肌肉減少癥動物模型造模方法研究進展*

王 維，楊 艷，張伊祎，張學軍，張 磊

電子科技大學附屬四川省人民醫(yī)院/四川省醫(yī)學科學院·四川省人民醫(yī)院 （成都 610072）

肌肉減少癥（肌少癥）是一種主要表現(xiàn)為肌肉質(zhì)量減少、肌力減退、肌肉功能下降，導致機體功能退化、跌倒、臥床、死亡等不良結(jié)局的綜合征；常發(fā)生于老年人群，是一個與年齡密切相關(guān)的發(fā)展過程。隨著我國人口老齡化的推進，肌少癥已經(jīng)成為影響老年人身體健康及生活質(zhì)量的重要因素。但目前學界對肌少癥的認識尚不充分，進一步研究肌少癥發(fā)病機制、干預和治療方法的前提是篩選和建立肌少癥動物模型。本文擬探討肌少癥動物模型的造模方式、造模動物的優(yōu)缺點、各種模型的適用范圍，以及肌少癥動物模型的評定標準，以期為后續(xù)肌少癥動物造模研究提供參考。

1 肌少癥

1.1 肌少癥定義

肌少癥的概念于1989年由Rosenberg提出。2010年歐洲老年人肌少癥工作組發(fā)表了肌少癥共識，將肌少癥定義為一種與增齡相關(guān)的肌肉質(zhì)量減少、肌肉力量下降和/或軀體功能減退的老年綜合征[1]。2018 年歐洲老年人肌少癥工作組修訂了肌少癥的定義，以肌肉力量作為肌少癥診斷的主要參數(shù)，并使用軀體功能評估病情的嚴重程度。目前肌少癥的定義已在世界范圍內(nèi)被廣泛接受，肌少癥也成為近年來國外研究的熱點。

1.2 肌少癥的研究現(xiàn)狀

隨著人口老齡化的推進，肌肉骨骼疾病已經(jīng)成為全球公共健康問題。肌少癥嚴重影響老年人的身體健康，導致老年人衰弱、跌倒、骨折發(fā)生率增加[2]。肌少癥在危害老年人身體健康的同時，還會導致老年人心理負擔加重，最終影響老年人的生活質(zhì)量。據(jù)統(tǒng)計，2018年我國60 歲以上人口占總?cè)丝诘?5%，預計到2050 年，65 歲以上人口有望突破4 億[3]。肌少癥在60～70 歲人群中發(fā)病率為5%～13%，≥80 歲人群發(fā)病率可達11%～50%[4]。Goates等[5]根據(jù)最新的肌少癥分類和醫(yī)院支出數(shù)據(jù)，對肌少癥的經(jīng)濟負荷進行評估發(fā)現(xiàn)，2019年美國肌少癥患者治療成本平均為260 美元/人，全球成本為404 億美元。因此，對肌少癥的識別和管理迫在眉睫。

目前肌少癥暫無明確的致病機制，多種風險因素和機制參與其發(fā)生、發(fā)展。多項研究[2，6-8]表明，肌少癥發(fā)生與蛋白質(zhì)合成和分解途徑失衡、免疫功能失調(diào)、慢性炎癥、肌肉調(diào)控因子失調(diào)等因素密切相關(guān)。肌肉質(zhì)量下降主要是由于肌纖維數(shù)量和肌纖維橫截面積減少造成，根據(jù)肌細胞代謝方式和收縮速率可將骨骼肌分為慢肌纖維和快肌纖維。在肌少癥患者中，兩種肌纖維的數(shù)量和橫截面積均明顯下降，其中快肌纖維的數(shù)量和橫截面積下降更顯著，這是肌少癥不同于其他累及骨骼肌疾病（如肥胖、惡病質(zhì)等）的重要病理特征。隨著年齡的增加，在骨骼肌組織減少的同時也觀察到非收縮成分（包括脂肪及結(jié)締組織）增加，而肌肉組織毛細血管密度降低，提示肌少癥患者骨骼肌組織中的細胞微環(huán)境發(fā)生了惡化。骨骼肌中肌衛(wèi)星細胞通常是靜止的，當骨骼肌受損傷或刺激后可活化和增殖，產(chǎn)生新肌纖維，但骨骼肌組織中肌衛(wèi)星細胞的數(shù)量和肌細胞再生隨年齡增長而明顯減少，這可能是老年人更容易發(fā)生肌少癥的原因。對于高危人群如老年人及慢病患者來說，肌少癥的早期預防非常重要，篩選并建立肌少癥動物模型是研究肌少癥的前提和基礎。

