ELISA 及ECLIA 法在乙型肝炎病毒感染血清學標志物檢測中的應用效果對比

熊鉆 梅玉峰 王亞 劉慶 沈利華

乙型肝炎是嚴重威脅我國人民健康的慢性傳染性疾病, 可以引起肝炎、肝纖維化、肝硬化, 甚至肝癌的發生［1］。乙型肝炎病毒感染人群分為慢性攜帶者及慢性肝炎患者, 慢性攜帶者不會有明顯自覺不適, 可以像健康人一樣的工作或者生活；慢性肝炎患者感染乙型肝炎病毒后出現慢性肝臟損傷, 反復出現轉氨酶異常或膽紅素升高, 患者自我感覺出現乏力、食欲差, 尿的顏色變黃等相應表現, 如果乙型肝炎病毒不能有效控制, 引起肝臟硬化改變, 外觀出現慢性肝病體征, 包括肝掌、蜘蛛痣、面色晦暗, 嚴重者出現肝臟功能失代償的表現, 如消化道出血、嘔血或者便血。部分患者出現門脈高壓的表現、側支循環形成, 表現為腹水、肚子明顯膨隆、雙下肢浮腫, 嚴重者出現肝性腦病、意識障礙、行為異常。因此, 對乙型肝炎病毒感染進行早期監測具有重要的臨床價值［2］。本研究選取2020 年6 月～2021 年2 月本院收治的乙型肝炎病毒感染患者90 例, 探究乙型病毒感染血清學標志物應用ELISA 及ECLIA 法檢測的效果, 現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020 年6 月～2021 年2 月本院收治的乙型肝炎病毒感染患者90 例, 納入標準：符合世界衛生組織制定的乙型肝炎病毒感染的診斷標準［3］；經臨床影像學資料、實驗室檢查、臨床特征明確診斷。排除標準：嚴重心、肺、肝、腎功能異常患者；血液系統疾病、惡性腫瘤、肝癌、其他類型肝炎病毒感染患者；妊娠期、哺乳期女性；認知功能障礙患者。年齡27～48 歲, 平均年齡(36.2±4.5)歲；其中女48 例,男42 例；病程1～5 年, 平均病程(3.1±0.9)年。本研究經本院倫理委員會批準。

1.2 方法 采集所有患者4 ml 空腹靜脈血, 離心10 min, 3000 r/min, 分離血清, 在-20℃的環境下置存血清標本, 予以ELISA 及ECLIA 法檢測。儀器：科美LicA500 全自動化學發光分析儀、深圳匯松MB-580酶標儀、北京普朗DNX-9620A 全自動洗板機。試劑：博陽生物科技(上海)有限公司、英科新創(廈門)科技有限公司提供試劑盒。

1.3 觀察指標及判定標準 對比兩組檢測方式的診斷準確率及對乙型肝炎病毒血清學標志物的陽性檢出率,HBeAb、HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBcAb 的吸光度值/臨界值(S/CO 比值)>1 為陽性, <1 為陰性［4］。

1.4 統計學方法 采用SPSS21.0 統計學軟件處理數據。計數資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P<0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩種檢測方式的診斷準確率對比 ECLIA 法診斷準確率高于ELISA 法, 差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩種檢測方式的診斷準確率對比(n, %, n=90)

2.2 兩種檢測方式對乙型肝炎病毒血清學標志物的陽性檢出率對比 ECLIA 法對HBeAb、HBsAg、HBeAg的陽性檢出率顯著高于ELISA 法, 差異有統計學意義(P<0.05)；兩種檢測方式對HBsAb、HBcAb 的陽性檢出率對比, 差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 兩種檢測方式對乙型肝炎病毒血清學標志物的陽性檢出率對比［n(%), n=90］

