利用色差計使用標準色差值法測定藥用輔料甘油的顏色

劉海濤,侯金鳳,寇晉萍,劉琦,齊麟

（北京市藥品檢驗研究院 國家藥品監督管理局仿制藥研究與評價重點實驗室中藥成分分析與生物評價北京市重點實驗室,北京 102206）

藥用輔料（excipient）是指制劑中除藥物外一切物質的總稱，亦稱賦形劑（adjuvant）。性質優良的藥用輔料可以給患者帶來高效安全的藥品[1]。輔料雖然是非治療活性物質，但對藥物作用的出現、強度、速度和時間都有作用，直接影響藥品的療效[2]。

甘油作為一種非常常見的添加劑，在工業和日常生活中應用廣泛。食品級和藥用輔料級甘油除含有丙三醇外，還有酯類、葡萄糖等還原糖，屬于多元醇類甘油。除具有保濕、保潤功能外，還具有高活性、抗氧化、促醇化等特殊功效，臨床還可用作潤滑性瀉藥，作為藥用輔料時通常作為甜味劑、保濕劑和粘合劑使用。甘油可與任意比例水混合，常作為皮膚科制劑的保濕劑。甘油對某些藥物的刺激性有緩和作用，如口腔科的2%碘甘油，其中的甘油能減輕碘對口腔黏膜的刺激[3]。

藥品溶液的顏色與藥品本身的性質、純度、雜質的含量有著密切的關系[4]，藥品溶液顏色的檢查是藥品內在質量的外部監測，具有簡易、直觀、切實有效等優點[5]。為了使檢查結果相對準確且易于表述，長久以來，各國藥典檢查藥品溶液顏色時都使用了標準比色液，在檢查時將藥品溶液與標準比色液在一定的條件下進行比較，以此來降低一些主客觀因素的誤差，同時檢查結果也用相當于標準比色液何種色調、何種色號來表述[6-7]。目前藥品溶液顏色檢查大多采用目視法，即將供試品溶液與相應的標準比色液進行同條件下的目視比較[4]。目視法是一種經典的顏色檢查方法[8]，其以直觀、簡捷的特性一直為各國藥典藥品溶液顏色檢查的首選方法且仍將被繼續廣泛使用[9]。但因其僅能對顏色進行主觀粗略的描述，不能進行精確量化的測定和變化趨勢的細致研究，一旦遇到色調與標準比色液不匹配，或顏色深度達到限度邊緣時，目視檢查難以避免主觀因素的影響。因此，使用儀器對顏色進行測定就顯得非常必要。

藥品溶液的顏色千差萬別，可標準比色液的數目卻是有限的[10]。中國藥典2020年版要求檢查溶液顏色的樣品中，有21個使用非標準比色液的品種，這些非標準比色液配制較為繁瑣，且沒有相應的標定方法。甘油就是其中的一種[11]。因此，筆者使用色差計對方法進行了修訂，把測得非標準比色液的色差值作為標準色差值，供試品的色差值與該標準色差值進行比較，即可準確得到供試品顏色的結果，具體內容如下。

1 儀器與試藥

SY-1藥物溶液顏色測定儀（天大天發科技有限公司提供，共三臺）；Xrite color i5紫外分光光度計；重鉻酸鉀為分析純，水為超純水。

經檢索國家局網站，向目前有批準文號的生產企業發出了樣品征集函，收到的樣品信息詳見表1。

表1 品種收集樣品信息

2 方法與結果

2.1 非標準比色液色差值測定 中國藥典2020年版甘油各論項下，顏色檢查項規定為“取本品50ml，置50ml納氏比色管中，與對照液（取比色用重鉻酸鉀液0.2ml，加水稀釋至50ml制成）比較，不得更深”。參考《中國藥典》2020年版四部通則“0902溶液顏色檢查法”配制比色用重鉻酸鉀液，按照甘油各論項下的顏色檢查項配制非標準比色液，按照《中國藥典》2020年版四部通則“0902溶液顏色檢查法”中第三法（色差計法），使用四臺儀器對所配制的非標準比色液進行測定：以水為空白，測定非標準比色液與水的色差值ΔE*，每臺儀器重復測定三次，計算四臺儀器測定結果的平均值，結果見表2。