目前，肌少癥造模動物主要有嚙齒類動物、果蠅、斑馬魚、秀麗隱桿線蟲、犬等。造模方案主要有衰老模型、化學誘導模型、廢用模型、基因工程模型，不同造模方法及模型各有優(yōu)缺點，需要結(jié)合實際情況進行選擇。

2 肌少癥動物模型的評定標準

對肌少癥的診斷和評價主要基于肌肉質(zhì)量、肌肉力量和肌肉功能，因此一般使用上述3 個指標評定肌少癥動物模型造模是否成功。動物模型肌肉質(zhì)量可直接測量，一些研究[9]測量動物后肢的骨骼肌質(zhì)量（脛骨前肌、比目魚肌、足底肌、腓腸肌），以此代表所有肌肉的質(zhì)量。但腓腸肌是受衰老影響最大的肌肉，也是下肢活動中最重要的肌肉，被認為是骨骼肌質(zhì)量和力量的良好代表，所以肌少癥動物模型多以腓腸肌為目標肌進行稱重[10-11]，同時腓腸肌也可用于后續(xù)各項生化指標的測定。此外，腓腸肌重量與體重之比可作為小鼠肌少癥模型的診斷依據(jù)，但具體的診斷分界點還有待進一步研究。更重要的是，能夠準確測量活鼠肌肉質(zhì)量的儀器并不常見，這限制了該方法在研究中的應用。活體動物肌肉質(zhì)量檢測與人類相似，可采用CT、MRI、生物電阻抗分析、雙能X線吸收測定等方法進行檢測。

肌肉力量可通過轉(zhuǎn)棒式疲勞儀及動物前肢抓力進行測定與評價[12]。研究[13]表明，手的握力（前肢握力）與下肢肌肉力量、腿部肌肉橫截面積密切相關(guān)，所以可通過測量前肢握力來表示小鼠整體肌肉力量。實驗前，讓小鼠適應握力儀10 min，將小鼠前肢置于握力儀傳感橫桿上，前肢抓住橫桿后，水平向后拖動小鼠尾巴，直到小鼠不能堅持，釋放前肢。由握力儀自動記錄小鼠在持桿過程中的最大抓力。重復測量多次，取最大值或平均值記錄為小鼠前肢抓力。除了前肢的力量，還可以測量小鼠四肢的抓力作為肌肉力量的評定指標。

肌少癥患者肌肉功能常以行走6 或4 m的速度來評估[14]，動物的肌肉功能也可用測量步速的方式來評定。轉(zhuǎn)棒式疲勞儀可間接反映小鼠的行走速度，將小鼠放在轉(zhuǎn)棒上，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)棒的轉(zhuǎn)速，記錄小鼠落下時的轉(zhuǎn)速。有研究[15]認為，這種方法并不局限于測量最終轉(zhuǎn)速，還可用來測量在適當轉(zhuǎn)速范圍內(nèi)下落的小鼠數(shù)量，以反映小鼠的肌肉功能。但目前肌少癥動物模型評定的相關(guān)研究仍較少，其評定方式、標準和可行性還需進一步探討。

3 大小鼠肌少癥模型建立

大小鼠與人類的衰老過程和基因水平相似，能夠在較短時間內(nèi)模擬人類的衰老過程[16]。且大小鼠基因組轉(zhuǎn)化技術(shù)成熟，發(fā)達的肌肉骨骼系統(tǒng)和肌肉干細胞并存的特點適用于與年齡相關(guān)的肌肉再生下降研究。小鼠價格相對便宜，這使得它們常成為大樣本研究選擇的動物。大鼠和小鼠因尾巴較長，常用來作為尾懸吊肌少癥動物模型的構(gòu)建材料。大小鼠模型可為肌少癥的藥物干預和各種運動治療干預提供初步的研究依據(jù)，但人類骨骼肌的組成與大小鼠不同，當將大小鼠模型結(jié)果擴展到人類時，需要考慮纖維類型的異質(zhì)性。

