宮頸鱗癌患者組織中ELF5、Ki67、P53表達特征及與疾病分期、預后的關聯性研究

沙 靜,陳秀華,胡雪靚,李 莉

(1.新疆生產建設兵團醫院 婦產科,新疆 烏魯木齊830092;2.新疆維吾爾自治區婦幼保健,新疆 烏魯木齊830001;3.新疆維吾爾自治區腫瘤醫院 婦外一科,新疆 烏魯木齊830011)

宮頸癌為女性群體常見的生殖系統惡性腫瘤,宮頸鱗癌為其常見病理類型,疾病為宮頸鱗狀上皮內瘤變(CIN)至浸潤性癌的持續進展過程[1-2]。宮頸鱗癌具備發病隱匿、進展緩慢等特征,疾病早期多無特異性臨床表現,出現癥狀就診時疾病通常已屬中晚期,喪失最佳治療時機[3-4]。因此,如何對疾病進行準確的評估以指導臨床進行針對性治療,從而保證疾病預后轉歸效果仍是研究熱點。臨床研究指出,宮頸鱗癌為多種基因協同作用的結果,故通過測定腫瘤細胞特異性抗原對疾病進行評估成為可能[5]。P53為臨床公認抑癌基因,其失活/突變和多種惡性腫瘤疾病的發病及進展具有密切關聯性,其過表達狀態和腫瘤病情及預后密切相關,同時,腫瘤患者中P53喪失保護基因組完整性的作用[6]。Ki67為重要的核增殖標記物,可預測宮頸癌、宮頸炎發病及進展,其異常表達可反映宮頸鱗癌細胞生物學行為[7]。ELF5為Ets轉錄因子家族重要成員,可對細胞發育與分化凋亡予以調節,還可影響細胞增殖、腫瘤發病[8]。基于此,本研究選取新疆生產建設兵團醫院宮頸鱗癌患者進行分析研究,旨在明確宮頸鱗癌患者組織中ELF5、Ki67、P53表達特征及與疾病分期、預后的關聯性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性選取2019年5月—2021年9月新疆生產建設兵團醫院宮頸鱗癌患者30例設為宮頸鱗癌組、低級別CIN患者20例設為低級別CIN組、高級別CIN患者20例設為高級別CIN組、慢性宮頸炎患者20例設為慢性宮頸炎組。納入標準:(1)宮頸鱗癌組符合《宮頸癌診斷與治療指南(第四版)》[9]中宮頸鱗癌診斷標準;(2)經病理檢查確診;(3)臨床資料完整;(4)均有術后隨訪,主要包括門診、電話及微信隨訪。排除標準:(1)存在其他良惡性腫瘤者;(2)妊娠期、哺乳期女性;(3)納入研究前接受放化療等相關治療者;(4)存在免疫系統、代謝系統、內分泌系統病變者;(5)存在全身性感染性疾病者。宮頸鱗癌組年齡39～71歲,平均(54.97±12.05)歲,疾病FIGO分期:Ⅰ期7例、Ⅱ期14例、Ⅲ期9例;低級別CIN組年齡36～70歲,平均(56.01±10.97)歲;高級別CIN組年齡35～73歲,平均(55.45±11.71)歲;慢性宮頸炎組年齡31～76歲,平均(55.79±10.82)歲。四組年齡等一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05),且本研究經我院醫學倫理委員會審批通過。

1.2 方法

標本均來自2019年5月—2021年9月新疆生產建設兵團醫院婦科行手術治療的患者在病理科存檔的組織蠟塊,采取免疫組織化學法測定各個組織內P53、Ki67、ELF5表達情況,經顯微鏡輔助進行閱片:P53、Ki67、ELF5陽性細胞定位在細胞核,以出現黃色或棕黃色顆粒作評定標準,參照染色強度和陽性細胞比值評定為陽性/陰性;陽性細胞比例:0分:<1%,1分:1%～25%,2分:26%～50%,3分:51%～75%,4分:>75%;染色強度:0分:無染色,1分:淺棕黃色,2分:棕黃色,3分:棕褐色;陽性細胞比例和染色強度乘積為0～2分評定為陰性,乘積≥3分則評定為陽性[10];P53、Ki67、ELF5單克隆抗體均購于北京博奧森生物技術有限公司,三者均制作2張切片一同上機實施染色處理,封片后由科室內經驗豐富的醫師2名通過雙盲法閱片,若意見存在不同則重新染色后再次閱片,并商討結果。

