一例牛布魯氏菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷與防治建議

李維蓬，王正榮，張艷艷，孫艷，薄新文*

（1.石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，新疆 石河子 832000；2.省部共建綿羊遺傳改良與健康養(yǎng)殖國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/新疆農(nóng)墾科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所）

布魯氏菌病是由布魯氏桿菌引起的一種可以感染牛、羊和人類的一種傳染病。從畜間的疾病傳播來(lái)講，屬于二類動(dòng)物疫病。近年來(lái)，新疆部分地區(qū)實(shí)行新政策，通過(guò)建設(shè)規(guī)?；叙B(yǎng)殖小區(qū)將牛羊養(yǎng)殖由散養(yǎng)轉(zhuǎn)為集中養(yǎng)殖，從而改善了當(dāng)?shù)鼗靵y養(yǎng)殖帶來(lái)的部分環(huán)境問(wèn)題以及管理問(wèn)題，但由于牲畜流通交易頻繁，加之養(yǎng)殖戶對(duì)于布魯氏菌病的認(rèn)識(shí)不到位，導(dǎo)致一些地區(qū)人畜布魯氏菌病感染數(shù)量急劇上升，對(duì)畜牧業(yè)的安全生產(chǎn)產(chǎn)生了一定的影響，對(duì)公共衛(wèi)生安全造成了一定的挑戰(zhàn)[1]。在牛羊養(yǎng)殖生產(chǎn)中，各養(yǎng)殖戶之間布魯氏菌病疫情多由生產(chǎn)環(huán)節(jié)當(dāng)中的不正當(dāng)操作，接觸帶病畜引發(fā)；畜間布魯氏菌病疫情的發(fā)生，多數(shù)是由于未能嚴(yán)格按照防疫規(guī)定，在交易環(huán)節(jié)未對(duì)牲畜進(jìn)行有效的布魯氏菌病檢測(cè)，購(gòu)入后不分圈觀察，直接混養(yǎng)導(dǎo)致[2]。本文通過(guò)一起由養(yǎng)殖戶報(bào)告的疑似牛布魯氏菌病案例及檢測(cè)過(guò)程，淺析布魯氏菌病防控措施和建議，為基層工作人員能夠更好的確立布魯氏菌病處理辦法，以及相關(guān)人員開(kāi)展布魯氏菌病防控提供參考[3]。

1 病例情況介紹

2022年6月9日，伊犁某養(yǎng)殖小區(qū)內(nèi)一新建牛養(yǎng)殖場(chǎng)的母牛出現(xiàn)流產(chǎn)現(xiàn)象，駐場(chǎng)獸醫(yī)檢查后未找出具體原因，隨后場(chǎng)主向其管轄區(qū)獸醫(yī)站進(jìn)行了反映，管轄區(qū)獸醫(yī)站根據(jù)伊犁地區(qū)牛布魯氏菌病流行情況及相關(guān)防治辦法，指派駐場(chǎng)獸醫(yī)對(duì)該可疑流產(chǎn)牛進(jìn)行了隔離。6月20日?qǐng)鲋髀?lián)系新疆農(nóng)墾科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所對(duì)該場(chǎng)進(jìn)行技術(shù)援助和指導(dǎo)。6月21日，新疆農(nóng)墾科學(xué)院技術(shù)援助人員對(duì)該場(chǎng)共22只成年母牛編號(hào)后進(jìn)行了采血與保存，計(jì)劃回實(shí)驗(yàn)室后采用虎紅平板凝集試驗(yàn)進(jìn)行布魯氏菌病的初步篩查。

2 病因調(diào)查

2.1 牛場(chǎng)情況

該牛場(chǎng)現(xiàn)有存欄牛62頭，品種為安格斯牛、荷斯坦牛和黃牛，飼養(yǎng)方式為圈養(yǎng)加放牧，場(chǎng)主過(guò)去未飼養(yǎng)過(guò)牛，于2021年9月開(kāi)始養(yǎng)牛。牛的來(lái)源多為從本地其他養(yǎng)殖戶手中購(gòu)入，由于場(chǎng)主缺乏相關(guān)防疫知識(shí)，購(gòu)入牛時(shí)未能索要布魯氏菌病檢測(cè)證明或疫苗接種證明。