3.1 衰老模型

由于衰老是大多數(shù)肌肉骨骼疾病（包括骨關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松癥和肌肉減少癥）的主要危險因素，衰老小鼠模型已廣泛用于肌肉減少癥的研究。通常使用的小鼠衰老模型有自然衰老、高脂飲食誘導衰老和加速衰老小鼠模型（senaging - accelerated mouse，SAM）。

自然衰老模型：實驗小鼠和大鼠壽命一般為24個月，3 月齡的老鼠相當于20 歲的人類，18～24 月齡的老鼠相當于56～69 歲的人類。根據(jù)以往的研究[17]，與衰老相關(guān)的生物標志物主要在老鼠18 月齡后檢測到。18 月齡小鼠的后肢抓力、運動耐力、肌肉體積和肌肉質(zhì)量明顯低于10 周齡小鼠，表明18 月齡小鼠存在肌少癥表現(xiàn)[18]。持續(xù)觀察18 月齡小鼠直至25 月齡，發(fā)現(xiàn)與18 月齡的小鼠相比，25 月齡小鼠后肢肌肉含量、日常活動量、肌肉力量均顯著降低。研究[16，19]認為，25 月齡自然衰老小鼠是研究肌少癥的合理模型。

高脂飲食誘導衰老模型：越來越多研究[20-22]發(fā)現(xiàn)，高脂飲食是肌少癥的重要危險因素。喂食高脂肪/高蔗糖飲食的小鼠會發(fā)生一系列代謝變化，包括肥胖和血糖、血脂異常。在高脂飲食模型中，肌肉組織內(nèi)炎癥反應增強，肌肉干細胞再生能力下降，肌細胞向肌管分化的過程受到破壞。所以高脂飲食模型小鼠肌肉之間的脂肪堆積增多，肌肉衰老萎縮，使骨骼肌力量下降。由于高脂肪飲食可加速肌少癥，同時導致肥胖，因此，高脂飲食誘導衰老小鼠模型可成為肌少癥肥胖動物模型的理想選擇。

SAM模型：由于自然衰老小鼠模型的建立需要較長時間，越來越多的研究者選擇復合型方法，以縮短肌少癥的建模時間。SAM能夠在相對較短的實驗時間內(nèi)了解衰老和骨骼肌衰老的機制。在SAM族群中，8 月齡加速衰老小鼠（senescence accelerated mouse prone 8，SAMP8）在第7 個月時出現(xiàn)肌肉質(zhì)量峰值，從第8 個月開始觀察到腓腸肌的離體收縮力下降，第10 個月肌肉大部分功能參數(shù)明顯下降，較普通小鼠達到衰老階段可節(jié)省2/3 的時間[13，23]。SAMP8 比正常小鼠更早表現(xiàn)出肌肉衰老的特征（肌肉質(zhì)量減少、強直收縮和松弛速率降低、Ⅱ型肌肉纖維萎縮），并且比其他SAMP的肌肉衰老更明顯[24]。Zhang等[25]研究結(jié)果也顯示，SAMP8 小鼠肌肉質(zhì)量、力量和功能都明顯下降，且存在肌少癥和骨質(zhì)疏松。同時，SAMP1、SAMP6 和SAMP10 也表現(xiàn)出肌肉衰老特征，被用于肌少癥研究。

