22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對環(huán)境非靶標(biāo)生物的急性毒性與風(fēng)險評估

趙 玲，沈 鵬，葉 劍，吳 艷，曹沁芳，吳 靜，王洪雷

（1.江蘇恒生檢測有限公司，南京 210046；2.江蘇省農(nóng)藥研究所股份有限公司，南京 210046）

噻蟲嗪是由諾華公司開發(fā)的新煙堿類殺蟲劑，具有殺蟲活性高，殺蟲譜廣及與環(huán)境相容性好等特點(diǎn)，可以取代高毒性且殘留期長的有機(jī)磷、有機(jī)氯和氨基甲酸酯類殺蟲劑[1-3]。高效氯氟氰菊酯是一種擬除蟲菊酯類殺蟲、殺螨劑，以觸殺和胃毒作用為主，具有高效、廣譜、光穩(wěn)定性好、低殘留、對環(huán)境污染小的特點(diǎn)，并逐漸取代有機(jī)氯農(nóng)藥，成為當(dāng)前殺蟲劑市場的主導(dǎo)產(chǎn)品之一[4-8]。隨著噻蟲嗪和高效氯氟氰菊酯的使用越來越廣泛，環(huán)境安全問題以及對非靶標(biāo)生物的毒害效應(yīng)開始引起人們的關(guān)注，目前關(guān)于兩種農(nóng)藥對非靶標(biāo)生物的單一毒性已有報道，但相應(yīng)的聯(lián)合毒性和風(fēng)險評估仍有欠缺。吳若函等[9]2016年研究發(fā)現(xiàn)，噻蟲嗪對斑馬魚和大型溞毒性均為低毒，但對蜜蜂、家蠶均有較高毒性，不會對水生魚類、溞類造成危害性的影響，但對陸生生物蜜蜂、家蠶的生存環(huán)境有巨大威脅。史夢竹等[10]在2014年的研究顯示，高效氯氟氰菊酯菊酯對水生生物的急性毒性較高。22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑作為兩種農(nóng)藥的混配制劑，其作用快，持效期長，具有更高的活性、更好的安全性和更廣的殺蟲譜，其聯(lián)合毒性和風(fēng)險評估的研究對于新型制劑的開發(fā)研究和減輕環(huán)境污染具有重要意義。

現(xiàn)有的高效氯氟氰菊酯的檢測方法大都采用液相法[11]、氣相法[12-14]、氣質(zhì)法[15]為主，高效氯氟氰菊酯·噻蟲嗪復(fù)配制劑的檢測方法目前有高效液相色譜分析方法[16]。本研究建立了用液質(zhì)法測定曝氣自來水和BG11培養(yǎng)基中高效氯氟氰菊酯和噻蟲嗪的定性定量分析方法，測定了22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對魚類、溞類、藻類、蜜蜂和家蠶5種非靶標(biāo)生物的毒性并分級，結(jié)合相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行風(fēng)險評估，對指導(dǎo)產(chǎn)品的科學(xué)合理施用和保護(hù)生態(tài)環(huán)境安全具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 試劑和供試物

22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑，湖南長青潤慷寶農(nóng)化有限公司；噻蟲嗪標(biāo)樣（純度98.1%）、高效氯氟氰菊酯（純度98.3%），上海市農(nóng)藥研究所有限公司；乙腈（色譜純）、二氯甲烷（色譜純）、甲醇（色譜純），TEDIA公司；氯化鈉（分析純）、乙酸乙酯（分析純），江蘇強(qiáng)盛功能化學(xué)股份有限公司；甲酸（分析純）、重鉻酸鉀（純度99.8%）、乙酸銨（98.0%），國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

斑馬魚（Danio rerio），南京家云水族館；大型溞（Daphnia magna），武漢科樂多生物科技有限公司；羊角月牙藻（Pseudokirchneriella subcapitata），中國科學(xué)院淡水藻種庫；意大利蜜蜂（Apis mellifera），南京市溧水區(qū)柘塘鎮(zhèn)蜜蜂養(yǎng)殖廠；家蠶‘菁松×皓月’（Bombyx mori），諸暨健寶農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司；小型熱帶魚專用飼料，山東貝森水產(chǎn)飼料有限公司。

