佳米驢消化道寄生蟲感染情況的調查研究

丁常根，秦凱星，馮 平

（ 榆林學院，陜西 榆林 719000 ）

佳米驢是我國著名的中型驢品種，主要分布于榆林市佳縣、米脂縣以及綏德縣一帶[1]。近年來，驢寄生蟲病對驢養殖的影響日漸突出，其寄生蟲種類繁多，且不同地區、不同年齡段的驢感染情況也各有不同。國外驢消化道感染馬副蛔蟲及梨形蟲病較嚴重，其次為圓線蟲。有調查指出，埃塞俄比亞的馬副蛔蟲感染率較高，達到96%，馬副蛔蟲達到40%[2]；巴西圣保羅梨形蟲感染率較高，其中泰勒蟲感染率為73.68%，駑巴貝斯蟲為93.2%[3]；羅馬尼亞圓線蟲屬感染較為突出，達到74%[4]。孔繁瑤等[5]在研究驢寄生蟲時發現了新種三齒線蟲（Triodontophorus）和新種盅口屬線蟲（Cyathostomum）等多種線蟲。周婉麗[6]調查馬、驢、騾體內寄生蟲時共發現62種寄生蟲，線蟲種類最多，占82.26%（51/62），其次是蜘蛛昆蟲，占11.29%（7/62），吸蟲和絳蟲最少，各占3.23%（2/62）。楊軍威等[7]發現，馬副蛔蟲感染葉城縣驢的感染率為17%左右。王時偉等[8]對塔里木盆地的60頭驢胃腸道寄生蟲進行調查，發現胃腸道寄生蟲感染率高達100%，均為混合感染，且感染3種及以上的最多，達到了95%，其中圓線屬占100%。因此，需加強對寄生蟲病學的深入研究，并在臨床中采取綜合防治措施，降低寄生蟲病帶給動物的危害以及動物因寄生蟲病導致死亡的比例[9]。基于此，為了解佳米驢消化道內寄生蟲病的感染情況，本試驗對米脂縣某驢場內佳米驢消化道常見寄生蟲病病原進行了調查和種屬的鑒定、歸類，檢測、鑒定其常見寄生蟲優勢種蟲、感染率及感染強度等，以期為降低寄生蟲病在佳米驢消化道的流行和發生提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 儀器與試劑

BA400Digital 生物顯微鏡（麥克奧迪實業集團有限公司）、BCD-209S/E 冰箱（海信容聲（廣東）冰箱限公司）；載玻片、燒杯、鑷子、標本袋、電子天平等。

氯化鈉（批號為20100324）購自天津市瑞金特化學品有限公司；氫氧化鈉（批號為20190104）購自天津市科密歐化學試劑有限公司。

1.1.2 樣品采集

隨機采取米脂縣某驢場佳米驢新鮮糞便樣品30 g 左右，將所采的樣品放入干凈透明的一次性封口袋中進行標記編號，總計采集了32份佳米驢糞便，其中成年和幼年佳米驢各16份。采回后進行顯微鏡蟲卵檢查，未檢查完的保存在4 ℃冷藏室中待檢。

1.2 試驗方法

1.2.1 飽和食鹽水漂浮法

取少量佳米驢糞便樣品，將其置于干凈的青霉素小瓶內，加入適量飽和食鹽水，用鑷子將糞便搗碎，攪拌均勻。之后加入少量飽和食鹽水使液面形成半球形，用小鑷子夾去上清液雜質。靜置15～20 min 后，用干凈載玻片輕微蘸取上清液液面，蓋上蓋玻片，置于顯微鏡下觀察。

觀察時應按照“弓”字形逐個觀察，避免漏掉或重復。觀察寄生蟲時，應該通過其內部形態特征，辨別其種類，并測定其長度、寬度。對于觀察到寄生蟲卵的樣本放回4 ℃冰箱中保存，然后進行重點觀察[10]。

1.2.2 離心沉淀法

取糞便樣品約5 g，加入清水10～15 mL，攪拌均勻，用紗布將其過濾到15 mL 離心管內，2 000 r/min 離心2 min。倒去上層液體，再加清水，用吸管吹打均勻后再離心，重復2～3 次，直到清液清亮為止。倒掉上層液體，留下沉淀物2倍的液體量，用吸管將剩下的沉淀物吹打均勻，取1滴滴到載玻片上，在顯微鏡下觀察[11]。

1.2.3 蟲卵計數方法

本試驗采用斯陶爾氏法進行卵囊計數：在自行標記為56、60 mL兩個刻度的小三角燒瓶中加入56 mL 0.4%氫氧化鈉水溶液，再加入4 g待檢糞便樣品，使液面與60 mL處平齊；再加10個小玻璃珠，蓋上橡皮塞，充分振蕩，使糞便完全破碎混勻，之后使用吸管吸取0.15 mL 糞汁滴于載玻片上，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下進行蟲卵的計數。

計數時要按照“弓”字形逐個視野計數，以免漏掉或者重復計算，將觀察后所得到的蟲卵數乘以100，即為1 g 糞便中含有的卵囊。為使試驗數據更加精確，本試驗將每份糞便樣品檢查3 個玻片，將3 個玻片上卵囊數平均后乘以100作為每克糞便中所含的卵囊數（OPG）值[12]。

1.2.4 蟲卵鑒定方法

顯微鏡下觀察蟲卵的形態結構特征，依據蟲卵的形態、大小、顏色等形態特點，參照文獻[13]進行種類鑒定。

1.3 數據統計與分析

試驗數據采用SPSS 統計學軟件進行差異性分析，LSD法進行多重比較。結果以平均值表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 佳米驢寄生蟲檢出情況