3.2 化學誘導模型

地塞米松（dexamethasone，DXM）注射法：DXM是一種合成糖皮質(zhì)激素，具有抗炎、抗過敏和抗休克作用。但長期注射DXM可導致肌肉萎縮、體重增長、心臟脂肪堆積和其他不良反應[26]。研究[27]發(fā)現(xiàn)，DXM導致的肌肉萎縮以Ⅱ型肌纖維減少為主，這與衰老引起的肌肉萎縮一致，說明DXM可成功建立肌少癥大鼠模型。魯飛翔等[27]以6～7 月齡小鼠為研究對象，皮下注射DXM 6 周，注射劑量為5 mg/kg時，小鼠肌肉質(zhì)量和功能均顯著降低，認為建模成功。國外學者Aru等[28]在22 月齡雌性大鼠皮下注射DXM 10 d，注射劑量為0.50μg/g，引起大鼠體重及肌肉含量顯著下降，同時后肢抓力降低25%（P<0.01），結(jié)果判定肌少癥模型構(gòu)建成功。

右旋糖酐硫酸鈉 （dextran sulfate sodium，DSS）注射法：給10 周齡雄性小鼠灌服0.75% DSS 14 d后，發(fā)現(xiàn)其股四頭肌和腓腸肌的肌纖維減少，肌肉損傷的標志物即肌酸激酶略有增加，結(jié)果支持成功誘導肌少癥模型[29]。DSS不僅可誘導急性結(jié)腸炎，而且可導致小鼠肌肉嚴重損失，是誘發(fā)炎癥相關(guān)肌少癥的合適模型。

D-半乳糖注射法：通過皮下注射D-半乳糖建立衰老模型的原理是衰老代謝理論，即通過影響機體細胞的功能代謝（氧化應激、炎癥等），降低與之相關(guān)的一些重要酶的功能，誘導實驗動物出現(xiàn)類似自然衰老的變化[30]。Yanar等[31]將5月齡D-半乳糖肌少癥雄性大鼠模型肌肉代謝指標與24月齡大鼠肌肉相關(guān)指標同步比較，發(fā)現(xiàn)兩組大鼠的肌肉細胞均會發(fā)生氧化應激，這種變化在大鼠比目魚肌中最明顯[23]，結(jié)果表明，D-半乳糖可誘導慢性炎癥和氧化應激，導致嚙齒類動物加速衰老。D-半乳糖與DXM類似，可以皮下注射，不僅能夠減少對動物的刺激，避免不必要的死亡，而且能夠逐漸增加衰老程度，更適合研究老年人的自然衰老過程[32]。

3.3 廢用模型

尾懸吊法：尾懸吊的原理是破壞多種細胞代謝過程，如誘導氧化失衡、線粒體功能障礙、細胞間相互作用和異常蛋白質(zhì)合成/降解，從而促進肌肉萎縮[33]。尾懸吊能夠模擬失重狀態(tài)，減少骨骼肌的使用，促進肌肉萎縮。目前廣泛用于研究由肌肉消瘦疾病、臥床休息和制動等各種情況引起的肌肉萎縮。尾懸吊法一般采用大鼠或小鼠作為實驗動物，將動物的后肢抬高，避免后肢負重。確保老鼠能夠自由轉(zhuǎn)體及活動，供給足夠水分及食物，通常在14 d左右即可建模成功，其優(yōu)勢在于成模率及一致性好，劣勢在于操作相對復雜，動物死亡率高。懸吊小鼠尾部使其機體與籠底夾角為30°，懸吊10 d后與對照組小鼠相比，吊尾組小鼠比目魚肌代謝顯著異常，表現(xiàn)出明顯的肌肉萎縮[34]，證明成功建立肌少癥模型。

神經(jīng)截斷法：采用手術(shù)操作、物理干預、化學藥物等，對實驗動物的周圍神經(jīng)干、神經(jīng)叢根部和脊髓進行人工破壞或阻滯，影響神經(jīng)支配肌肉，導致肌肉功能障礙而構(gòu)成肌少癥。這種造模方法用于模擬肢體運動障礙造成的肌肉萎縮[23]。大鼠右側(cè)坐骨神經(jīng)橫斷術(shù)后第14 d，Huang等[35]觀察到實驗組大鼠腓腸肌相對重量及肌纖維橫截面積均顯著下降，證實已有肌少癥的表現(xiàn)。Tamaki等[36]分離出大鼠坐骨神經(jīng)后進行冰凍處理，發(fā)現(xiàn)實驗組大鼠比目魚肌、脛前肌和趾長伸肌的重量和肌纖維橫截面積顯著下降，造模成功。

