新出現的白雛雞孵化疾病綜述

文│張廣才 （山東省博興縣畜牧獸醫服務中心）

當種蛋被病原體感染時可能會影響孵化，通常會導致孵化率降低或胚胎缺陷（如新生仔雞矮小）。孵化疾病存在兩種傳播途徑，垂直傳播是病原體從親代傳給種蛋和受精卵，偽垂直傳播則發生在蛋殼表面沾染有受污染的糞便，使病原體滲透到種蛋中。已知有幾種病原體會從親代傳給發育中的胚胎，如白痢沙門氏菌和雞傳染性沙門氏菌、某些支原體、禽白血病病毒、禽腦脊髓炎病毒、禽腺病毒和雞星狀病毒（chicken astrovirus）。白雛雞孵化疾病是最近出現的一種主要影響肉雞雛雞和胚胎的疾病，在世界各地都有報道，中東、挪威、瑞典和法國等流行率更高。這種疾病會導致胚胎嚴重虛弱，從而阻止孵化，或者雛雞在孵化后只能短暫存活，常伴有特征性的白色絨毛。2006年在芬蘭1個肉雞飼養場中首次將白雛雞孵化疾病與雞星狀病毒聯系起來，這批雞的后代異常蒼白，因此被稱為“白雛雞”。

一、臨床病癥

通常蛋雞群感染沒有明顯的臨床病癥，可能出現3%～15%的短暫性產蛋量降低，但這只在部分雞群中觀察到。中晚期胚胎死亡和孵化率降低是繁殖雞群感染后2～3周感染白雛雞孵化疾病的第一個明顯臨床病癥。在芬蘭母雞通常在30～40周齡感染，在加拿大受感染的雞群為27～57周齡。在芬蘭的感染病例中，孵化率下降通常持續約2周，直到成年雞血清產生抗體，防止病毒傳播后孵化率逐步恢復。不同報道中孵化率下降水平不一，芬蘭孵化率平均下降29%。

肝被認為是受感染雛雞中最常見的感染器官之一，外觀呈綠色和斑駁。對晚期死亡胚胎的觀察發現肝組織中的粒細胞團塊以及含有發炎血管的壞死組織區域，導致血管炎和膽管腫大。雞星狀病毒可在多個器官中檢測到，主要在腎、肝、腸道和卵黃囊，還能在肺部、胰腺、脾以及蛋黃中檢測到，但在心臟、大腦和胃中檢測到的頻率較低。盡管與白雛雞孵化疾病相關的雞星狀病毒毒株尚未在受感染雞的血液中被報道，但這些毒株很可能也在血液中循環，導致系統感染。除雞星狀病毒外，還有其他病原體能產生與白雛雞孵化疾病相近的臨床癥狀，如矮小、產蛋量和孵化率下降、死亡胚胎增加，如傳染性支氣管炎病毒、傳染性喉氣管炎病毒、新城疫病毒、副粘病毒-2和副粘病毒-3、禽腺病毒和某些支原體，因此對出現臨床癥狀的雛雞進行病原體檢測十分重要。

蒼白鳥綜合征（p a l e b i r d syndrome）是20世紀70年代和80年代經常報道的一種吸收不良和腸道疾病，最常見于1～6周齡的肉仔雞，典型的臨床癥狀有虛弱、飼料轉化率低、糞便中的飼料未消化、新生仔雞矮小且羽毛、蛋、腿和喙缺乏色素沉著。與蒼白鳥綜合征相關的病原體是黃曲霉毒素、球蟲感染和呼腸孤病毒等，并與胃腸道中類胡蘿卜素等營養物質的吸收不良有關，類胡蘿卜素是鳥類羽絨和蛋黃色素沉著的原因。盡管臨床癥狀有一些相似之處，白雛雞孵化疾病與蒼白鳥綜合征是兩種不同的疾病。蒼白鳥綜合征與產蛋量減少和孵化率降低無關聯。孵化后存活下來的受感染雛雞可以通過其獨特的白色羽毛來識別，與未受感染的雛雞相比，它們通常很虛弱和矮小。雛雞羽毛中缺乏黃色色素可能是由于病毒干擾導致母雞體內的類胡蘿卜素轉移到蛋中的減少，或者更可能是由于雞蛋中存在的雞星狀病毒阻止了胚胎從蛋黃中吸收類胡蘿卜素。白雛雞孵化疾病的臨床癥狀的潛在機制尚不清楚。

二、傳播途徑

在肉雞場中檢測到多種高度可變的雞星狀病毒毒株，它似乎是全球肉雞群中最常見的腸道病毒之一，病毒常通過糞口途徑傳播。病毒通過糞便排出，糞便主要污染家禽飼養場的供水系統，未感染的家禽飲用而發生傳播。由于雛雞在孵化時會脫落高水平的雞星狀病毒，在死在殼中的胚胎中檢測到雞星狀病毒，因此人們普遍認為引起白雛雞孵化疾病的雞星狀病毒毒株是通過垂直傳播方式傳播的。

