燕麥干草不同飼喂水平對牦牛日增重、血液生理生化指標及瘤胃發酵參數的影響

吳刀知才讓，裴成芳，馬志遠，劉紅山，曹旭亮，劉虎，周建偉*

（1. 蘭州大學草地農業科技學院，草種創新與草地農業生態系統全國重點實驗室，甘肅 蘭州 730000；2. 武威市天祝藏族自治縣畜牧技術推廣站，甘肅 武威 733200；3. 蘭州大學生態學院，甘肅 蘭州 730000）

作為青藏高原的當家畜種，牦牛在衣、食、住、行等方面為藏族同胞提供了最基本的生活物資、生產資料和經濟來源。目前，全球牦牛存欄量約為1700 多萬頭，其中90%以上分布在我國青藏高原及其毗鄰的高山草原地帶［1］。從古至今，自然放牧是牦牛生產中最普遍采用的飼養模式，而在這種“靠天養畜”的經營形式下，該畜種營養物質攝入幾乎完全依賴于天然草地的牧草供給。然而，受“高海拔、低溫、強紫外線”等惡劣環境因素的影響，青藏高原植物生長期極短，每年僅有120 d 左右，這就造成了該地區牧草生物量與營養物質含量都會隨季節變化而呈現出巨大波動［2］。資料顯示，青藏高原天然草地夏季的生物量峰值達4.58 t·hm-2，而冬季的極值僅為0.25 t·hm-2［3］；夏季的牧草粗蛋白含量為15.38%，而冬季卻僅有6.81%［4］。此外，借助酸不溶灰分法估測得到2 歲放牧牦牛在返青期、青草期和枯黃期的牧草攝入量分別為185、111 和99 g·kg-1·BW-0.75［5］，其采食量季節性差異非常大。上述的這些研究表明，放牧牦牛不但采食量隨著牧草的枯榮交替而發生顯著變化，而且也可猜測其在冷季將同時遭受能量和蛋白質營養的雙重脅迫。正因如此，在自然放牧條件下，由于冷季飼料資源短缺，牦牛將通過動員機體儲存的脂肪和蛋白質營養來維持正常的生理代謝功能，從而在整個冷季也會導致其自身遭受25%左右的掉膘減重［6］。這是傳統養殖模式下牦牛產業普遍存在的生產瓶頸問題，也是造成該牲畜生長周期長、速度慢、效率低和收益差的根本原因之一。由此可見，采食量和牧草營養水平在放牧牦牛體重正負消長、生產效率發揮和產業健康發展中均起到舉足輕重的作用。

研究表明，反芻動物瘤胃微生物群落、多樣性和功能受其采食量的影響［7］，而采食量又直接決定了家畜能量和蛋白質等營養物質的攝入量。再者，瘤胃微生物發酵生成的揮發性脂肪酸和同化合成的菌體蛋白分別又是宿主動物最重要的能量和氨基酸來源［8］。另外，血液生理生化參數是表征動物營養水平、健康狀況以及生長性能的關鍵指標［9］。在生產實踐中，放牧牦牛體重發生“夏壯、秋肥、冬瘦、春乏”之現象主要與草地生物量和牧草營養物質含量密切相關，而燕麥（Avena sativa）是青藏高原地區最常見的優質飼草，其養分含量與天然牧草相當［10-11］?；诖?，本研究擬通過燕麥干草不同飼喂水平來模擬傳統養殖模式下牦牛采食量季節性變化的生產現狀，探究其生長性能、瘤胃發酵以及血液生理生化指標對營養物質攝入量的響應規律，以期為高寒牧區反芻家畜的營養調控、健康管理、高效生產和產業可持續發展提供理論依據與技術指導。

1 材料與方法

1.1 試驗時間與地點

本試驗于2020 年10 月至2021 年3 月在甘肅省武威市天祝藏族自治縣安遠鎮烏鞘嶺蘭州大學牦牛試驗站（102°49′38″ E，37°12′23″ N，海拔3154 m）開展。