關(guān)節(jié)固定法：關(guān)節(jié)部位固定的肌肉因為廢用而引起肌肉萎縮，該模型用于模擬關(guān)節(jié)融合術(shù)、關(guān)節(jié)病變或單純骨折后需要打石膏的情況[37]。以最大屈曲度將小鼠髖關(guān)節(jié)、膝關(guān)節(jié)和踝關(guān)節(jié)固定在背部皮膚，固定1～3周后，便可出現(xiàn)廢用性萎縮。有研究[38]將成年大鼠的后肢固定，10 d后大鼠比目魚肌的肌肉質(zhì)量和功能均顯著降低，證實造模成功。

3.4 基因工程小鼠模型

Sod1（-/-）/Sod1KO小鼠：研究[39]表明，銅與鋅超氧化物歧化酶可逆轉(zhuǎn)骨骼肌中自由基的產(chǎn)生，防止肌肉萎縮。在Sod1（-/-）/Sod1KO小鼠模型中，幼年小鼠因缺失銅與鋅超氧化物歧化酶導致神經(jīng)肌肉連接中斷，運動神經(jīng)傳遞受損，肌肉萎縮加速[40]。目前Sod1（-/-）/Sod1KO小鼠已被用于肌肉萎縮和肌少癥的各種研究[24，41]。

線粒體DNA（mtDNA）聚合酶γ缺陷小鼠：mtDNA突變的積累是導致線粒體功能障礙和壽命縮短的原因。研究[42]發(fā)現(xiàn)，mtDNA聚合酶γ缺陷小鼠表現(xiàn)出mtDNA突變率增加、線粒體功能障礙和早衰，如體重減輕、皮下脂肪減少、骨質(zhì)疏松和肌肉減少，適合用于模擬與增齡相關(guān)的肌少癥動物模型。

天冬酰胺合成酶結(jié)構(gòu)域1（asparagine synthetase domain containing 1，ASNSD1）缺乏小鼠：ASNSD1基因發(fā)生突變的小鼠會出現(xiàn)進行性退行性肌病，導致肌肉減少和骨骼肌變性。Vogel等[43]研究發(fā)現(xiàn)，14 周齡ASNSD1小鼠的肌肉群出現(xiàn)廣泛的退行性變化，37 周齡的ASNSD1小鼠出現(xiàn)肌內(nèi)和間質(zhì)脂肪變性、肌肉明顯減少，表現(xiàn)為嚴重的肌無力，可作為肌少癥的造模方法。

4 果蠅模型建立

果蠅肌肉在體重中占很大比例，肌肉功能可通過測量其飛行和攀爬能力來評定。果蠅缺乏肌肉干細胞，不受肌肉再生的混雜影響，這對研究肌肉衰老過程存在優(yōu)勢。同時果蠅生命周期短，基因轉(zhuǎn)化技術(shù)非常成熟，是一種高效且經(jīng)濟的肌少癥模型[24]。

肌強直性營養(yǎng)不良（myotonic dystrophy，DM）果蠅：DM是由mRNA非編碼區(qū)CUG重復引起的常染色體顯性疾病，DM患者的臨床特征包括肌強直、肌肉萎縮、心臟傳導障礙等。有研究[44]在果蠅中構(gòu)建了一個由480 個CUG重復序列組成的非編碼mRNA，該mRNA轉(zhuǎn)錄積累表達導致果蠅肌肉萎縮和退化，生成了第一個DM的果蠅模型。

dPOMT1/dPOMT2突變果蠅：蛋白-O-甘露糖基轉(zhuǎn)移酶1 （protein O-mannosyltransferase 1，POMT1）缺陷會導致先天性肌營養(yǎng)不良。dPOMT1、dPOMT2是果蠅POMT1同源基因，dPOMT1是在該基因的第一個外顯子中插入等位基因創(chuàng)建的，可導致胚胎肌肉發(fā)育缺陷。dPOMT1幼蟲表現(xiàn)為腹部肌肉缺損或瘦弱，dPOMT1成蟲表現(xiàn)為腿部和飛行肌肉缺陷。在顯微鏡下觀察到dPOMT2突變果蠅肌肉超微結(jié)構(gòu)缺陷、肌肉排列紊亂、z線不規(guī)則、纖維散亂、肌漿網(wǎng)腫脹等一系列肌肉病理狀態(tài)[6]。dPOMT1/dPOMT2突變果蠅符合肌少癥的表現(xiàn)，可作為研究肌少癥的模型。