1.2 儀器設(shè)備

ACQUITY Ultra Performance LC/TQD液相質(zhì)譜聯(lián)用儀，美國沃特世科技公司；XS105DU分析天平、S2-T Kit pH計，梅特勒托利多；純水儀，默克化工技術(shù)（上海）有限公司；TG20M離心機(jī)，湖南平凡科技有限公司；HQ40D溶氧儀，哈希公司；HI96735總硬度濃度測定儀，哈納公司；TES-1330A照度計，泰仕公司；MGC-250BP-2光照培養(yǎng)箱、LRH-250生化培養(yǎng)箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司；NV24A-Ⅱ濃縮氮吹儀，天津博納艾杰爾科技有限公司。

1.3 儀器條件

采用液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜法測定，液相條件為：色譜柱Eclipse Plus C1（82.1 mm×50 mm，1.8 μm），Agilent；柱溫：30℃；進(jìn)樣體積：10 μL；噻蟲嗪流動相為0.1%甲酸水：乙腈=10∶90（V∶V），流速0.3 mL/min；高效氯氟氰菊酯流動相為0.1%甲酸水（含5.0 mmol/L乙酸銨）：乙腈=10∶90（V∶V），流速0.350 mL/min。質(zhì)譜條件：采用多離子反應(yīng)監(jiān)測（MRM）；正離子模式；電噴霧離子源（ESI）；離子源溫度：110℃；脫溶劑氣溫度：400℃；毛細(xì)管電壓：3.00 kV；脫溶劑氣類型：N2；脫溶劑氣流量：500 L/Hr；碰撞氣體類型：Ar。具體質(zhì)譜參數(shù)見表1。

表1 多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）的條件

1.4 樣液前處理

魚、溞和藻類試驗(yàn)藥液中噻蟲嗪前處理：取5 mL溶液至50 mL具塞離心管中，加入2 g氯化鈉，加入5 mL乙腈溶液，振蕩混勻，渦旋3 min，靜置5 min，取1 mL上清液，過0.22 μm有機(jī)濾膜至進(jìn)樣瓶，待測。

魚和溞類試驗(yàn)藥液中高效氯氟氰菊酯前處理：取50 mL溶液到分液漏斗中，加入25 mL二氯甲烷，振搖1 min，取出萃取液至圓底燒瓶中，再重復(fù)提取2次，合并有機(jī)相，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀30℃濃縮近干，用5 mL乙腈超純水混合溶液（V∶V=1∶1）溶解，取1 mL復(fù)溶后過0.22 μm有機(jī)濾膜至進(jìn)樣瓶，供測。

藻類試驗(yàn)藥液中高效氯氟氰菊酯前處理：取1 mL配制好的溶液到5 mL離心管中，加入1 mL乙腈，渦旋3 min，混勻，取1 mL過0.22 μm有機(jī)濾膜至進(jìn)樣小瓶，供測。

1.5 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

準(zhǔn)確稱取17.79 mg的噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)品和18.81 mg的高效氯氟氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)品，分別用乙腈定容至20 mL容量瓶中，搖勻，配制成質(zhì)量濃度為873 mg/L的高效氯氟氰菊酯和質(zhì)量濃度為925 mg/L的噻蟲嗪儲備液備用。

1.6 非靶標(biāo)生物的急性毒性試驗(yàn)

本試驗(yàn)遵循中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第2570號《農(nóng)藥登記試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范》[17]、OECD準(zhǔn)則[18]和GB/T 31270—2014《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗(yàn)準(zhǔn)則》[19]，對22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑進(jìn)行了對5種非靶標(biāo)生物的急性毒性試驗(yàn)。

（1）魚類急性毒性試驗(yàn)：選用斑馬魚作為供試生物，在試驗(yàn)條件下馴養(yǎng)7 d，采用半靜態(tài)法進(jìn)行染毒，正式試驗(yàn)設(shè)置有效成分質(zhì)量濃度6.00、9.60、15.4、24.6、39.4 μg/L，同時設(shè)置一個空白對照組，濃度組不設(shè)重復(fù)，每組投放7尾魚，每48 h更換一次試驗(yàn)溶液，暴露96 h，暴露開始后3、6、24、48、72、96 h觀察魚的死亡情況，分別在暴露0、48 h和96 h從濃度組和空白對照組取樣上機(jī)測定濃度，確保試驗(yàn)期間試驗(yàn)藥液中供試物濃度不低于理論濃度的80%。如果試驗(yàn)期間試驗(yàn)藥液中供試物濃度發(fā)生超過20%的偏離，則應(yīng)檢測試驗(yàn)藥液中供試物的實(shí)際濃度并以此計算結(jié)果。下述試驗(yàn)亦如此。