2.2 疫苗使用情況

據(jù)場(chǎng)主陳述，2021年9月從當(dāng)?shù)赝I(yè)牛場(chǎng)一次性收購(gòu)了30多只牛，購(gòu)入時(shí)不清楚疫苗使用情況。而后又在當(dāng)?shù)囟啻钨?gòu)買繁育牛，至今場(chǎng)內(nèi)包括自繁育的小牛共62只，其中自繁育牛未接種過(guò)布魯氏菌病相關(guān)疫苗。

2.3 臨床癥狀

經(jīng)現(xiàn)場(chǎng)查看，所有牛外觀正常，膘情良好，體格健壯，圈內(nèi)公母?；祓B(yǎng)，自行趴跨。據(jù)場(chǎng)主反映，個(gè)別牛有屢配不孕的情況。

由于布魯氏菌病對(duì)人有一定感染力，且流產(chǎn)牛沒(méi)有其他臨床癥狀，不建議進(jìn)行解剖檢查。

3 實(shí)驗(yàn)室診斷

6月24日，實(shí)驗(yàn)室對(duì)采集的22份成年母牛血清樣本進(jìn)行虎紅平板凝集試驗(yàn)，將30 μL血清與30 μL虎紅平板凝集試驗(yàn)抗原均勻混合靜置觀察，其中0862#樣本為陽(yáng)性（+++）。6月28日，對(duì)陽(yáng)性血清樣本進(jìn)行試管凝集試驗(yàn)，1∶100倍稀釋呈陽(yáng)性，與比濁管4號(hào)（125 μL生理鹽水+375 μL等倍稀釋抗原混勻）清亮程度相同，根據(jù)2018版布魯氏菌病實(shí)驗(yàn)室診斷規(guī)定，競(jìng)爭(zhēng)ELISA試驗(yàn)（cELISA）或試管凝集試驗(yàn)可作為最終定性。

4 結(jié)果分析

0862#母牛為2021年9月在當(dāng)?shù)刭?gòu)入，購(gòu)入時(shí)不清楚是否接種疫苗，賣方也未出示布魯氏菌病檢測(cè)證明，購(gòu)入后至今未接種布魯氏菌病相關(guān)疫苗，截至2022年6月已飼養(yǎng)9個(gè)月，布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗(yàn)以及后續(xù)的試管凝集定性均為陽(yáng)性。根據(jù)《布魯氏菌病防治技術(shù)規(guī)范》相關(guān)規(guī)定，對(duì)成年動(dòng)物監(jiān)測(cè)時(shí)，豬、羊在5月齡以上，牛在8月齡以上，懷孕動(dòng)物則在第1胎產(chǎn)后半個(gè)月至1個(gè)月間進(jìn)行；對(duì)布魯氏菌疫苗S2株、M5株、S19株免疫接種過(guò)的動(dòng)物，在接種后18個(gè)月（豬接種后6個(gè)月）進(jìn)行[4]。依據(jù)“虎紅平板凝集試驗(yàn)陽(yáng)性與試管凝集試驗(yàn)陽(yáng)性”，判定0862#牛為布魯氏菌病陽(yáng)性確診。

5 處理與消毒

目前尚無(wú)針對(duì)牛布魯氏菌病的特效藥物，無(wú)法有效救治病牛，建議將布魯氏菌病陽(yáng)性牛撲殺并進(jìn)行無(wú)害化處理。隨后要求該養(yǎng)殖場(chǎng)將場(chǎng)內(nèi)健康牛和疑似牛分圈管理，并禁止場(chǎng)內(nèi)牛流出[5]。