基因敲除：果蠅體內(nèi)有許多與人類肌營養(yǎng)不良蛋白同源的異構(gòu)體，人體內(nèi)的肌營養(yǎng)不良蛋白Dp427、Dp260、Dp140、Dp116、DP71 等亞型分別與果蠅體內(nèi)的DLP1、DLP2、DLP3、Dp205 和Dp186 相似[45]。在敲除肌營養(yǎng)不良蛋白亞型基因C端后，果蠅幼蟲期會出現(xiàn)嚴重肌肉變性，肌肉斷裂或缺失，肌纖維與肌腱細胞附著部位分離[46]。敲除果蠅肌營養(yǎng)不良蛋白Dp117 亞型后，在電鏡下顯示，果蠅肌肉斷裂、肌絲組織紊亂、肌漿網(wǎng)膨脹。因此，基因敲除果蠅可作為研究肌少癥的模型。

5 斑馬魚模型的建立

斑馬魚骨骼肌在分子和組織學上與人類骨骼肌高度相似。且斑馬魚骨骼肌快肌纖維和慢肌纖維組織容易分離，適合研究其在肌肉減少癥中的異質(zhì)性[47]。研究[48]表明，肌少癥斑馬魚的骨骼肌橫截面積降低、蛋白質(zhì)合成降解失衡、線粒體功能障礙等，與人骨骼肌衰老過程類似。21 月齡的斑馬魚大致相當于50 歲的人類，可用于模擬肌少癥[49]。

5.1 化學誘導模型

DXM：斑馬魚與嚙齒類動物一樣可使用DXM誘導建立肌少癥模型。將斑馬魚浸泡在含DXM的水中，斑馬魚可通過皮膚和鰓吸收DXM，從而誘導斑馬魚骨骼肌萎縮[50]。

慢性酒精模型：哺乳動物長時間高劑量飲酒會導致肌肉萎縮，乙醇誘導骨骼肌萎縮的機制尚不完全清楚，其中一個原因是乙醇會增加泛素連接酶的表達，從而導致肌肉萎縮[24]。與哺乳動物類似，長期乙醇暴露（在普通斑馬魚水中添加0.5%的乙醇，持續(xù)8 周）可導致斑馬魚肌肉萎縮[51-52]。因此，慢性酒精模型也是斑馬魚肌少癥建模的一種理想方法。

5.2 基因工程模型

肌管蛋白相關(guān)蛋白12（the myotubular in related protein 12，MTMR12）敲除斑馬魚：研究[53]發(fā)現(xiàn)，MTMR12與肌小管蛋白結(jié)合可為肌小管蛋白提供穩(wěn)定性，斑馬魚中MTMR12基因敲除會導致骨骼肌缺陷和運動功能受損。MTMR12基因敲除斑馬魚的病理變化與X連鎖肌管肌病類似，電鏡下表現(xiàn)為中心形核、三聯(lián)征紊亂和肌纖維萎縮，可進行肌少癥建模。

Sapje斑馬魚：研究[54-55]發(fā)現(xiàn)，Sapje斑馬魚攜帶一種營養(yǎng)不良蛋白突變基因，形態(tài)學分析顯示其肌肉纖維有明顯的病理變化，如肌腱連接處脫離、肌肉廣泛變性伴纖維化、炎癥反應等，使Sapje斑馬魚從胚胎期開始便出現(xiàn)肌肉逐漸退化，可用于肌少癥建模。

