對照組。隨訪期間無脫落。

1.2 臨床資料調查采用統一的臨床資料調查表,統計患兒性別、胎齡(早產兒、足月兒)、有無窒息、有無宮內窘迫、發病時間(早發型、晚發型)(早發型為發病日齡≤7 d;晚發型為發病日齡>7 d)、NEC并發癥(如休克、呼吸衰竭、腎功能損害等)、治療方式(保守治療、外科手術治療)等。

1.3 血清SAA、IL-8檢查及其他實驗室指標測定于NEC確診時抽取其外周靜脈血1 mL,置于不含抗凝劑的真空采血管(試管1)為測量血清SAA的血樣標本;同時吸取10 μL全血置于含抗凝劑的真空采血管(試管2)為測量血清IL-8的血樣標本。將采血管反復顛倒混勻,直立靜置,低溫下3 500 r·min-1離心10 min,收集血清,并放置于-20 ℃冰箱中保存備用。其中血清SAA檢測方法為散射比濁法,試劑盒選自重慶博士泰生物技術有限公司;血清IL-8檢測方法為免疫熒光發光法,試劑盒選自天津曠博同生生物技術有限公司。同時檢測NEC確診時的其他實驗室指標,包括白細胞計數(white blood cell count,WBC)、血小板計數(platelet cell count,PLT)、中性粒細胞/淋巴細胞比值(neutrophil lymphocyte ratio,NLR)、C反應蛋白(C-reaction protein,CRP)等。

2 結果

2.1 不同臨床資料特征患兒生存期情況不同Bell-NEC分期、呼吸衰竭情況、治療方式的NEC患兒生存期比較,差異有統計學意義(P<0.05);不同性別、胎齡、窒息情況、宮內窘迫情況、發病時間、休克情況、腎功能損害情況、其他并發癥情況的NEC患兒生存期比較,差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 不同臨床資料特征患兒生存期情況

2.2 兩組患者實驗室指標比較病例組NLR值、血清CRP、SAA、IL-8水平均高于對照組,差異有統計學意義(P<0.05);兩組WBC、PLT值比較,差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 兩組患者實驗室指標比較

2.3 血清SAA、IL-8水平與NEC患兒預后的關系將NEC確診時血清SAA、IL-8水平作為因變量,預后作為自變量,經Cox回歸分析顯示,無論是否調整混雜因素,血清SAA、IL-8與新生兒NEC患兒預后有關(P<0.05)。見表3。

表3 血清SAA、IL-8水平與NEC患兒預后的關系

3 討論

NEC病情進展迅速、并發癥多,如未給予及時診斷、治療,易造成患兒病情預后差。NEC確切病因、發病機制尚不明確,但目前臨床研究發現,NEC的發生與過度炎癥反應密切相關,相關炎癥因素可導致腸道黏膜損傷,導致疾病進一步進展;且炎癥反應可減少腸系黏膜血流灌注減少,加快患兒病情進展,預后較差[11]。因此,本研究主要從炎癥反應這一機制出發,探討相關血清指標與NEC患兒臨床預后的關系,為臨床預后提供新的判斷依據。

本研究觀察血清SAA、IL-8水平與患兒的預后情況,結果顯示,預后不良患兒血清SAA、IL-8水平高于預后良好患兒。這一研究結果提示了血清SAA、IL-8水平在預后不良患兒中呈高表達,可能提示患兒預后情況。NEC的發病機制包括內源性炎癥反應和免疫炎癥遞質過度增加,IL-8是一類與免疫相關的細胞因子,當機體受到炎癥、感染等刺激時,其水平可異常升高,參與NEC的發生、發展。周川等[12]研究也證實了,IL-8水平變化有助于NEC新生兒的臨床診斷。且Nanthakumar等[13]于2011年的研究報道已指出,未成熟的腸道環境對定植細菌的某些成分和繼發產生的活化反應,可通過增加IL-8有關的炎癥反應而得以實現,而腸道環境紊亂可導致腸道黏膜損傷,增加NEC易感性。

SAA是敏感度、特異度更高的炎癥標志物,當機體受到細菌、病毒、支原體、衣原體等抗原刺激后,肝臟可分泌大量SAA,而機體抗原清除后,SAA可快速恢復至正常水平。由此提示了,SAA在提示炎癥性疾病病情、預后方面具有一定的作用。急性期SAA可激活許多促炎反應,誘導單核細胞和中性粒細胞等多種細胞因子的釋放,加重腸道黏膜的損傷壞死,也易引發其他器官感染或功能障礙;而新生兒機體免疫力較低,不易抵抗嚴重感染,促使病情進展,往往預后不佳[14]。

基于上述研究,本研究經Cox回歸分析顯示,無論是否調整混雜因素,血清SAA、IL-8高表達是NEC患兒60 d內病死的高危因素。臨床多項研究已證實,NEC患兒的預后與腸道缺血缺氧、炎癥壞死、并發癥等相關[15-16]。血清SAA、IL-8水平增加,會打亂炎癥平衡狀態,促炎過程遠高于抗炎過程,導致腸道黏膜缺氧缺血、啟動腸道炎癥的級聯反應,損傷腸黏膜,進而引發NEC患兒出現不良結局。且NEC是一種快速進展的炎癥性胃腸道疾病,炎癥遞質的持續升高可促使患者病情由輕癥迅速進展至急性腹膜炎、休克等,最終可能引起多器官衰竭,導致其預后不良。根據本研究的結果可得出,通過檢測血清SAA、IL-8水平變化可提示患兒的預后情況。但本次研究未進一步證實,在今后的研究中可進行具體的分析,以此證實兩指標在新生兒NEC中的價值。

此外,本研究還發現,血清SAA與IL-8呈正相關。主要是由于兩指標均參與NEC患兒的炎癥反應,二者可相互影響、相互作用,促進患兒病情進展。且本研究觀察不同預后患兒的其他指標情況,發現NEC Ⅲ期、手術治療、呼吸衰竭、NLR、CRP均可能與新生兒NEC患兒預后不良有關。但臨床相關研究中已證實,因而本研究未進行進一步分析。但臨床評估NEC患兒預后情況時,需考慮上述因素的影響,以此更為精確地判斷患兒預后。

綜上所述,血清SAA、IL-8高表達提示新生兒NEC患兒預后不良,兩指標可為臨床治療效果、預后提供新的判斷依據。