骨髓細胞學與WBC、SF 聯合診斷再生障礙性貧血的效果

夏錦 謝豪杰 蘇孝楠

（1.開封市人民醫院檢驗科，河南 開封 475000；2.開封市人民醫院腎病風濕科，河南 開封 475000；3.開封市人民醫院骨科，河南 開封 475000）

再生障礙性貧血（Aplastic Anemia，AA）屬于一種骨髓造血功能衰竭性疾病，主要以全血細胞減少、骨髓造血功能障礙為典型特征。據劉文等學者[1]研究表明，低增生骨髓異常綜合征、骨髓纖維化、AA 等疾病具有相似的臨床表現，且均可導致全血細胞減少等情況發生。但各種疾病的發病機制及治療目標不同，因此，準確鑒別AA 對患者預后具有重要意義。

目前，骨髓細胞學檢查通過觀察骨髓細胞的病理學改變，特異性反映患者血液系統功能情況。以往多項實驗顯示，白細胞水平異常與腫瘤、感染、貧血等疾病的發生、發展息息相關[2]。而鐵蛋白（Serum Ferritin，SF）屬于鐵儲存蛋白，對改善人體免疫、造血功能產生積極影響，能直觀反映出體內鐵貯存情況。近年來，外周血常規和骨髓細胞學檢查對于AA 的診斷作用日益受到關注，且有部分學者對其展開研究[3]。而將白細胞計數（White Blood cell Count，WBC）與SF 檢測作為AA 的輔助性檢查手段，與骨髓細胞學檢查進行聯合應用仍存在諸多探討空間。

因此，本研究旨在分析骨髓細胞學與WBC、SF 聯合診斷AA 的應用效果。從而為提高臨床診斷效率提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究經醫院醫學倫理委員會審批通過。選取2017 年5 月-2022 年5 月本院收治的202 例AA 患者，納入觀察組。納入標準：符合美國血液學協會（2018 年）制定的關于AA 的診斷標準[4]；依從性好，配合研究者；病歷資料完整；排除標準：研究前接受抗貧血用藥物治療；合并感染性疾病者；存在惡性腫瘤的患者。

另選取同期體檢的198 例健康志愿者納入對照組。觀察組男性132 例，女性70 例；年齡：26～55 歲，平均年齡（38.67±4.57）歲；BMI：16.4～21.3 kg?m-2，平均（18.57±1.41）kg?m-2。對照組男性138 例，女性60 例；年齡：24～52 歲，平均年齡（37.57±5.12）歲。

1.2 方法

1.2.1 骨髓細胞學檢查

常規消毒處理，局部麻醉生效后，在患者髂前、后骨及胸骨處進行穿刺處理，將取出的骨髓制成骨髓涂片，隨后進行骨髓染色操作。染色材料使用20%的酸性亞鐵氰化鉀，等待30 min，隨后將涂片進行反復沖洗，顯微鏡下觀察。通過記錄細胞質中呈現出藍色鐵粒的細胞個數，計算該細胞所占百分比，分析細胞內鐵情況。細胞外鐵評級標準：存在大量藍色鐵粒為“++++”、較多藍色鐵粒為“+++”、部分藍色鐵粒為“++”、少量藍色鐵粒“+”、無藍色鐵粒“-”。

1.2.2 WBC 檢查

抽取患者空腹靜脈血2 mL，EDTA K2 抗凝血，采用全自動血液分析儀（日本希森美康公司，國械注進20172227279，型號：Sysmex XN2000）測定WBC 水平。

1.2.3 SF 檢測

抽取患者空腹靜脈血3 mL，進行離心處理（3000 r?min-1，15 min），使用全自動化學發光免疫分析儀（深圳市新產業生物醫學工程股份有限公司，粵械注準20172401486，型號：MAGLUMI 4000）檢測SF 水平。

1.2.4 陽性判定標準

根據WBC、SF、細胞內鐵的平均值作為臨界值，WBC＜5.21×109L-1為陽性，SF 水平＜65.64 μg?L-1為陽性，細胞內鐵＜ 28.14% 判定為陽性。

1.3 觀察指標

（1）比較兩組WBC、SF 及骨髓細胞鐵測定結果；（2）比較骨髓細胞學、WBC、SF 單獨及聯合運用的診斷結果。（3）分析骨髓細胞學、WBC、SF 聯合檢測的診斷價值。診斷準確率=（真陽性人數+真陰性人數）÷總人數×100%，特異度=（真陰性人數÷金標準陰性人數）×100%，靈敏度=（真陽性人數÷金標準陽性人數）×100%。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 WBC、SF 及骨髓細胞鐵測定結果