表2 非標準比色液測定結果表

2.2 樣品色差值測定 參考藥典甘油各論項下溶液的顏色檢查項，制備供試品溶液，按照通則方法，使用四臺儀器對所配制的溶液進行測定：以水為空白，測定各溶液與水的色差值ΔE*，結果見表3。

表3 甘油色差值測定結果

2.3 測定法修訂 根據測定結果，對甘油各論項下顏色檢查項進行修訂，具體內容為顏色：取本品，照《中國藥典》2020年版四部通則“0902 溶液顏色檢查法”第三法（色差計法）測定，溶液與水的色差值ΔE*不得過0.66。

3 討論

3.1 本研究中筆者共使用了兩個不同品牌不同型號的儀器共四臺，基本上涵蓋了目前市面上主流的生產企業和儀器型號，儀器代表性較好。

3.2 使用目視法同時測定上述樣品，供試品溶液顏色均淺于相應的對照液顏色，色差計測定結果表明供試品溶液與水的色差值均小于對照液與水的色差值，與目視法結果一致，多種樣品測定結果表明，擬定方法可行。

3.3 目視法檢查溶液的顏色有著不可克服的先天缺陷：①靈敏度低和精密度差，表現在測定和表達兩個方面。在藥品的質量標準中，溶液的顏色檢查項是對藥品內在質量的間接檢測，其檢測結果和限度規定應與藥品內在質量相結合，但目視法的粗略會使結合的緊密性、科學性受到限制。②主客觀影響因素多：如視覺差異、照明條件乃至心理因素等，使得檢查結果重現性差。③偏色調樣品和合格邊緣樣品難于判斷。即便是相同品種的藥品，有時也會因為各生產廠家工藝的不同、雜質種類不同等原因引起色調的不同，常常出現藥品的色調介于兩種標準比色液之間，甚至不在6種標準比色液色調范圍，使得目視無法判斷，也沒有量化的客觀指標。限度邊緣樣品也存在同樣問題，合格與否完全憑借經驗主觀判定，極易引起檢驗結果的差異或糾紛。利用本實驗建立的方法能夠很好地克服目視法的上述缺陷，較為精密準確地測定甘油的溶液顏色，為更好地研究與控制藥品質量提供了數據支持。因此，可在需要精細研究和精準判斷方面取代目視法在實際中的應用。

3.4 色差計法對顏色可以進行精確、數字化的測定和表述，結果更為客觀準確。但是現行方法每次試驗需同時測定非標準比色液和供試品液計算色差值，眾所周知，配制非標準比色液首先需要配制標準比色液，而標準比色液的配制極為繁瑣，且不能長期儲存來使用，目前目視比色基本上都是使用市售的標準比色液，密封安瓿包裝，如果開瓶用于上機測定，成本較高。因此，修訂過的方法只需測定供試品溶液與水的色差值，再與非標準比色液固化色差值來比較進行判斷，則大大節約了成本，簡化了實驗步驟，并且避免了配制比色液帶來的誤差。

3.5 與發達國家相比，我國的制藥工業無論是規模還是藥品研發能力均存在較大差距，特別是藥用輔料的生產管理一直處于較低水平。這不僅影響制藥工業的發展，同時也直接影響藥品的質量，因此，藥用輔料質量標準的提高刻不容緩。

3.6 展望 中國藥典2020年版要求檢查溶液顏色的樣品中有21個使用非標準比色液的品種，這些非標準比色液的配制同樣也非常繁瑣，因此，我們會進一步對這些品種進行考察，修訂為與固化的非標準比色液色差值比較的方法。