1.2 試驗設計與動物

參考Bailey 等［12］的4×4 拉丁方試驗設計，選取3.5 歲、體重［（203.0±6.0） kg］和體況相近的健康去勢牦牛6 頭，額外的2 頭試驗動物作為其中一列拉丁方序列的生物學重復。試驗飼糧為單一的燕麥干草顆粒，購自甘肅省肅南裕固族自治縣百盛現代農牧業開發有限公司，其化學成分與營養水平見表1。在正式試驗開始前，對所有試驗牛進行14 d 的飼養試驗以測定其自由采食量（voluntary intake， VI）。參考Wang 等［13］的研究方法，將單頭牦牛的最低自由采食量作為標準，即VI=4.40 kg DM·d-1，以保證投喂的飼糧均能被采食完全。為了模擬傳統放牧條件下牦牛各季節的采食量及其變化規律［11］，本研究將燕麥干草飼喂水平設定為0.45、0.60、0.75 和0.90 VI，其分別相當于0.66、0.88、1.10 和1.32 倍生長期牦牛的代謝能維持需要量［14］。整個拉丁方飼養試驗總共包括4 期，每期28 d，其中每期1～21 d 為飼糧適應期。

表1 燕麥干草化學成分與營養水平（風干基礎）Table 1 The chemical composition and nutrients content of oat hay （air-dry basis）

1.3 飼養管理

在試驗開始前，對所有牦牛注射伊維菌素以進行驅蟲處理，同時對圈舍、代謝籠及飼喂用具進行清潔和消毒。試驗期間及時清理試驗牛的糞尿排泄物，每天對圈舍進行一次徹底打掃并進行定期消毒處理。試驗牦牛單欄飼養，每頭牛每天的飼糧平均分成2 份后，分別在8：00 和18：00 進行投喂，整個試驗期自由飲水。

1.4 樣品采集與處理

1.4.1 飼料樣品 在飼養試驗正試期，每天采集用于飼喂試驗牦牛的燕麥干草顆粒100 g，并按試驗期將樣品混合后裝于自封袋中。飼料樣品在65 ℃烘箱中進行干燥，室內回潮12 h 至恒重，然后用粉碎機粉碎（FZ102， 天津市泰斯特儀器有限公司），過1 mm 篩子，裝于自封袋中，室溫保存，用于后續飼料營養成分分析。

1.4.2 血液樣品 在每期試驗第28 天晨飼前，利用穿刺法通過頸靜脈采集血液10 mL，其中2 mL 置于管壁涂有肝素鈉的真空采血管中，用于血液生理指標測定；剩余8 mL 血液裝入普通真空采血管中，于4 ℃ 靜置45 min，接著2420 r·min-1離心15 min，分離得到的上清液即是血清。利用移液槍將血清分裝于1.5 mL 離心管中，置于-20 ℃冰箱中保存，用于后續血液生化指標與激素水平測定。

1.4.3 瘤胃液樣品 在每期試驗第28 天晨飼前，利用口腔式胃管（武漢科立博牧業科技有限公司）并輔以小型真空泵的方法進行瘤胃液樣品采集。為確保采樣迅速和樣品的均一性，該過程由一名專業技術人員完成。在每次采樣前，先用溫水清洗胃管管路、過濾頭與收集瓶等器具，以避免試驗牦牛的瘤胃液樣品交叉污染。在瘤胃液樣品采集過程中，需將最先抽出的50 mL 瘤胃液舍棄，以減少唾液所造成的影響。每頭試驗牛采集瘤胃液約100 mL，4 層紗布過濾后，立即使用pH 計（PB-10，德國賽多利斯集團）測定pH 值。取一份10 mL 的瘤胃液，加入等量的去蛋白溶液（100 g 偏磷酸和0.6 g 丁烯酸溶于1 L 蒸餾水中），用于揮發性脂肪酸（volatile fatty acid， VFA）的測定；取一份5 mL 的瘤胃液，加入等量的0.5 mmol·L-1鹽酸溶液以固定氨態氮，用于瘤胃液氨態氮的測定；處理完畢的瘤胃液樣品立刻投入液氮速凍，帶回實驗室后轉入-80 ℃超低溫冰箱保存待用。

1.5 性能測定與樣品分析方法

1.5.1 生長性能 在每期試驗開始與結束當天上午7：00，利用電子地磅對試驗牦牛逐一進行空腹稱重，并記錄體重數據，參考周建偉［15］的方法計算平均日增重（average daily gain， ADG）。