肌球蛋白結(jié)合蛋白C1 （myosin binding protein-C，MYBPC1）基因突變斑馬魚：MYBPC1 是一種骨骼肌蛋白，主要在慢肌纖維中表達。人類MYBPC1基因突變會導致遠端關(guān)節(jié)攣縮（先天性攣縮綜合征）進行性發(fā)展。斑馬魚MYBPC1基因下調(diào)表現(xiàn)出異常的發(fā)育表型，如運動功能受損、運動活性下降、肌節(jié)數(shù)量減少，以及輕微的身體彎曲和總體生存率受損[56]，即出現(xiàn)肌少癥的表現(xiàn)，因此可選擇MYBPC1基因突變斑馬魚進行造模。

N471突變斑馬魚：在人類嬰兒中，星云蛋白基因的N471突變會導致肌肉無力和運動功能下降。具有相同突變的星云蛋白斑馬魚遺傳模型表現(xiàn)出與人類相似的組織學特征，包括肌肉力量下降和肌肉纖維組織改變[57]。因此N471突變斑馬魚模型可作為肌少癥的模型。

6 其他動物肌少癥模型建立

6.1 秀麗隱桿線蟲

秀麗隱桿線蟲的壽命短暫（平均18～21 d），便于進行衰老研究。線蟲靠體壁肌肉運動，肌肉功能也容易監(jiān)測，是研究肌節(jié)組裝、維持、調(diào)控和肌肉衰老機制等的理想模型[46]。

肌營養(yǎng)不良蛋白同源物（dystrophin homologue 1，dys1）/ 肌源性轉(zhuǎn)錄因子雙突變：肌源性轉(zhuǎn)錄因子在肌肉分化過程中能調(diào)節(jié)伴侶蛋白表達，敲除該轉(zhuǎn)錄因子后，秀麗隱桿線蟲會出現(xiàn)肌肉組織嚴重缺陷和運動功能下降[58]。dys1/ 肌源性轉(zhuǎn)錄因子雙突變秀麗隱桿線蟲模型攜帶抗營養(yǎng)不良蛋白基因和肌肉分化基因，表現(xiàn)出運動損傷和肌肉退化[59-60]，可作為肌少癥的理想模型。

肌小管蛋白相關(guān)磷酸酶3（myotubularin-related phosphatase 3，ceMTM3）基因敲除：研究[61]表明，秀麗隱桿線蟲ceMTM3敲除后，肌動蛋白纖維結(jié)構(gòu)會出現(xiàn)損傷導致肌纖維不穩(wěn)定，與野生組相比，ceMTM3基因敲除組線蟲體型更小。因此，ceMTM3基因敲除秀麗隱桿線蟲對于肌纖維的研究具有一定意義，但不能作為肌少癥的模型。

6.2 犬

自發(fā)選擇性剪接：有研究[61]表明，在威爾士柯基犬和拉布拉多尋回犬中，利用基因組編輯技術(shù)刪除插入的重復元件后，可以產(chǎn)生肌營養(yǎng)不良蛋白，但未評估模型是否可用于肌少癥建模。

基因工程：一些犬肌營養(yǎng)不良模型的外顯子2 和20之間存在突變，其中包括比格犬的內(nèi)含子6點突變[62]，威爾士科爾基犬內(nèi)含子13 重復元件插入[63]，拉布拉多獵犬肌營養(yǎng)不良犬內(nèi)含子19 重復元件插入[64]，以及邊境牧羊犬肌營養(yǎng)不良犬外顯子20 單個核苷酸缺失[65]，都可以導致犬肌營養(yǎng)不良，該模型可用于肌營養(yǎng)不良相關(guān)的肌少癥研究。

綜上所述，現(xiàn)有肌少癥模型方案包括衰老模型、廢用模型、化學誘導模型和基因工程模型等，每種方案各有利弊，需要結(jié)合實際情況加以選擇。肌少癥動物模型種類繁多，但很多研究者并沒有評估建模后的動物模型是否符合肌少癥的標準。未成功誘導的肌少癥模型很可能是錯誤的，甚至可能誤導后續(xù)研究，所以本研究總結(jié)了常用肌少癥動物模型的評估方法，以期為今后的研究提供參考。目前，尚無完整顯示人類肌少癥臨床及病理特征的動物模型，相信隨著醫(yī)學技術(shù)的發(fā)展，可以構(gòu)建更多適合肌少癥的動物模型。