觀察組WBC、SF 水平分別為3.37±1.49（×109L-1）、25.15±6.34（μg?L-1），對照組WBC、SF 水平分別為7.14±1.76（×109L-1）、107.43±28.61（μg?L-1）。觀察組WBC、SF 水平及細胞內鐵含量明顯低于對照組，而細胞外鐵明顯高于對照組（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組WBC、SF 水平及骨髓細胞鐵測定結果比較[（)，n(%)]

表1 兩組WBC、SF 水平及骨髓細胞鐵測定結果比較[（)，n(%)]

注：與對照組比較，aP＜0.05。

2.2 骨髓細胞學、WBC、SF 單獨及聯合運用的診斷結果

202 例AA 患者進行WBC、SF、細胞內鐵單獨檢查后，結果分別為179 例陽性患者、23 例陰性患者；182 陽性患者、20 例陰性患者；181 例陽性患者、21 例陰性患者。198 例健康志愿者進行WBC、SF、細胞內鐵單獨檢查后，結果分別為23例陽性患者、175 例陰性患者；26 例陽性患者、172 例陰性患者；22 例陽性患者、176 例陰性患者。202 例AA 患者均進行WBC、SF、細胞內鐵聯合檢查后，結果顯示有193 例陽性患者、9 例陰性患者，198 例健康志愿者進行WBC、SF、細胞內鐵聯合檢查后，結果顯示有11 例陽性患者、187 例陰性患者，見表2。

表2 三者單獨及聯合運用的診斷結果（例）

2.3 診斷價值

WBC 單獨檢測后診斷準確率為 88.50%（354/400），特異度為88.38%（175/198），靈敏度為88.61%（179/202）。SF 單獨檢測后診斷準確率為88.50%（354/400），特異度為86.87%（172/198），靈敏度為90.10%（182/202）。細胞內鐵單獨檢測后診斷準確率為89.25%（357/400），特異度為88.89%（176/198），靈敏度為89.60%（181/202）。三者聯合檢測后診斷準確率為95.00%（380/400），特異度為94.44%（187/198），靈敏度為95.54%（193/202）。三者聯合檢測的診斷準確率、特異度、靈敏度均高于三者單獨檢測（P＜0.05）。

3 討論

研究表明，AA 的發病機制主要包括骨髓微環境紊亂及造血干細胞缺乏等，而立新等[5]研究提出，遺傳、免疫功能異常等因素也與AA 的發病息息相關。

目前，免疫抑制、粒細胞輸注及促造血治療作為臨床用于治療AA 的主要手段，其對于早期AA 患者的治療效果較為理想，但難以滿足重型AA 患者的治療需求[6]。因此，探究AA 發病的最新生物學機制及相關生理生化指標，為AA 的臨床診療打開新思路。

本研究結果顯示，AA 患者的WBC 低于健康人群，表明WBC 的明顯降低與AA 的發生存在一定聯系。這可能與AA 患者體內WBC、造血干細胞的大量凋亡有關。Chao 等[7]的研究證實，AA患者的骨髓間充質細胞、中性粒細胞的細胞分裂間期停滯為G1 期，易出現WBC 明顯下降的情況，與本研究結果一致。同時，Melguizo 等學者[8]發現，骨髓組細胞的端粒長度明顯下降，且分化能力存在一定缺陷。而本次研究通過骨髓細胞鐵測定發現，觀察組SF 水平及細胞內鐵含量明顯低于對照組，而細胞外鐵明顯高于對照組，與蘇永娟等學者[9]研究結果一致。推測原因在于血清SF作為鐵元素的主要貯存方式，而鐵元素是氧氣運輸的主要載體，當血清SF 明顯下降時易導致血液系統功能紊亂，造成貧血。同時，細胞內鐵多數存在于紅細胞中，細胞外鐵分布于骨髓小粒中，細胞內、外鐵水平異常狀態提示貧血的發生，但具體分子機制仍需進一步討論。

本研究在骨髓細胞學、WBC、SF 聯合檢測的診斷價值分析中發現，三者聯合檢測的診斷準確率、特異度、靈敏度均高于三者單獨檢測，提示將三者聯合運用于AA 的診斷中，具有更高的應用價值。而余祖輝等學者[10]的研究表明，骨髓細胞學、WBC、SF 聯合診斷的符合率為93.41%、特異度與靈敏度分別為92.31%、93.41%，與本次研究結果基本相符。推測原因在于，單獨運用WBC 檢測在感染性、過敏性疾病與AA 的鑒別中缺乏特異性診斷。單一使用細胞內鐵測定、血清SF 檢查，難以區分AA 與其他類型貧血疾病，而三者聯合檢測在降低誤診率的同時，有效提高診斷的特異度和靈敏度，在一定程度上彌補單獨檢測的不足。

綜上所述，骨髓細胞學、WBC、SF 聯合檢測在AA 的診斷中具有較高的應用價值，能顯著提高診斷準確率，為臨床診療提供可靠依據。