1.5.2 飼糧營養水平 參照《飼料分析及飼料質量檢測技術》［16］的方法測定飼糧中干物質（dry matter， DM）、有機物（organic matter， OM）、粗蛋白（crude protein， CP）、粗脂肪（ether extract， EE）、鈣（calcium， Ca）和磷（phosphorus， P）的含量。利用全自動氧彈量熱儀（C3000， 德國IKA）對飼料總能（gross energy， GE）進行測定。分別參照Van Soest 等［17］和Robertson 等［18］的分析方法，利用全自動纖維分析儀（A200i， 美國ANKOM）對飼料中的中性洗滌纖維（neutral detergent fiber， NDF）和酸性洗滌纖維（acid detergent fiber， ADF）含量進行測定。

1.5.3 血液生理指標 試驗牦牛的抗凝全血采集后，立即送至天祝藏族自治縣華晟醫院，采用全自動生化分析儀（BS-400， 深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司）測定血液生理指標，包括以下項目：白細胞數（white blood cell， WBC）、中性粒細胞數（neutrophil count， NEUT）、淋巴細胞數（lymphocyte number， LYM）、紅細胞數（red blood cell， RBC）、血紅蛋白（hemoglobin， HGB）、紅細胞壓積（hematocrit， HCT）、紅細胞平均體積（mean red blood cell volume， MCV）、平均血紅蛋白量（mean hemoglobin， MCH）、平均血紅蛋白濃度（mean hemoglobin concentration， MCHC）、紅細胞體積分布寬度（red blood corpuscular volume distribution width， R-CV）、紅細胞分布寬度（red blood cell distribution width， R-SD）、血小板數（platelet， PLT）、平均血小板體積（mean platelet volume， MPV）、血小板分布寬度（platelet distribution width， PDW）、血小板壓積（platelet hematocrit， PCT）。

1.5.4 血清生化指標與激素水平 采用改良氧化酶法測定牦牛血清中葡萄糖（glucose， GLU）濃度，采用Doumas 法測定血清總蛋白（total protein， TP）濃度，采用白蛋白檢測試劑（BCG 法）測定白蛋白（albumin， ALB）濃度，采用免疫濁度法測定球蛋白（globulin， GLB）濃度，采用GPO-PAP 法測定甘油三酯（triacylglycerol， TG）濃度，采用UV-GLDH 法測定尿素氮（urea nitrogen， BUN）濃度。 采用酶聯免疫吸附劑（enzyme linked immunosorbent assay， ELISA；產品號：BYE99020、BYE99015、BYE98150、BYE98314、BYE98165 和BYE98273）測定血清中游離脂肪酸（free fatty acid， FFA）、β-羥基丁酸（β-hydroxybutyric acid， BHBA）、胰島素（insulin，INS）、胰高血糖素（glucagon， GC）、瘦素（leptin）和生長激素（growth hormone， GH）濃度。以上牦牛血清生化指標和激素水平均利用試劑盒在酶標儀（SpectraMax M5， 美國美谷）上進行檢測，所用試劑盒均購自上海邦奕生物有限公司，測試程序嚴格按照說明書進行。

1.5.5 瘤胃發酵參數 參考周建偉［15］的方法采用氣相色譜法（2010 plus 系統，日本京都島津公司）測定瘤胃液揮發性脂肪酸（volatile fatty acid， VFA）。利用巴豆酸做內標，根據VFA 碳鏈長短差異而沸點不同的原理，實現VFA 各種酸的良好分離。該分析方法中所采用的毛細管柱為30.00 m×0.32 mm×0.50 μm（AT-FFAP， 美國安捷倫科技公司）；氣相色譜進樣器溫度為200 ℃；氫火焰離子化檢測器（FID）溫度為250 ℃；柱溫箱升溫程序如下：初始溫度90 ℃，以10 ℃·min-1的速率升溫至120 ℃并保持3 min；再以10 ℃·min-1的速率從120 ℃升溫至180 ℃，同時在此溫度下保持5 min。瘤胃液氨態氮濃度參照Hristov 等［19］的方法進行測定。