（2）溞類急性活動抑制試驗(yàn)：選用大型溞作為供試生物，采用靜態(tài)法進(jìn)行染毒，正式試驗(yàn)設(shè)置4.00、7.20、13.0、23.4 μg/L和42.1 μg/L 5個有效成分質(zhì)量濃度，同時設(shè)置1個空白對照組，濃度組設(shè)4個重復(fù)，每組放入5只幼溞，燒杯加蓋培養(yǎng)皿后放入光照培養(yǎng)箱中暴露48 h，試驗(yàn)期間不曝氣、不喂食，在第24 h和48 h觀察并記錄幼溞的受抑制情況。分別在暴露0 h和48 h，從各濃度組和空白對照組取樣上機(jī)測定濃度，確保試驗(yàn)期間試驗(yàn)藥液中供試物濃度不低于理論濃度的80%。

（3）藻類生長抑制試驗(yàn)：選用羊角月牙藻作為供試生物，對數(shù)生長期的純種藻，在試驗(yàn)條件下培養(yǎng)，每隔3 d接種一次，反復(fù)接種2次，以此作為試驗(yàn)用藻。采用靜態(tài)試驗(yàn)，正式試驗(yàn)共設(shè)置0.300、0.930、2.88、8.93 mg/L和27.7 mg/L 5個有效成分質(zhì)量濃度組和一個空白對照組。濃度組設(shè)置3個重復(fù)，使用生物顯微鏡確定羊角月牙藻培養(yǎng)液細(xì)胞濃度，計算得到預(yù)培養(yǎng)的兩瓶羊角月牙藻細(xì)胞濃度分別為2.95×106個/mL和3.05×106個/mL，選擇濃度大的藻液作為接種液，用移液器向每個空白對照組和濃度組錐形瓶中接種278 μL藻液，使得羊角月牙藻初始濃度約為1.00×104個/mL。接種后將錐形瓶轉(zhuǎn)移至恒溫光照搖床中培養(yǎng)。錐形瓶隨機(jī)放在搖床上，并每天更換其位置，試驗(yàn)周期為72 h，分別在暴露0、24、48、72 h，從各濃度組和空白對照組中取液上機(jī)測定濃度。

（4）對蜜蜂的急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)：試驗(yàn)選用蜜蜂作為供試生物，采用飼喂染毒糖水法對蜜蜂進(jìn)行染毒。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，正式試驗(yàn)設(shè)置0.015 0、0.030 0、0.060 0、0.120 μg/蜂和0.240 μg/蜂5個有效成分質(zhì)量濃度組和1個空白對照組，空白對照組和濃度組各設(shè)3個重復(fù)，每個重復(fù)10只蜜蜂。使用二氧化碳麻醉系統(tǒng)對蜜蜂進(jìn)行麻醉，并隨機(jī)分配到貼標(biāo)簽的試驗(yàn)籠中，饑餓處理2 h。然后將試驗(yàn)溶液（空白對照組為50%w/v的蔗糖溶液）放入做有標(biāo)記的塑料離心管（底部有一個孔，直徑為2 mm）做成的喂食器中，每個重復(fù)的施藥量為200 μL，放入黑暗環(huán)境中48 h。逐個稱量測試前的空塑料離心管、加藥后和喂食后的離心管，計算食物消耗量，把每個重復(fù)的平均食物消耗量作為該重復(fù)中每只蜜蜂的食物消耗量。記錄給藥后24 h和48 h蜜蜂的死亡數(shù)和異常行為。

（5）對家蠶的急性毒性試驗(yàn)：選用家蠶作為供試生物，在人工氣候箱中培養(yǎng)，培育至2齡。采用浸葉法對家蠶進(jìn)行染毒。基于預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，正式試驗(yàn)設(shè)置0.015、0.030、0.060、0.120 mg/L和0.240 mg/L 5個有效成分質(zhì)量濃度組和一個空白對照組，空白對照組和濃度組各3個重復(fù)，每個重復(fù)20頭家蠶。將測試培養(yǎng)皿放置于人工氣候箱內(nèi)培養(yǎng)96 h，并且記錄試驗(yàn)開始后24、48、72 h和96 h家蠶的死亡數(shù)和異常行為。

通過Bliss軟件計算22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對非靶標(biāo)生物的半致死濃度LC50、半數(shù)效應(yīng)濃度EC50、半致死劑量LD50及其95%置信限。