病毒具體的垂直傳播方式尚未得到證明，到底是在卵子發育過程中從親代得到病毒而傳播，還是在卵子和精子受精過程中傳播。當未成熟的卵子在母雞生殖道內被認為更可能發生病毒傳播。因為這樣將導致病毒傳播到卵黃囊中，從而使病毒可能進入胚胎，感染腸道和其他組織，從而損害其生長，導致新生仔雞虛弱，并能影響孵化率。如果病毒偽垂直傳播，在產卵時從糞便中被吸收到卵子中，這樣不會導致產蛋量減少，因此偽垂直傳播方式相對不可信。

三、防控和檢測

目前白雛雞孵化疾病的控制主要通過保持良好的雞群生物安全來減少病毒傳播和感染的發生。與其他病原體相比，雞星狀病毒對常用的消毒劑具有相對的抵抗力，因此需要對禽舍進行全面的衛生處理，包括墻壁、喂食器、風扇和供水系統，以有效清除病毒。使用10%的漂白劑作為消毒劑并不能成功地將病毒從禽舍中完全清除，建議使用90%的甲醇、1.5%的衛可（virkon）或0.3%的甲醛。由于目前的生物安全方法在預防雞群感染方面并非完全有效，因此，給種雞接種疫苗將是一種有效的控制方法，可以防止全球范圍內的經濟損失，但疫苗研究尚處于實驗室階段。

最初，雞星狀病毒感染的檢測是通過電子顯微鏡進行的，以確定病毒粒子的特征性六角星形，這種形狀被希臘詞“Astron”所描述，病毒的名字就是從這個詞派生出來的。但雞星狀病毒的六角星形是pH依賴性的，而且雞星狀病毒的分離緩慢，一些雞星狀病毒毒株很難在細胞中培養，病毒鑒定也依賴于熟練的電子顯微鏡操作。因此，病毒檢測多采用分子檢測技術，RT-qPCR的應用可用于量化雛雞樣本中的雞星狀病毒，如果樣本中存在足夠的雞星狀病毒基因，則可以進行常規PCR。對7kb的整個短基因組進行測序和比較，可以使用下一代測序（NGS）技術輕松實現。

四、雞星狀病毒遺傳多樣性

雞星狀病毒是星狀病毒屬星狀病毒科的一種鳥類星狀病毒，與許多動物幼崽的腹瀉、腸炎和生長問題有關，如野生鳥類、鴨、雞和大多數哺乳動物。鳥類星狀病毒在歷史上是根據其宿主命名的，如鴨星狀病毒（duck astrovirus）。但由于星狀病毒可以跨越物種屏障感染其他物種，這一分類方案已被取代，國際病毒分類委員會根據衣殼蛋白的氨基酸序列對星狀病毒進行分類。雞星狀病毒是一種小型、圓形、無包膜、RNA病毒。雞星狀病毒的基因組，包括那些導致白雛雞孵化疾病的毒株，長度約為7.5kbp，基因組含有3個開放閱讀框（ORF 1a、ORF 1b和ORF 2）。不同雞星狀病毒毒株的大多數分子特征是基于ORF 2衣殼前體的核苷酸或氨基酸序列，因為這是雞星狀病毒基因組最高變的區域。由于衣殼氨基酸序列的變化，雞星狀病毒分為兩個不同的血清群，A血清群（亞群Ai、Aii和Aiii）和B血清群（亞群Bi、Bii、Biii和Biv），A血清群和B血清群在血清學上是不同的。根據ORF 2序列，導致白雛雞孵化疾病的雞星狀病毒毒株主要是Biv亞群。Biv亞群高度保守，其成員共享95%～99%的氨基酸同源性。

B血清群的雞星狀病毒毒株之間易發生重組，從而產生一些新的毒株。使用部分ORF 2序列數據對毒株進行分類可能出現錯誤，加拿大安大略省白雛雞孵化疾病病例中鑒定的14株分離株（登錄號為MT789785）被錯誤歸類為Bii亞群，但這些毒株更可能屬于Biv亞群。這些分離株的臨床病癥有雛雞和胚胎發育遲緩，新生仔雞虛弱，羽毛呈白色，卵黃囊殘留，頸部和頭部水腫，皮下水腫，肝腫大且有綠色斑點。而來自波蘭的分離株（登錄號為KT886453）被分配到Aiii亞群，感染該分離株后，母雞的孵化能力和雛雞的奔跑能力下降，但與其他毒株相比，出現特征性白色絨毛的雛雞較少，孵化率的降低程度也較輕。該分離株很可能是一種重組毒株，由一個Bii亞群主親本和一個Biv亞群副親本在ORF 1a和ORF 1b之間組成。雞星狀病毒的ORF 2編碼衣殼表面刺突結構域，被懷疑是致病性、嗜性和免疫原性的主要決定因素，ORF 2中編碼雞星狀病毒衣殼表面刺突結構域的氨基酸序列被認為與宿主細胞附著有關。ORF 2中編碼雞星狀病毒衣殼表面刺突結構域的氨基酸序列信息有助于開發泛B血清群雞星狀病毒疫苗，該疫苗可能被證明能有效預防由B組血清群其他亞群毒株引起的白雛雞孵化疾病。