氣相色譜-三重四極桿質譜聯用法測定果蔬汁中的甲拌磷

張政，邰亮，王林，戚培培

摘 要：目的：對果蔬汁中殘留的甲拌磷農殘用氣相色譜-三重四極桿質譜聯用法進行定量分析。方法：樣品經過QuEChERS前處理，濃縮定容后進樣，利用GC-MS在MRM掃描模式下分析測定，利用目標化合物特征離子呈現的相對豐度比及存留時間，用內標方法定量。結果：在甲拌磷標液濃度范圍0.005～0.100 μg·mL-1，相關系數R2的值0.999 9，方法的檢出限為0.001 9 mg·kg-1，定量限為0.010 0 mg·kg-1，0.05～0.20 mg·kg-1添加水平時，平均回收率82.7%～94.9%，相對標準偏差1.04%～1.43%（n=6）。結論：該方法快速、高效、準確，滿足測定果蔬汁中甲拌磷的要求。

關鍵詞：果蔬汁；甲拌磷；氣相色譜-三重四極桿質譜聯用；內標法測定

Determination of Phorate in Fruit and Vegetable Juices by Gas Chromatography-Triple Quadrupole Mass Spectrometry

ZHANG Zheng， TAI Liang， WANG Lin ， QI Peipei

（Baoying Comprehensive Inspection and Testing Center of Product Quality， Yangzhou 225800， China）

Abstract： Objective： To quantitatively analyze phorate residues in fruit and vegetable juice by gas chromatography triple quadrupole mass spectrometry. Method： The samples were pretreated by QuEChERS， concentrated and fixed volume before injection， analyzed and determined by GC-MS in MRM scanning mode， and quantified by internal standard method using the relative abundance ratio and retention time of target compound characteristic ions. Result： Concentration range of phorate standard solution is 0.005～0.100 μg·mL-1， the value of correlation coefficient R2 is 0.999 9， the detection limit of the method is 0.001 9 mg·kg-1， the limit of quantitation is 0.010 0 mg·kg-1， the average recovery is 82.7%～94.9%， and the relative standard deviation is 1.04%～1.43% （n=6） at the addition level of 0.05～0.20 mg·kg-1. Conclusion： The method is rapid， efficient and accurate， and can meet the requirements for the determination of phorate in fruit and vegetable juice.

Keywords： fruit and vegetable juices; phorate; gas chromatography-triple quadrupole mass spectrometer; internal standard determination

果蔬汁能為人體有效補充豐富的礦物質以及多種維生素，增加膳食纖維，增強人體細胞活力。但是，作為原材料的蔬菜瓜果，在種植過程中不可避免地會接觸到各種農藥，會對消費者健康產生威脅，引發潛在的食品安全問題[1]。甲拌磷[2]，化學名稱O，O-二乙基-S-（乙硫基甲基）二硫代磷酸酯，是一種劇毒的有機化合物，廣泛用于農業生產中。為保障農產品質量以及人身健康安全，探索出一種準確、高效的甲拌磷檢測方法十分必要。

根據《食品安全國家標準 植物源性食品中208種農藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜-質譜聯用法》（GB 23200.113—2018），氣相色譜-三重四極桿質譜聯用法在進行目標分析時具備出色的穩定性、高性能和靈敏度，以氣相色譜-三重四極桿質譜聯用法為基礎建立甲拌磷的檢測、評定分析方法，可以得到滿意的結果[3]。

1 材料與方法

1.1 樣品、試劑耗材和儀器

樣品：果蔬汁，能力考核樣品（大連中食提供）。

試劑耗材：乙腈（分析純）；乙酸乙酯（色譜純）；丙酮（分析純）；萃取鹽包（4 g硫酸鎂+1 g氯化鈉+1 g檸檬酸鈉+0.5 g檸檬酸氫二納）；15 mL凈化管（885 mg硫酸鎂+150 mg PSA+15 mg GCB）；陶瓷均質子和50 mL萃取管，其他實驗室內常用玻璃儀器及耗材。

標準物質：甲拌磷標準溶液（100 μg·mL-1，證書編號BW900752-100-A，壇墨質檢）；環氧七氯B標準溶液（100 μg·mL-1，證書編號CDAA-S-411017-MA，安譜）。

儀器：氣相色譜-三重四極桿質譜聯用儀（設備編號US2029U301，規格型號8890/7000D，安捷倫），配有電子轟擊源（EI）；渦旋振蕩器（規格型號MS digtal，IKA）；快速冷凍離心機（規格型號BIOFUGE，賽默飛）；十萬分之一分析天平、水浴氮氣吹干儀等實驗室常見儀器。

1.2 實驗方法

1.2.1 樣品QuEChERS前處理

稱取10 g果蔬汁能力驗證的樣品，放入塑料萃取管里面（50 mL），移液管移取乙腈10 mL加入，再向管內加入1份萃取鹽包后蓋上管蓋，猛烈振蕩后離心，離心機設定的速度為4 200 r·min-1，萃取管放入機器中5 min后取出。離心完畢后，吸取6 mL上清液加入15 mL凈化管內，渦旋振蕩器上渦旋混勻

1 min。萃取管再次放入機器5 min后取出。離心完畢后，吸取2 mL上清液加入10 mL試管中，置于水浴氮氣吹干儀中，設定溫度40 ℃條件下氮氣吹至近干。加入20 μL的內標環氧七氯溶液，加入1 mL乙酸乙酯再次溶解，混勻后過有機相濾膜，待進樣。另取試劑空白，除不加試料，其他均按上述步驟平行操作[4]。