3 討論

肝臟是消化系統最大的腺體器官, 是一個“化工廠”, 包括食物的加工、轉化、合成等, 另外還能促進某些有毒物質的轉換和排泄［5,6］。甲型肝炎(甲肝)、戊型肝炎(戊肝)是通過消化道傳染的可以治愈的急性傳染病。甲型肝炎和乙型肝炎大致相同, 比乙型肝炎更容易發展為肝炎后肝硬化或肝癌。乙型肝炎是指乙型肝炎病毒檢測為陽性, 病程>6 個月或發病日期不明確而臨床有慢性肝炎表現者, 根據臨床表現可分為輕度、中度、重度［7,8］。慢性乙型肝炎攜帶者是指血清轉氨酶在1 年內均正常, 肝組織學檢查正常, 無慢性肝炎臨床特征, 但乙型肝炎病毒檢測為陽性者［9,10］。2017 年10 月27 日, 世界衛生組織國際癌癥研究機構公布的致癌物清單初步整理參考, 乙型肝炎病毒慢性感染被列為Ⅰ類致癌物。全世界約有3.5 億乙型肝炎患者, 我國HBsAg 陽性率為9.09%, 每年有1 百萬人死于肝衰竭或肝癌, 為全球第9 位死亡原因［11］。乙型肝炎病毒感染可通過血液傳播、醫源性傳播、母嬰傳播、密切接觸、性傳播等［12］。乙型肝炎病毒是一種嗜肝病毒, 主要存在于肝細胞內并損害肝細胞, 引起肝細胞炎性反應、壞死、纖維化。病毒性肝炎的病理機制尚不能完全闡明, 肝細胞內乙型肝炎病毒逐漸復制, 機體的免疫應答可決定肝細胞病變程度［13］。病毒性肝炎的發病機制目前尚不能充分闡明, 乙型肝炎病毒感染肝細胞并在其中復制, 一般認為不直接引起肝細胞病變,主要取決于機體的免疫應答。乙型肝炎病毒進入機體后, 通過血液到達肝臟和肝外組織, 引起相應的病理改變和免疫功能改變, 以肝臟病變最為突出, 肝外損傷主要由免疫復合物引起。乙型肝炎病毒感染的潛伏期為6 周～6 個月, 一般為3 個月, 潛伏期病原體的毒力、數量、種類和機體免疫功能密切相關, 同時隨著病情的逐漸進展可出現黃疸、肝區疼痛、肝脾大、肝外表現、肝纖維化等［14］。

ECLIA 法是一種臨床常用的檢測方法, 具有高選擇性和高靈敏度的特點, 可以用來檢測一些傳染性疾病, 比如乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病等, 也可以用于內分泌疾病的激素檢測, 比如甲狀腺功能、性腺垂體激素、皮質醇等內分泌激素的檢查。ELISA 法的原理為, 首先把酶分子與抗體或抗原相結合, 這種結合不會改變抗體和抗原的免疫學特性, 又保留了酶的活性；然后用酶標記的抗體或抗原與吸附在固相載體上的已知抗原或抗體發生特異性的結合；最后加入底物溶液, 使其發生化學反應。如果抗原抗體發生了特異反應, 則底物的顏色就會發生變化, 而顏色變化的深淺與標本中相應的抗體或抗原的含量成正比。ECLIA 法的可測總范圍更廣, 其應用的反應總時間更少, 可簡便操作, 準確性更高, 臨床檢測結果更準確。若HBeAg、HBsAg、HBcAb 乙型肝炎病毒的血清學標志物檢測結果為陽性, 說明機體感染了乙型肝炎病毒, 同時其傳染性更強；而HBsAg、HBeAb、HBcAb 結果陽性提示機體感染了乙型肝炎病毒, 但其傳染性較低。

綜上所述, ECLIA 法檢測乙型肝炎病毒感染的準確性和對乙型肝炎病毒血清學標志物的陽性檢出率均顯著高于ELISA 法, 同時可對病情進行監測, 具有更高的臨床應用價值。