提醒養(yǎng)殖戶按照布魯氏菌病消毒規(guī)范將所有圈舍做到全面消毒。首先是徹底將圈內(nèi)地板、墻面和水槽料槽等清理干凈。其次要在圈舍地面鋪設(shè)好一定厚度的干燥秸稈或稻草，進(jìn)行焚燒，用高溫滅菌，焚燒時(shí)務(wù)必有人在旁照看，防止失火，待火燃盡后清理殘余灰燼。同時(shí)用消毒液對(duì)墻體、飼槽、水槽、地面等徹底噴灑，使消毒液自行下流，連續(xù)3日，每天1次。而且要用潔凈的水清洗飼喂槽，隨后牛分圈舍飼養(yǎng)。清掃消毒人員務(wù)必要做好個(gè)人防護(hù)，佩戴醫(yī)用防護(hù)口罩、乳膠手套、鞋套等防護(hù)用具，保證接觸牛時(shí)無(wú)外傷。如果條件允許，亦可將原牛舍進(jìn)行銷毀和滅菌處理，在養(yǎng)殖場(chǎng)地重新修建圈舍，且在今后每年都需開(kāi)展有關(guān)疫病的檢測(cè)[6]。如果在飼料、牛糞、飼料槽等處檢測(cè)出布魯氏菌，則應(yīng)將上述物品集中運(yùn)至養(yǎng)殖基地外進(jìn)行焚燒處理，避免病菌蔓延（切記不可深埋，因?yàn)椴剪斒暇幸欢◣茁蕰?huì)隨地下水滲透至水源地，造成更大范圍的傳播）。

6 體會(huì)和建議

布魯氏菌病是當(dāng)前牧區(qū)常見(jiàn)又難以處理的一種人畜共患疾病。目前，基層地區(qū)在牛布魯氏菌病防控工作中雖然可以檢測(cè)出病畜，但要做好正確的處理是十分困難的，雖然無(wú)害化處理后養(yǎng)殖戶會(huì)得到一定的補(bǔ)貼，但終因不及一頭牛的價(jià)值，有的養(yǎng)殖場(chǎng)戶為了減少損失，會(huì)偷偷將一些檢測(cè)出布魯氏菌病的牛低價(jià)售出，這些病牛進(jìn)入市場(chǎng)后，將嚴(yán)重威脅到其他牛群以及消費(fèi)者的健康。消滅布魯氏菌病是一件利在千秋的大工程，需要職能部門和養(yǎng)殖戶共同的努力與犧牲，由于一些養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)于牛布魯氏菌病的關(guān)注不到位，輕視牛布魯氏菌病防治工作。因此，加強(qiáng)布魯氏菌病牛無(wú)害化處理，普及牛布魯氏菌病相關(guān)防治知識(shí)是十分重要的。在當(dāng)下，還應(yīng)該充分運(yùn)用新媒體，做好疫病防疫宣傳，幫助更多的養(yǎng)殖人員掌握相關(guān)防治方法。在基層需要做好宣傳資料的分發(fā)，利用村鎮(zhèn)廣播、電視、講座等方式進(jìn)行防疫知識(shí)科普，制作防疫手冊(cè)，使用戶在生產(chǎn)過(guò)程中更好地運(yùn)用[7]。

在牛的養(yǎng)殖中，若想避免布魯氏菌病在牛群中傳播，應(yīng)依照自繁自養(yǎng)的原則，避免疫病從外界種群傳入場(chǎng)內(nèi)種群，培育健康無(wú)病的牛群。若場(chǎng)內(nèi)必須引種，則要提前做好調(diào)查工作，不可以從疫區(qū)引種，嚴(yán)禁在疫病高發(fā)期進(jìn)行跨區(qū)引種。而且要向引種的養(yǎng)殖場(chǎng)索要疫苗接種證明，以為今后的疫苗接種計(jì)劃保留資料，保證引進(jìn)后的疫苗接種工作[8]。引種后的牛應(yīng)隔離飼養(yǎng)30～60 d，在這期間觀察其身體狀況，確保沒(méi)有任何異常的情況下方可入群。