1.2.2 標準溶液配制

環氧七氯B標準溶液（5 μg·mL-1）：準確稱取環氧七氯B固體10 mg，利用10 mL的容量瓶，加入乙酸乙酯稀釋成內標溶液（5 μg·mL-1）。

甲拌磷標準中間液（100 μg·mL-1）：準確移取甲拌磷標準儲備液（1 000 μg·mL-1）1 mL于10 mL容量瓶中，乙酸乙酯定容；甲拌磷標準溶液（10 μg·mL-1）：準確移取甲拌磷標準中間液（100 μg·mL-1）1 mL于1個10 mL容量瓶中，乙酸乙酯定容。

甲拌磷系列標準工作液：吸取甲拌磷標準溶液（10 μg·mL-1）5 μL、10 μL、20 μL、50 μL、100 μL于10 mL容量瓶中，乙酸乙酯定容，配制成含甲拌磷濃度為0.005 μg·mL-1、0.010 μg·mL-1、0.020 μg·mL-1、0.050 μg·mL-1、0.100 μg·mL-1的標準工作溶液。

空白基質溶液氮吹至近干，加入20 μL內標液，分別加入1 mL甲拌磷系列標準工作液復溶，分別用一次性注射器過濾膜，配制成含有甲拌磷的基質混合標準工作溶液[5]，等待進入GC-MS測定。根據所測結果進行分析并繪制標準曲線，得到線性回歸方程。

1.2.3 氣相色譜-質譜條件設定

色譜柱：HP-5ms（15 m×0.250 mm，0.25 μm，產品序列號US0628013A）2根串聯；色譜柱程序升溫：柱溫40 ℃（1 min，40 ℃·min-1）→120 ℃（0 min，5 ℃·min-1）→240 ℃（0 min，12 ℃·min-1）→300 ℃（6 min）；載氣：氦氣濃度≥99.999%，氣體色譜柱內流速1.0 mL·min-1；進樣口：280 ℃；進樣方式：不分流進樣；進樣量：1 μL；離子加速器：280 ℃；離子傳輸線：280 ℃；EI：70 eV；甲拌磷定量離子對260.0、75.0，碰撞電壓5 V，定性離子對230.9、128.9，碰撞電壓25 V；環氧七氯B定量離子對352.8、262.9，碰撞電壓15 V，定性離子對354.8、264.9，碰撞電壓15 V。

2 結果與分析

2.1 標曲線性、方法檢出限和定量限

本次實驗甲拌磷系列標準工作液為0.005 μg·mL-1、0.010 μg·mL-1、0.020 μg·mL-1、0.050 μg·mL-1、0.100 μg·mL-1，相關系數R2的值達到了0.999 9，線性良好，滿足線性要求。線性圖譜見圖1。

由信噪比計算公式S/N=3和S/N=10可分別得到方法的檢出限和定量限。經過計算得出，當稱樣量為10.00 g，定容體積為1 mL時，該方法的檢出限為0.001 9 mg·kg-1，定量限為0.010 0 mg·kg-1。

2.2 精密度與回收率平行實驗結果

通過向果蔬汁空白樣品中添加一定量的甲拌磷標準溶液，以此來計算本方法的回收率與精密度。添加體積分別為0.05 mL、0.10 mL、0.20 mL的甲拌磷標準溶液（1 μg·mL-1），添加水平分別為0.05 μg、0.10 μg、0.20 μg，按照本方法前處理重復6次平行實驗，計算公式為

P=5C×V/（C0×V0）×100%（1）

式中：P為回收率，%；C為測得試樣中甲拌磷的含量，μg·mL-1；5為稀釋倍數；V為檢驗樣品定容體積，mL；C0為加入標液的濃度，μg·mL-1；V0為加入標液的體積，mL。

測得甲拌磷在添加水平為0.05～0.20 mg·kg-1時，平均回收率在82.7%～94.9%，標準偏差系數，即精密度在1.04%～1.43%。回收率的數值和精確度的數值如表1所示。

3 結論

本實驗建立了果蔬汁中甲拌磷測定的氣相色譜-三重四極桿質譜聯用檢測方法。多次實驗表明，本方法快速、高效、準確，對于果蔬汁試樣中甲拌磷提取效果較好，標曲線性良好，定量限、檢出限、相對標準偏差、回收率等技術指標均達到國家標準要求，滿足對甲拌磷分析檢測需要。

參考文獻

[1]張兆利.濫用高毒農藥違法[J].湖南農業，2021（10）：50.

[2]馬濤，鄭曉東，宋麗花.山西省蔬菜農藥殘留現狀分析[J].中國植保導刊，2022，42（5）：86-89.

[3]楊靜，曹海峰，張海霞.串聯質譜檢測果蔬中甲拌磷及其代謝物的優勢分析[J].黑龍江農業科學，2017（9）：98-103.

[4]曾霞，于雅匯，王鳥，等.QuEChERS前處理技術在農藥多殘留檢測中的研究進展[J].當代化工研究，2022（6）：33-35.

[5]徐國鋒，聶繼云，李海飛，等.基質效應對氣相色譜法檢測蘋果和梨中有機磷農藥的影響[J].果樹學報，2011，28（1）：97-101.