1.3 觀察指標

(1)統計4組P53、Ki67、ELF5陽性表達情況。(2)統計宮頸鱗癌組不同FIGO分期、患者P53、Ki67、ELF5陽性表達情況。(3)統計分析P53、Ki67、ELF5陽性表達情況與宮頸鱗癌FIGO分期的關聯性。(4)統計不同預后(將治療后12個月內影像學檢查疾病進展、復發者分為預后不良,其余評定為預后良好)的宮頸鱗癌患者P53、Ki67、ELF5陽性表達情況。

1.4 統計學處理

2 結果

2.1 四組P53、Ki67、ELF5陽性表達情況比較

宮頸鱗癌患者ELF5陽性表達率(33.33%)低于低級別CIN組(85.00%)、高級別CIN組(75.00%)、慢性宮頸炎組(90.00%),P53、Ki67陽性表達率(76.67%、83.33%)高于低級別CIN組(20.00%、25.00%)、高級別CIN組(45.00%、55.00%)、慢性宮頸炎組(5.00%、5.00%),差異有統計學意義(P<0.05),見表1。

表1 四組P53、Ki67、ELF5陽性表達情況比較[n(%)]

2.2 不同FIGO分期宮頸鱗癌者P53、Ki67、ELF5陽性表達情況比較

不同FIGO分期宮頸鱗癌者P53、Ki67、ELF5陽性表達情況比較,差異有統計學意義(P<0.05),且隨著FIGO分期增高,ELF5陽性表達率持續降低,P53、Ki67陽性表達率持續增高,差異有統計學意義(P<0.05),見表2。

表2 不同FIGO分期宮頸鱗癌者P53、Ki67、ELF5陽性表達情況比較[n(%)]

2.3 P53、Ki67、ELF5與宮頸鱗癌FIGO分期關聯性分析

檢驗可知,P53、Ki67陽性表達率與宮頸鱗癌FIGO分期間存在顯著正相關關系,ELF5陽性表達率與宮頸鱗癌FIGO分期間存在顯著負相關關系(P<0.05),見表3。

表3 P53、Ki67、ELF5與宮頸鱗癌FIGO分期關聯性分析

2.4 不同預后者P53、Ki67、ELF5陽性表達情況比較

本組30例患者中預后良好者19例、預后不良者11例(其中疾病復發9例、病死2例),預后不良者ELF5陽性表達率(10.53%)低于預后良好者(72.73%),P53、Ki67陽性表達率(94.74%、100.00%)高于預后良好者(45.45%、45.45%),差異有統計學意義(P<0.05),見表4。

表4 不同預后者P53、Ki67、ELF5陽性表達情況比較[n(%)]

3 討論

宮頸鱗癌在女性群體中較常見,近年來其發病率持續增高,且發病人群趨向年輕化,對患者身心健康及生存質量均造成了嚴重威脅[11]。研究指出,宮頸鱗癌主要是由癌前病變(CIN)逐漸進展至浸潤性癌,但CIN不一定均會進展為惡性腫瘤,CIN發病至進展為宮頸癌通常需10年左右,受疾病缺乏典型表現及主觀因素等影響,導致其存在一定的誤診或漏診風險,以致部分患者接受了過度治療[12-13]。因此,準確對疾病進行診斷評估極為重要,可保證治療方案的針對性及有效性。

隨著臨床研究深入發現,細胞生長周期紊亂在腫瘤疾病發生及進展中具有重要作用,P53基因為臨床已知的和腫瘤疾病關聯性最緊密的抑癌基因,P53產物主要定位于細胞核,屬細胞周期相關蛋白[14]。同時,P53蛋白包括突變型及野生型,其中突變型P53蛋白在惡性腫瘤組織內呈異常高表達狀態,且無抑癌作用,可促進細胞過度增殖,造成腫瘤發病與惡變;野生型P53蛋白則于正常細胞內呈低表達[15]。白菊萍等[16]研究結果顯示,慢性炎癥組、CIN組及宮頸癌組患者P53陽性表達情況存在顯著差異,且隨著病情程度加劇而持續增高。本研究結果表明,宮頸鱗癌組P53陽性表達率高于低級別CIN組、高級別CIN組、慢性宮頸炎組,且不同疾病分期的宮頸鱗癌患者P53陽性表達率存在顯著差異(P<0.05),與上述學者研究結果具有一致性,表明P53過表達在宮頸鱗癌發病與進展過程中具有重要作用,通過測定其水平可對宮頸鱗癌的早期診斷提供一定參考依據。

