8種殺菌劑對甘薯匍枝根霉的室內毒力及貯藏期藥效評價

潘家荃　周樺楠　于濤

摘要：甘薯軟腐病是貯藏期的一種重要真菌病害，發生普遍，為害嚴重，匍枝根霉為軟腐病的主要致病菌。為測定不同藥劑對匍枝根霉的毒力水平，明確藥劑對甘薯軟腐病的防治效果，對實際生產提供有效指導，采用平皿分析法測定8種殺菌劑對匍枝根霉的毒力并進行了貯藏期藥效試驗。毒力測定結果表明，8種殺菌劑EC50由低到高分別為：50%咯菌腈、10%苯醚甲環唑、50%異菌脲、32.5%苯甲嘧菌酯、12.5%腈菌唑、80%烯酰嗎啉、50%咪鮮胺錳鹽、25%溴菌·多菌靈，EC50分別為0.142 2、7.513 3、8.478 6、11.310 4、16.359 5、62.633 1、78.668 4、91.160 5 μg/mL。其中50%咯菌腈EC50值顯著低于其他7種藥劑，毒力最強，抑制效果最好。貯藏期藥效試驗結果表明，貯藏45 d時，50%咯菌腈處理薯塊發病率最低，為3.33%，防效最高，為90.63%，顯著高于其他各處理，10%苯醚甲環唑、50%異菌脲、32.5%苯甲·嘧菌酯和12.5%腈菌唑處理防效均在60%～80%間；貯藏90 d時，50%咯菌腈處理薯塊發病率仍最低，為5.56%，防效仍最高，為86.49%，顯著高于其他各處理。10%苯醚甲環唑、50%異菌脲、32.5%苯甲·嘧菌酯和12.5%腈菌唑處理防效均在60%～75%間。在甘薯軟腐病的防治中，生產上可推廣使用50%咯菌腈可濕性粉劑對貯藏期甘薯軟腐病進行防治。

關鍵詞：殺菌劑；匍枝根霉；毒力測定；甘薯軟腐病；貯藏期藥效

中圖分類號：S435.313+.9文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2023）14-0141-05

甘薯是世界排名第7的糧食作物［1］，具有極高的營養價值和保健價值［2-6］。中國是世界第一大甘薯生產國，種植面積和總產均居于世界首位［7-8］。近年來，許多地區已將甘薯列為特色作物和優勢扶貧作物，經濟效益顯著增加。目前，全國甘薯的種植面積穩定在400萬hm2左右［9］。甘薯塊根對低溫敏感且含水量高、組織脆嫩，從收獲到貯藏極易受到損傷，生理機能減弱，提高了病原菌的侵染概率。甘薯軟腐病作為貯藏期的主要真菌病害之一，在我國各大薯區均有發生，破壞力極強。軟腐病主要致病菌為匍枝根霉（Rhizopus stolonifera）［10］，該病原菌廣泛存在于空氣中，可附著于薯塊和貯藏窖內越冬，菌絲體產生的孢子可從薯塊傷口進行侵染，利用傷口的營養物質進行繁殖，產生的果膠酶、淀粉酶、纖維素分解酶，破壞細胞壁［11］，導致發病組織變軟，顯著影響薯塊品質，發病后蔓延迅速，易造成成片性大面積腐爛，造成巨大的經濟損失。目前，甘薯軟腐病研究僅對部分傳統殺菌劑的室內抑菌率和毒性進行了測定，對于毒力測定結合貯藏期藥效試驗的研究尚較少，且對于甘薯軟腐病的化學藥劑防治尚未明確［12-14］，實際生產上多采用傳統化學藥劑多菌靈和甲基硫菌靈等進行防控，長期使用容易導致病原菌產生抗藥性進而降低防控效果。因此，為了更好地防控甘薯軟腐病，篩選出更多低毒高效的新藥劑，進行交替使用，降低產生抗藥性的風險勢在必行。本研究采用室內毒力測定試驗與貯藏期藥效防治試驗相結合的方法篩選出對甘薯軟腐病防治效果良好的低毒高效型殺菌劑，以期為實際生產中病害的科學防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