1.7 風(fēng)險評估

1.7.1 蜜蜂風(fēng)險評估

遵照NY/T 2882—2016《農(nóng)藥登記環(huán)境風(fēng)險評估指南》第4部分：蜜蜂[20]，對蜜蜂進(jìn)行風(fēng)險評估。噴施農(nóng)藥暴露場景的風(fēng)險商值（RQSP）按式（1）進(jìn)行計算。

式中：RQSP為噴施農(nóng)藥暴露場景的風(fēng)險商值；AR為推薦的農(nóng)藥單次最高施用量，g/hm2；LD50為經(jīng)口和接觸的蜜蜂半致死劑量，μg/蜂。

1.7.2 家蠶風(fēng)險評估

遵照NY/T 2882—2016《農(nóng)藥登記環(huán)境風(fēng)險評估指南》第5部分：家蠶[20]，本評估采用單次施藥飄移場景來進(jìn)行暴露分析。在飄移場景下進(jìn)行評估并計算PEC，單次施藥后計算最外圍桑樹上的預(yù)測暴露濃度（PECsa-fr）和次外圍桑樹上的預(yù)測暴露濃度（PECsa-sr）。采用試驗(yàn)得出的毒性終點(diǎn)（EnP）和相應(yīng)的不確定因子（UF），計算預(yù)測無效應(yīng)濃度（PNEC）。根據(jù)PEC和PNEC計算RQ。計算公式見式（2）～（6）。

式中：PECsa-fr為單次施藥后最外圍一行桑樹上的預(yù)測暴露濃度，mg/kg桑葉；PDFfr為最外圍一行桑樹上的飄移因子；PECsa-sr為單次施藥后次外圍一行桑樹上的預(yù)測暴露濃度，mg/kg桑葉；DFphi為桑葉上農(nóng)藥的降解系數(shù)；DT50為農(nóng)藥在桑葉上的降解半衰期，d；PHI為農(nóng)藥最后一次使用距離桑葉采收的間隔期，d；PNEC 為預(yù)測無效應(yīng)濃度，mg/kg桑葉；EnP為試驗(yàn)得出的毒性終點(diǎn)，mg/kg桑葉；UF為不確定因子。

按式（7）計算修正后的半致死濃度（LC50-C），mg/kg桑葉。

式中：Fc為修正系數(shù)，默認(rèn)為0.46 L/kg桑葉。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性關(guān)系分析

在0.01～1 mg/L范圍內(nèi)，噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度與峰面積的線性方程為y=268 256x＋375.681，R2=0.999 325；高效氯氟氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度與峰面積的線性方程為y=159 725x＋869.932，R2=0.997 748，R2均＞0.99，線性相關(guān)性良好，符合土壤和水中化學(xué)農(nóng)藥分析方法建立和驗(yàn)證指南[17]中對相關(guān)系數(shù)的要求。

2.2 準(zhǔn)確度和精密度分析

向空白曝氣自來水和BG11培養(yǎng)基溶液加標(biāo)進(jìn)行添加回收試驗(yàn)，每檔濃度設(shè)置5平行，噻蟲嗪和高效氯氟氰菊酯在水中的平均回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）見表2。噻蟲嗪、高效氯氟氰菊酯平均回收率分別為90.4%～103.0%和78.2%～96.3%；RSD分別為1.86%～9.03%和0.593%～3.78%。噻蟲嗪和高效氯氟氰菊酯在曝氣自來水中的定量限分別為0.001 5 mg/L和0.001 mg/L；噻蟲嗪和高效氯氟氰菊酯在BG11培養(yǎng)基中的定量限分別為0.05 mg/L和0.03 mg/L。均符合土壤和水中化學(xué)農(nóng)藥分析方法建立和驗(yàn)證指南（NY/T 3151—2017）[21]中對回收率、精密度和定量限的要求。

表2 添加回收率和精密度（n=5）

2.3 毒性效應(yīng)

2.3.1 對斑馬魚的急性毒性

在斑馬魚急性毒性試驗(yàn)的96 h暴露期間，空白對照組的死亡率為0%，斑馬魚無異常行為；藥劑處理組出現(xiàn)躺在缸底、翻白、側(cè)游等異常行為。根據(jù)試驗(yàn)終點(diǎn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析及毒性等級劃分，22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對斑馬魚的急性毒性96 h-LC50值為5.12 μg/L（表3），根據(jù)GB/T 31270—2014《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗(yàn)準(zhǔn)則》[19]中農(nóng)藥對魚類的毒性等級劃分標(biāo)準(zhǔn)，22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對斑馬魚的急性毒性為劇毒。

