響應(yīng)面法優(yōu)化破壁靈芝孢子粉中甘油三油酸酯提取工藝

＊武悅 李若綺 徐勤科 郭朝暉 孫鶯*

（1.甘肅省藥品檢驗(yàn)研究院 甘肅 730070 2.國家藥監(jiān)局中藥材及飲片質(zhì)量控制研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 甘肅 730000）

靈芝孢子粉具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力、降血脂、降血糖、抗氧化、抗炎癥、抑制腫瘤、調(diào)節(jié)胃腸道菌群、緩解體力疲勞、保肝護(hù)肝、改善睡眠[1-5]等藥理作用，近幾年還有報(bào)道證實(shí)靈芝孢子粉對(duì)阿爾茲海默癥有一定預(yù)防作用[6]。近年來，學(xué)者發(fā)現(xiàn)靈芝孢子粉中脂溶性物質(zhì)含量較高，可達(dá)30%左右[7]，且這些脂溶性物質(zhì)具有一定的生物活性，其中甘油三酯類被認(rèn)為具有有效的抗腫瘤作用[8]，因此建立甘油三酯類物質(zhì)含量的測定方法于破壁靈芝孢子粉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定非常重要。本試驗(yàn)采用超聲波法提取甘油酸油酸酯，建立了高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測器法測定破壁靈芝孢子粉中甘油三油酸酯的含量，為破壁靈芝孢子粉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供參考依據(jù)。

1.材料與方法

(1)材料與試劑

破壁靈芝孢子粉樣品由青海及祥藥業(yè)有限公司提供；甘油三油酸酯對(duì)照品由中國食品藥品檢定研究院提供（供含量測定用，含量為：99.6%，批號(hào)：111692-202007）；二氯甲烷（色譜純）國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；乙腈（色譜純）德國默克公司。

(2)儀器與設(shè)備

Agilent 1260系列液相色譜儀，美國安捷倫公司；Alltech ELSD-6000型蒸發(fā)光散射檢測器，美國Alltech科技有限公司；梅特勒XS205DU電子天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；SBL-30DT(N)型超聲波恒溫清洗機(jī)，寧波新芝生物科技股份有限公司。

(3)儀器工作條件

①色譜條件

色譜柱：SHISEIDO CAPCELLPAK C18（250mm×4.6mm，5μm）；柱溫：30℃；流速：1.0mL/min；……