具有較強致病性的匍枝根霉菌株LN-2由遼寧省農業科學院作物研究所薯類研究室于2021年3月上旬從煙薯25發病薯塊分離純化獲得，于實驗室4 ℃冰箱中保存備用。

1.2 供試培養基

采用馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養基對匍枝根霉菌株進行保存、活化和接種。

1.3 供試藥劑

選取8種化學藥劑，分別為苯醚甲環唑、咪鮮胺錳鹽、異菌脲、咯菌腈、苯甲·嘧菌酯、烯酰嗎啉、腈菌唑和溴菌·多菌靈，供試藥劑信息見表1。

1.4 供試甘薯品種及貯藏設施

供試甘薯品種為煙薯25，試驗于2021年9月下旬至12月下旬在遼寧省農業科學院甘薯恒溫氣調貯藏窖展開，貯藏溫度為12 ℃，濕度為（85±5）%。

1.5 室內毒力測定

試驗于2021年3月中旬在遼寧省農業科學院作物研究所實驗室展開，將表1中8種藥劑用無菌水配制成表2中相對應的5個濃度梯度，將其與PDA培養基按體積比例1 ∶9進行混合，倒入培養皿中制成不同濃度的含藥平板，空白對照用無菌水進行處理。在活化好的LN-2菌株旁，利用滅菌的打孔器打出直徑為5 mm的菌碟，用滅菌過的接種針將菌碟移動到相應的含藥平板內，菌絲面朝下接種于平板正中央，每個濃度重復3次。26 ℃恒溫條件下培養3 d。采用十字交叉法垂直測量菌落直徑，取平均值，計算抑菌率。

抑菌率=（對照菌落直徑－處理菌落直徑）/（對照菌落直徑-菌餅直徑）×100%。

1.6 貯藏期藥效試驗

將表1中的8種殺菌劑于薯塊收獲后噴施于薯皮表面，以表面噴無菌水作為空白對照，每個處理重復3次，每次重復挑選表皮光滑無損傷，單薯質量約200 g的薯塊30個。晾干后將薯塊放于50×35×30 cm紙盒箱中，紙箱四周各面中間開設3個 2 cm×2 cm的透氣孔，于入窖后45、90 d后調查各重復全部薯塊的軟腐病發病情況，根據公式計算各處理發病率和防效，采用DPS軟件對防效進行差異顯著性分析。

調查各重復全部薯塊的發病率，薯塊變軟，呈水漬狀，發黏即算病薯［15］。

發病率=發病薯塊數/調查薯塊數×100%；

防治效果=（對照發病率-藥劑處理發病率）/對照發病率×100%。

1.7 數據處理

采用SPSS軟件，以濃度對數值為x，抑菌率為y，計算不同藥劑的回歸方程和有效抑制中濃度（EC50）。采用DPS軟件對各處理儲藏期防效進行差異顯著性分析。

2 結果與分析

2.1 不同殺菌劑對匍枝根霉菌絲的抑制作用

由表3可以看出，培養3 d后，對照的菌落直徑為8.97 cm，各藥劑處理的菌落直徑均在0.95～8.25 cm間，因此， 不同藥劑處理均對菌絲具有一定抑制作用。各藥劑處理隨著藥劑濃度的升高，對匍枝根霉的抑制率也呈上升趨勢。其中50%咯菌腈抑菌效果最佳，除最低處理濃度外，抑菌率范圍為70%～90%。10%苯醚甲環唑濃度為100、50 μg/mL 時抑菌率分別為94.69%和84.06%；50%異菌脲濃度為24 μg/mL時，抑菌率為77.17%；32.5%苯甲·嘧菌酯濃度為100 μg/mL時抑菌率為87.01%；12.5%腈菌唑濃度為100 μg/mL時抑菌率為78.35%。50咪鮮胺錳鹽、80%烯酰嗎啉和25%溴菌·多菌靈各濃度抑菌率均低于70%。由此可見，50%咯菌腈抑菌效果最好，10%苯醚甲環唑、50%異菌脲、32.5%苯甲·嘧菌酯、12.5%腈菌唑抑菌效果次之，50%咪鮮胺錳鹽、80%烯酰嗎啉、25%溴菌·多菌靈抑菌效果最差。

2.2 室內毒力測定結果

EC50用來表示藥劑毒力的大小，其值越小，毒力越大。由表4數據可以看出，8種殺菌劑EC50由低到高分別為：50%咯菌腈、10%苯醚甲環唑、50%異菌脲、32.5%苯甲嘧菌酯、12.5%腈菌唑、80%烯酰嗎啉、50%咪鮮胺錳鹽、25%溴菌·多菌靈，EC50分別為0.142 2、7.513 3、8.478 6、11.310 4、16.359 5、62.633 1、78.668 4、91.160 5 μg/mL。其中50%咯菌腈EC50值顯著低于其他7種藥劑，說明其對軟腐病病原菌菌絲抑制作用最佳，室內毒力最強。10%苯醚甲環唑、50%異菌脲、32.5%苯甲嘧菌酯和12.5%腈菌唑EC50值均小于20 μg/mL，說明其對病原菌菌絲也具有良好的抑制效果，但毒力低于50%咯菌腈。50%咪鮮胺錳鹽、80%烯酰嗎啉、25%溴菌·多菌靈3種藥劑EC50值均高于60 μg/mL，說明其對病原菌菌絲抑制效果不佳，毒力較弱。