Ki67屬細胞增殖相關蛋白,在腫瘤細胞增殖能力評估中具有重要作用,其表達情況和惡性腫瘤惡性程度、預后存在密切關聯性,可參與惡性腫瘤的轉移及侵襲等過程[17]。臨床研究證實,Ki67可作為評估惡性腫瘤人群高危個體的重要生物學標記物,其陽性表達和多種惡性腫瘤發病與進展、轉移、浸潤等關系密切[18]。另有研究指出,多種惡性腫瘤和癌前病變患者Ki67均為過表達,故推測Ki67可能為原癌基因,其陽性表達過高可造成惡性腫瘤發病及進展[19]。錢琳等[20]對宮頸鱗癌患者組織內Ki67表達情況進行探究,結果顯示宮頸鱗癌患者陽性表達率異常增高(80.8%),且侵襲浸潤者Ki67陽性表達率(92.6%)高于無侵襲浸潤者(60.0%)。劉瑞等[21]研究也證實,宮頸鱗癌患者及高/低級別鱗狀上皮內病變患者Ki67呈高表達狀態,并隨病變級別增高而增高。本研究結果顯示,宮頸鱗癌組Ki67陽性表達率高于低級別CIN組、高級別CIN組、慢性宮頸炎組,且隨著疾病分期增高,宮頸鱗癌患者Ki67陽性表達率持續增高(P<0.05),與上述學者研究結果相一致,提示宮頸鱗癌發病及進展中細胞增殖活性持續強化,進一步證實宮頸鱗癌發病為逐漸進展的過程,Ki67在CIN和宮頸鱗癌的診斷評估中也具有重要作用。

此外,Ets家族成員可調節細胞發育、增殖、分化、凋亡等生理活動,ELF5為Ets家族重要成員,其包括2個可辨別結構域,即1個包含所有Ets轉錄因子且可結合TTCC核心序列的基因序列與1個參與蛋白相互作用的結構域[22]。當前臨床關于ELF5的研究多集中于乳腺癌、乳腺細胞等,ELF5主要由乳腺導管前體細胞生成,為乳腺腺泡細胞發育的調節因子,不僅能影響腺泡細胞,且能調節妊娠期乳腺泌乳小泡結構,影響胚胎形成和乳腺小泡增生[23]。近年來臨床研究證實,ELF5屬潛在腫瘤抑制因子,其在惡性腫瘤發病與進展過程中可發揮抑癌基因作用,細胞系內ELF5表達降低,故推測調節ELF5轉錄水平可為惡性腫瘤的臨床治療提供新的方向[24]。本研究對宮頸疾病患者組織內ELF5表達情況進行探究,結果顯示宮頸鱗癌患者ELF5陽性表達率低于低級別CIN組、高級別CIN組、慢性宮頸炎組,且ELF5陽性表達率與宮頸鱗癌患者FIGO分期存在顯著負相關關系(P<0.05),表明ELF5在宮頸鱗癌發病及進展中也具有重要作用。本研究對不同預后的宮頸鱗癌患者P53、Ki67、ELF5陽性表達情況進行探究,結果顯示預后不良者ELF5陽性表達率低于預后良好者,P53、Ki67陽性表達率高于預后良好者(P<0.05),上述指標在宮頸鱗癌的預后預測中具有較高價值,可通過測定上述指標陽性表達情況對宮頸鱗癌的預后進行早期預測,指導臨床制定或調整干預方案,保證疾病良好轉歸。

綜上所述,宮頸鱗癌組織中P53、Ki67情況異常增高,其增高幅度與疾病分期具有密切關聯性,ELF5在宮頸鱗癌組織表達降低,且不同預后情況者上述指標表達間存在顯著差異,其可用于疾病預后的預測。