表3 22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對非靶標(biāo)生物的毒性數(shù)據(jù)分析

2.3.2 對大型溞的急性毒性

在大型溞急性活動抑制試驗(yàn)的48 h暴露期間，空白對照組大型溞無異常行為，藥劑處理組的大型溞除死亡外也無異常行為。根據(jù)試驗(yàn)終點(diǎn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析及毒性等級劃分，22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對大型溞的急性毒性48 h-EC50值為7.75 μg/L（表3），根據(jù)GB/T 31270—2014《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗(yàn)準(zhǔn)則》[19]中農(nóng)藥對溞類的毒性等級劃分標(biāo)準(zhǔn)，22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對大型溞的急性毒性為劇毒。

2.3.3 對羊角月牙藻的毒性

在對羊角月牙藻的生長抑制的72 h暴露期間，用生物顯微鏡對24、48 h和72 h的羊角月牙藻進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)，并在結(jié)束暴露時用顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)。空白對照組藻細(xì)胞生長狀況良好，外觀正常，未出現(xiàn)中毒癥狀，藥劑處理組藻細(xì)胞受到一定程度的生長抑制，并出現(xiàn)細(xì)胞碎片的中毒癥狀。根據(jù)試驗(yàn)終點(diǎn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析及毒性等級劃分，22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對羊角月牙藻的急性毒性72 h-ErC50值為4.37 mg/L；72 h-EyC50值為0.591 mg/L（表3），根據(jù)GB/T 31270—2014《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗(yàn)準(zhǔn)則》[19]中農(nóng)藥對藻類的毒性等級劃分標(biāo)準(zhǔn)，以生長率抑制率為毒性終點(diǎn)計，22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對羊角月牙藻的急性毒性為低毒；以生物量增長抑制率為毒性終點(diǎn)計，22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對羊角月牙藻的急性毒性為中毒。

2.3.4 對蜜蜂的毒性

在蜜蜂急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)的48 h給藥期間，藥劑處理組蜜蜂出現(xiàn)躺在籠內(nèi)和垂死的異常行為，空白對照組蜜蜂無異常行為。根據(jù)試驗(yàn)終點(diǎn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析及毒性等級劃分，22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對蜜蜂的急性毒性48 h-LC50值為0.044 8 μg/蜂（表3），根據(jù)GB/T 31270—2014《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗(yàn)準(zhǔn)則》[19]中農(nóng)藥對蜜蜂的毒性等級劃分標(biāo)準(zhǔn)，22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對蜜蜂的急性毒性為高毒。

2.3.5 對家蠶急性毒性

在家蠶急性毒性試驗(yàn)的96 h給藥期間，藥劑處理組家蠶出現(xiàn)甩頭、晃頭、扭曲掙扎、吐水、攝食減少或抗拒、全部死亡的異常行為，空白對照組蜜蜂無異常行為。根據(jù)各試驗(yàn)終點(diǎn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析及毒性等級劃分，22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對家蠶的急性毒性96 h-LC50值為0.037 mg/L（表3），根據(jù)GB/T 31270—2014《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗(yàn)準(zhǔn)則》[19]中農(nóng)藥對家蠶的毒性等級劃分標(biāo)準(zhǔn)，22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對家蠶的急性毒性為劇毒。

2.4 初級風(fēng)險評估

2.4.1 蜜蜂

根據(jù)表4的初級風(fēng)險評估結(jié)果表明，22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對蜜蜂的風(fēng)險商值RQSP為10.312 5，大于1，風(fēng)險不可接受。另外22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑不屬于昆蟲生長調(diào)節(jié)劑，無需通過蜜蜂幼蟲飼喂試驗(yàn)進(jìn)行風(fēng)險評估。

表4 22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對蜜蜂的風(fēng)險商值

2.4.2 家蠶

家蠶在飄移場景下進(jìn)行評估并計算單次施藥條件下的預(yù)測暴露濃度（PEC），22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑單次噴霧施用0.023 1 kg/hm2，施藥后計算供試最外圍桑樹上的預(yù)測暴露濃度（PECsa-fr）為2.01 mg/kg桑葉，次外圍桑樹上的預(yù)測暴露濃度（PECsa-sr）為0.12 mg a.i./kg桑葉（表5）。最外圍桑樹場景下和次外圍桑樹場景下的風(fēng)險商值RQ均大于1（表6），風(fēng)險不可接受。