2.3 儲藏期藥效試驗結果

由表5可見，儲藏45、90 d后，處理發病率均低于空白對照發病率，說明各藥劑對貯藏期甘薯軟腐病均有一定防治效果，但不同藥劑間防治效果存在差異。貯藏45 d時，50%咯菌腈處理薯塊發病率最低，為3.33%，防效最高，為90.63%，顯著高于其他各處理。10%苯醚甲環唑、50%異菌脲、32.5%苯甲·嘧菌酯和12.5%腈菌唑處理防效均在60%～80%間，雖然略低于咯菌腈處理，但對儲藏期甘薯軟腐病仍具有一定防治效果。50%咪鮮胺錳鹽、80%烯酰嗎啉和25%溴菌·多菌靈處理，防治效果不佳，防效均低于40%，且與其他各處理差異顯著。貯藏90 d時，各處理及空白對照薯塊發病率均比儲藏45 d時有所上升，表明儲藏時間的延長與甘薯軟腐病的發病率呈正相關。其中50%咯菌腈處理薯塊發病率仍最低，為5.56%，防效仍最高，為86.49%，顯著高于其他各處理。10%苯醚甲環唑、50%異菌脲、32.5%苯甲·嘧菌酯和12.5%腈菌唑處理防效均在60%～75%間，雖然略低于咯菌腈處理，但對儲藏期甘薯軟腐病仍具有一定防治效果。50%咪鮮胺錳鹽、80%烯酰嗎啉和25%溴菌·多菌靈處理，防治效果不佳，防效均低于45%，其中25%溴菌·多菌靈處理發病率最高，為31.11%，防效最低，僅為24.32%，與其他各處理具有顯著性差異。

3 結論與討論

軟腐病作為甘薯貯藏期破壞力極強的真菌性病害之一，近年來在全國各大薯區廣泛發生，造成嚴重經濟損失。為了指導生產實踐中甘薯軟腐病的防治，本研究通過室內毒力測定試驗篩選出對甘薯軟腐病主要致病菌匍枝根霉毒力大、抑菌活性強的藥劑。但由于作用方式、吸收傳導活性、持效期等因素均可影響藥劑的貯藏期藥效，所以，除室內毒力測定外，還需要通過貯藏期藥效試驗進行驗證，最后得到對甘薯軟腐病有較好防效的藥劑［16］。

對于甘薯軟腐病的防治，抗病品種的選育和推廣是有效控制該病的根本手段，但目前還沒有有完全抵抗軟腐病的甘薯品種［17］。因此，生產上常用的防治方法仍為化學藥劑防治輔以栽培措施管理。

在本研究中，對比室內毒力測定和貯藏期藥效試驗的結果發現，8種不同藥劑對甘薯軟腐病主要致病菌匍枝根霉毒力差異較大，對貯藏期甘薯軟腐病的防治效果也有明顯差異。室內毒力測定試驗表明50%咯菌腈對匍枝根霉的毒力最大，抑菌活性較高，EC50僅為0.142 2 μg/mL。10%苯醚甲環唑、50%異菌脲、32.5%苯甲嘧菌酯、12.5%腈菌唑EC50均小于20 μg/mL，對匍枝根霉也具有一定毒力和抑菌活性。儲藏期試驗結果表明，在毒力測定中EC50低于20 μg/mL的5種藥劑在儲藏期藥效試驗中也均表現出一定防治效果，其中以毒力最大的咯菌腈可濕性粉劑防治效果最佳，45 d和90 d防效均高于85%。目前常用的防治藥劑多為甲基硫菌靈、多菌靈等傳統苯并咪唑類殺菌劑藥劑，隨著使用時間的加長容易引起抗藥性。本研究通過室內毒力測定試驗結合貯藏期藥效試驗篩選出5種對于甘薯軟腐病有相當防治效果的殺菌劑，其中以咯菌腈可濕性粉劑效果最佳。咯菌腈是一種新興的非內吸性苯基吡咯類殺菌劑［18］，1996年在美國上市，它屬于假單胞菌不同種分泌的次生代謝產物硝吡咯菌素的類似物，比天然抑菌物質硝吡咯菌素對光敏感性更低，不易分解［19］，它通過抑制病原菌的孢子萌發、芽管伸長和菌絲的生長達到抑菌效果［20］，具有高效、低毒的特點，被美國環保局（EPA）列為低風險殺菌劑［21］，現已廣泛應用于農業生產中多種果蔬真菌病害的防治［22-24］。因此，生產上可推廣使用50%咯菌腈可濕性粉劑對貯藏期甘薯軟腐病進行防治。

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收稿日期：2023-02-06

基金項目：遼寧省沈陽市康平縣北四家子鄉地瓜產業科技特派團項目（編號：21-116-3-17）；遼寧省沈陽市種業創新專項（編號：22-318-2-18）；遼寧省沈陽市專家工作站項目（編號：20220105）。

作者簡介：潘家荃（1989—），女，遼寧沈陽人，碩士，助理研究員，從事甘薯新品種選育、病蟲害防治及安全貯藏技術研究。E-mail：pjqamy1001@163.com。

通信作者：于 濤，碩士，研究員，從事薯類分子遺傳育種研究。E-mail：18802421111@139.com。