1.6 數據處理

試驗數據通過Excel 2016 進行初步整理后，采用SAS 9.4 軟件（SAS Inst. Inc.， Cary， 美國）中MIXED 模塊進行統計分析。統計模型為：Y=μ+FL+A+P+E，其中Y表示因變量，μ表示平均值，FL表示飼喂水平，A表示試驗動物，P表示試驗期，E代表標準誤，飼喂水平為固定因子，試驗動物與試驗期為隨機因子。利用多項式正交對比來檢驗燕麥干草飼喂水平對本研究中試驗牦牛所測定指標的影響。當P＜0.05 時，表示處理組間差異顯著，0.05≤P＜0.10 表示有趨勢，P≥0.10 表示不受試驗處理因素影響。

2 結果與分析

2.1 牦牛日增重與能量維持需要

由圖1 可知，牦牛ADG 隨著燕麥干草飼喂水平升高而線性增加（P＜0.001）；在采食0.45 和0.60 VI 飼糧時，牦牛體重呈負增長，這與試驗飼糧設計需求相吻合。牦牛ME 攝入量與ADG 呈較強的正相關關系，通過線性回歸，可得到ME 攝入量（X， MJ·kg-1·BW-0.75·d-1）與ADG（Y， g·d-1）的數學模型，即Y=973X-513 （R2=0.727； 圖2）。利用該數學模型，設定ADG為0 g·d-1時，即可估測出生長牦牛的維持代謝能需要量為0.527 MJ·kg-1·BW-0.75·d-1，其也相當于燕麥干草采食量（DM）為50.7 g·kg-1·BW-0.75·d-1。

圖1 燕麥干草飼喂水平對牦牛日增重的影響Fig.1 Effect of feed level of oat hay on average daily gain in yaks

圖2 牦牛代謝能攝入量與日增重的線性回歸方程Fig. 2 The linear regression between metabolic energy intake and average daily gain in yaks

2.2 血液生理指標

如表2 所示，隨著燕麥干草飼喂水平的升高，血液中RBC 線性減少（P＜0.05），PLT 有增加趨勢（P=0.05），而其余血液生理指標均不受影響（P≥0.10）。

表2 燕麥干草飼喂水平對牦牛血液生理指標的影響Table 2 Effect of feed level of oat hay on blood physiological parameters in yaks

2.3 血清生化參數

由表3 可知，隨著燕麥干草飼喂水平的升高，牦牛血清BUN 濃度線性增加（P＜0.05），而TP、ALB 和GLB 濃度均不受影響（P≥0.10）。牦牛血清GLU 濃度隨著其采食量的升高而線性降低（P＜0.05），BHBA 濃度呈線性降低的趨勢（P=0.063），而FFA和TG 濃度在各處理組間無顯著差異（P≥0.10）。在牦牛血清激素水平方面，GH 濃度隨著飼喂水平升高而線性增加（P＜0.05），INS 濃度也呈線性增加的趨勢（P=0.091），但 GC 和瘦素濃度無變化（P≥0.10）。

表3 燕麥干草飼喂水平對牦牛血清生化與激素指標的影響Table 3 Effect of feed level of oat hay on serum biochemical and hormone parameters in yaks

2.4 瘤胃發酵參數

隨著燕麥干草飼喂水平的升高，瘤胃液pH 線性降低（P＜0.05；表4），TVFAs、乙酸和丁酸濃度線性增加（P＜0.05），丙酸濃度具有線性增加的趨勢（P=0.093），而NH3-N、Iso-VFAs 濃度和乙酸/丙酸不受影響（P≥0.10）。

表4 燕麥干草飼喂水平對牦牛瘤胃發酵參數的影響Table 4 Effect of feed level of oat hay on rumen fermentation parameters in yaks