表5 22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑在飄移場景下對家蠶的初級暴露分析結(jié)果

表6 對家蠶的風(fēng)險商值

3 結(jié)果與討論

本研究建立了基于液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定曝氣自來水和BG11培養(yǎng)基中高效氯氟氰菊酯和噻蟲嗪的定性定量分析方法，本方法簡單快捷、準(zhǔn)確度和精密度好，能夠滿足對水生生物試驗(yàn)環(huán)境不同基質(zhì)中此類農(nóng)藥同時測定的要求。在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境條件下進(jìn)行了22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對非靶標(biāo)生物的急性毒性試驗(yàn)，并根據(jù)GB/T 31270—2014《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗(yàn)準(zhǔn)則》[19]進(jìn)行毒性等級劃分。

22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對斑馬魚、大型溞的急性毒性為“劇毒”，對水生生物魚和溞的危害比較大。據(jù)報道30%噻蟲嗪懸浮劑對斑馬魚的毒性為微毒[22]，25%噻蟲嗪水分散粒劑對斑馬魚和大型溞的毒性均為低毒[9]，10%高效氯氟氰菊酯微囊懸浮劑、2.5%高效氯氟氰菊酯乳油和10%高效氯氟氰菊酯可濕性粉劑對斑馬魚的毒性均為劇毒[23]，8%高效氯氟氰菊酯微乳劑對斑馬魚、大型溞的毒性分別為劇毒和中毒[10]，本研究22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對斑馬魚的毒性與報道的不同劑型和含量的高效氯氟氰菊酯的毒性效應(yīng)一致。22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對大型溞毒性效應(yīng)為劇毒，遠(yuǎn)高于報道過的兩類單劑的毒性，可能混配制劑的兩個有效成分存在加和效應(yīng)，或者制劑加工過程中使用了毒性較大的助劑所導(dǎo)致。毒性效應(yīng)受到多種環(huán)境因子制約并與生物的種類有關(guān)，本研究僅是混配農(nóng)藥對非靶標(biāo)生物毒性效應(yīng)的初步研究，對于農(nóng)藥的多種有效成分聯(lián)合使用后的效應(yīng)機(jī)制，還有待進(jìn)一步探討。

基于生長率抑制率和生物量增長抑制率，22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對羊角月牙藻的毒性分別為“低毒”和“中毒”，對藻類的危害相對較小。未見此類農(nóng)藥制劑對藻類的毒性報道，僅有原藥的毒性數(shù)據(jù)報道，如96%高效氯氟氰菊酯原藥對普通小球藻的毒性為低毒[7]，噻蟲嗪原藥對綠藻的毒性為低毒[24]，混配制劑與原藥的毒性比較接近。

總體來說，除了對羊角月牙藻外，該混配制劑對其他水生生物的毒性都比較強(qiáng)，田間施用過程中應(yīng)注意使用劑量、范圍以及方法，還應(yīng)盡量減少農(nóng)藥從施用區(qū)域遷移至鄰近水體。

22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對蜜蜂的急性毒性為高毒，對家蠶的急性毒性為劇毒，與其他研究報道一致[9-10,25]。22%噻蟲嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑用于小麥噴霧使用，其對蜜蜂和家蠶的風(fēng)險均為不可接受。根據(jù)NY/T 2882—2016《農(nóng)藥登記環(huán)境風(fēng)險評估指南》第4部分：蜜蜂[20]中的規(guī)定，由于對蜜蜂的風(fēng)險不可接受，可選擇在產(chǎn)品標(biāo)簽上標(biāo)注在施藥區(qū)域（周圍）開花植物花期禁用以及施用農(nóng)藥三日前告知所在地及附近3 000 m以內(nèi)的養(yǎng)蜂者。而根據(jù)NY/T 2882—2016《農(nóng)藥登記環(huán)境風(fēng)險評估指南》第5部分：家蠶[24]中的規(guī)定，在飄移場景下，當(dāng)初級風(fēng)險評估顯示不可接受時，首先考慮采用有效的風(fēng)險降低措施，因此可選擇在產(chǎn)品標(biāo)簽上標(biāo)注在蠶室及桑園附近禁用，以及在桑田周圍種植高大樹木作為隔離帶以減少飄移到桑田的農(nóng)藥量。