檢測結果顯示，32份佳米驢糞便樣本中檢出其消化道存在3種寄生蟲感染：馬圓線蟲、毛細線蟲和馬副蛔蟲。佳米驢消化道寄生蟲蟲卵鏡檢結果見圖1，3種寄生蟲的基本形態見表1。

2.2 佳米驢消化道寄生蟲感染率

通過對蟲卵進行鑒定，發現佳米驢消化道內主要有馬圓線蟲、毛細線蟲和馬副蛔蟲3 種寄生蟲，總感染率達到100%。其中，18 份樣品存在混合感染，混合感染率為56.25%，混合感染的種類最多為3種。成年和幼年佳米驢馬圓線蟲感染率均較高。

2.3 佳米驢消化道不同寄生蟲感染率（見表2）

由表2可知，佳米驢馬圓線蟲、毛細線蟲和馬副蛔蟲感染率分別為56.25%、46.88%和50.00%。成年佳米驢3 種寄生蟲的感染率均顯著高于幼年（P＜0.05）。

2.4 佳米驢消化道不同寄生蟲感染強度（見圖2）

圖2 佳米驢消化道寄生蟲感染強度Fig.2 Infection intensity of different parasites in alimentary canal of Jiami donkey

由圖2可知，成年佳米驢馬副蛔蟲、毛細線蟲、馬圓線蟲OPG值分別為266、234、634個/g；幼年佳米驢馬副蛔蟲、毛細線蟲、馬圓線蟲OPG 值分別為299、170、571 個/g。成年佳米驢和幼年佳米驢馬圓線蟲感染強度均較強。

3 討論

本研究采集了32頭成年和幼年佳米驢糞便進行檢測，結果顯示，所有樣本均檢出寄生蟲，說明佳米驢消化道內寄生蟲感染情況比較嚴重，應引起廣泛關注。

李斌等[15]研究發現，馬圓線蟲、毛細線蟲、馬副蛔蟲為南疆地區驢消化道的優勢蟲種。卜艷珍等[16]對河南省34 頭驢的體內圓線蟲種類進行了調查與分析，共發現了22種圓線蟲，總感染率為100%；且感染病例中大多數是多種圓線蟲混合感染，同一頭驢腸道中混合感染的寄生蟲種類最多可達15種。本試驗共發現1種圓線蟲（馬圓線蟲），其感染率為56.25%，佳米驢消化道內也只有馬圓線蟲與毛細線蟲和馬副蛔蟲的混合感染，未出現圓線蟲之間的混合感染，與卜艷珍等[16]的結果有所不同。卡麗比努爾·爾肯[17]調查了南疆254 頭驢的糞樣，發現驢消化道感染的寄生蟲有毛細線蟲、球蟲、馬圓線蟲和馬副蛔蟲，其中馬圓線蟲的感染率和感染強度均較強。本試驗中發現的寄生蟲有馬圓線蟲、毛細線蟲和馬副蛔蟲，成年佳米驢和幼年佳米驢的馬圓線蟲感染率和感染強度均較強，與卡麗比努爾·爾肯等[17]的結果非常相似。本研究中，成年佳米驢馬副蛔蟲比幼年佳米驢更易感，與趙璐等[18]的調查結果相反。本試驗中并未發現球蟲，與卡麗比努爾·爾肯等[17]的結果不同。造成這些結果差異的原因可能是地理位置不同，也有可能是本試驗樣品數較少，無法更加全面地觀察寄生蟲的感染情況。

本試驗發現的3 種寄生蟲中，馬圓線蟲蟲卵不需要中間宿主，在外界環境下發育為感染性第三期幼蟲，之后經口感染宿主；毛細線蟲蟲卵中間宿主為蚯蚓，佳米驢吞食含第二期幼蟲的蚯蚓后被感染，蟲體在其體內逐漸發育為成蟲；馬副蛔蟲蟲卵也不需要中間宿主，在外界環境下發育為感染性幼蟲，再經口感染。由于不同蟲卵感染途徑不同，必須采取綜合的預防策略，對不同蟲種采取不同的防治措施。針對馬圓線蟲的感染，應采用抗線蟲藥品，對驢舍內馬圓線蟲進行定期驅蟲；針對毛細線蟲的感染，應搞好驢舍的衛生管理，及時清除糞便并進行發酵處理以殺滅蟲卵，感染比較嚴重的地區可進行預防性驅蟲；針對馬副蛔蟲的感染，應確保草料、飲水等衛生，糞便堆積發酵，定期消毒，以減少驢消化道內寄生蟲感染的危害。

4 結論

本研究結果顯示，佳米驢消化道內存在包括馬圓線蟲、毛細線蟲和馬副蛔蟲等3種寄生蟲感染，無論是成年佳米驢還是幼年佳米驢，馬圓線蟲的感染率均最高（成年佳米驢感染率為75.00%，幼年佳米驢感染率為37.50%），毛細線蟲的感染率均最低（成年佳米驢感染率為62.50%，幼年佳米驢感染率為31.25%）；成年佳米驢和幼年佳米驢馬圓線蟲感染強度均最強（成年佳米驢為634個/g，幼年佳米驢為571個/g）。因此，養殖過程中應重視預防馬圓線蟲感染，定期開展驅蟲，從而降低馬圓線蟲對佳米驢的危害。