3 討論

3.1 燕麥干草不同飼喂水平對牦牛日增重的影響

基于適應性強、生物量大和營養豐富等特征，燕麥草在青藏高原受到農牧民的廣泛青睞并得到了大面積種植，其約占該地區栽培牧草總量的70%以上［20］。資料顯示，燕麥干草是高寒牧區牦牛幼畜、孕畜和病畜冷季最常用的補飼飼草，其能量與蛋白質等養分含量和初秋時期的天然牧草營養水平相當［10-11］。飼料中蛋白質與能量物質是影響反芻動物機體生長發育和瘤胃發酵功能的重要因素［21］。若家畜養分攝入不足，則會動員分解自身所儲存的脂肪、蛋白質等機體組織，從而造成其掉膘減重［22］。在本研究中，試驗牦牛的蛋白質與能量攝入量隨著燕麥干草飼喂水平升高而線性增加，進而促進了其生長性能的發揮，這與前人在奶牛、水牛、綿羊和山羊上所得到的結果相似［23-27］。根據本試驗設計的要求，利用燕麥干草飼喂水平模擬了放牧牦牛四季的牧草采食量，結果顯示其體重所展現的變化規律與傳統放牧模式下較為相似，這表明該研究已經達到了試驗預期所要模擬的目標效果。本研究通過牦牛ADG 與ME 攝入量的擬合方程估測得出其代謝能維持需要量為0.527 MJ·kg-1·BW-0.75·d-1，這與Ding 等［11］在放牧牦牛上的研究結果相近（0.545 MJ·kg-1·BW-0.75·d-1），但顯著高于胡令浩等［14］在生長期牦牛上獲得的數據（0.458 MJ·kg-1·BW-0.75·d-1），造成這種差異的原因可能與試驗牦牛的年齡、飼糧類型、養殖形式、研究方法等因素有關。

3.2 燕麥干草不同飼喂水平對牦牛血液生理指標的影響

哺乳動物血液主要由血細胞和血漿兩大部分組成，前者按功能可分為白細胞、紅細胞和血小板3 種類型。白細胞是血液中無色有核血細胞的總稱，包括單核細胞、中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞和淋巴細胞，其在動物機體損傷治愈、病原入侵抵御和疾病免疫應答等方面發揮重要功能［28］。在本研究中，牦牛血液WBC 為（7.71～8.78）×109個·L-1，均在其正常數值范圍內［29］，且不受飼喂水平的影響，這說明各試驗組牦牛的健康狀況良好。血液中RBC、HGB 和HCT 可以直接反映動物機體運輸氧氣和二氧化碳的能力。資料顯示，牛屬動物血液中RBC、HGB、HCT 正常范圍分別為（5～10）×1012個·L-1、80～150 g·L-1和20%～40%，而本研究中牦牛的上述指標也均在該正常范圍內。然而，隨著燕麥干草飼喂水平的升高，牦牛血液中RBC 線性降低，這與郭亞敏等［30］在綿羊上的研究結果相一致，其原因可能是在高采食量條件下，家畜體內的營養物質代謝活動增強，促進了機體血液循環速度，加快了對氧氣的交換效率［31］，進而使得在單位時間內運輸一定量氧氣時所需要調用的RBC 減少。血小板是存在于哺乳動物血液中的有形成分之一，也是最小的血細胞，其在凝血與止血功能上發揮重要作用，同時也參與炎癥反應、免疫應答和機體抗寒等生理調控過程［32-33］。據報道，夏季放牧牦牛血液中PLT 顯著高于冬季［34］，但是證據顯示動物PLT 會隨著環境溫度降低而增加［33］。據此推測，牦牛夏季較冬季具有更高的PLT 可能與夏季草原牧草豐茂從而導致其更高的養分攝入量有關，這與本研究中牦牛PLT 隨著飼喂水平的升高而增加的試驗結果相似。此外，當動物采食量增加時，其體內營養物質儲備將更加充沛，機體在耐寒、抗炎和免疫等方面的能力會隨之得到提升，因而這也間接說明了血液PLT 隨采食量增加的可能原因。

3.3 燕麥干草不同飼喂水平對牦牛血液生化指標和激素水平的影響

血清代謝物和激素是常被用于評估家畜生理功能、營養水平和健康狀況的關鍵生物標志物［26］。蛋白質是血清代謝物的重要組成部分，在臨床上血清TP 一般被用于衡量肝細胞蛋白質合成功能和腎臟濾過作用［35］，同時也能在一定程度上反映動物對飼糧蛋白質的消化、吸收和利用狀況［36］。血清TP 主要由ALB 和GLB 兩部分所構成。ALB 約占血清TP 的35%～50%，其在維持穩態與滲透壓、營養物質轉運和去除自由基等方面起到重要作用；而GLB 在調控機體炎癥反應和抵御病理損傷中發揮關鍵功效［26］。在本研究中，牦牛血清TP、ALB 和GLB 濃度不受飼喂水平的影響，且均在正常數值范圍內［37］，說明試驗動物肝臟功能和機體健康狀況良好。哺乳動物體內血清BUN 主要由氨經肝臟鳥氨酸循環合成而來，是蛋白質等含氮化合物的代謝終產物，其濃度的高低可以間接反映機體蛋白質與氨基酸的平衡狀況。一般而言，BUN 與動物蛋白質攝入量成正比，而其濃度越高，飼糧蛋白質利用效率越低［25，38］。在本試驗中，牦牛蛋白質攝入量隨著飼喂水平升高而增加，故BUN 濃度也隨之升高。血清GLU 是生物體最重要的供能物質，因而GLU 濃度是衡量動物機體能量平衡狀況的關鍵指標。研究表明，反芻動物血液中85%的GLU 來自肝臟糖異生［21］，而其底物主要由瘤胃發酵所生成的丙酸來提供。然而，當動物處于饑餓或能量負平衡狀態下時，其可通過動員脂肪和肌肉組織來實現氧化供能以維持機體能量需求［39］。雖然本研究中燕麥干草飼喂水平對TG 和FFA 無影響，但先前的研究表明，隨著飼糧能量水平的升高，反芻動物瘤胃液中丙酸含量隨之增加，進而會導致血糖濃度升高［40］。在本試驗中，雖然牦牛瘤胃液丙酸濃度隨著燕麥干草飼喂水平的升高有增加的趨勢，但是GLU 濃度卻線性降低，這與Liu 等［26］給牦牛飼喂能量梯度飼糧的研究結果相同，其原因可能是：1）在能量負平衡時，動員分解體組織所形成的非糖物質（例如乙酰乙酸、β-羥基丁酸及丙酮等）分擔了GLU 的供能任務，從而使機體在能量應激時仍然能夠維持正常的血糖濃度；2）INS 在維持機體血糖穩態方面起到關鍵的調控作用，而牦牛血液中INS 濃度隨著燕麥干草飼喂水平升高而呈增加的趨勢，因此這也會造成血糖濃度隨之降低。BHBA 作為家畜血液中酮體的主要成分，其濃度的高低可以反映機體的能量平衡狀態。據報道，當反芻動物血清BHBA 濃度大于1.0 mmol·L-1時，表明機體處于能量負平衡狀態［41］。然而在奶牛上的研究發現，當血清BHBA 為0.56～0.71 mmol·L-1時，即使其濃度小于1.0 mmol·L-1，這些動物也發生了嚴重的掉膘減重現象［42］，本試驗結果與此相似，即牦牛因采食量不足而發生了體重負增長，但是其血清BHBA 濃度依然維持在較低水平。

動物的生長不僅會受到遺傳背景、營養攝入、外界環境等諸多因素的影響，還會受到自身激素水平的調控［43］。INS 是衡量機體葡萄糖代謝和蛋白質合成的重要指標，其能夠增強細胞對GLU 的吸收以及促進氨基酸合成體蛋白［44］。本試驗中，隨著燕麥干草飼喂水平的升高，INS 濃度有上升趨勢，這表明高水平養分攝入對機體糖酵解途徑有促進作用［43］。GC 和瘦素與機體的脂肪代謝密切相關，其中GC 濃度的升高有助于機體脂肪組織的降解，從而提高GLU 的濃度［45］，而血清瘦素濃度的升高則是機體脂肪沉積較多的表現［44］。本研究中，燕麥干草飼喂水平并未對GC 和瘦素濃度產生影響，這可能與激素脈沖式、階段性的釋放規律有關［46］。此外，激素調節機制在應對不同水平養分攝入時，也會使機體內激素濃度保持在相對穩定的水平［47］。GH 是由哺乳動物腦垂體前葉分泌的一種肽類激素，其對動物生長發育起到重要調節作用。研究表明，牦牛血液GH 濃度與生長速率呈正相關關系［48］，與此類似，本試驗也發現牦牛血清GH 濃度和ADG 均隨著飼喂水平的升高而線性增加。

3.4 燕麥干草不同飼喂水平對瘤胃發酵參數的影響

瘤胃pH 主要受飼糧類型、采食水平、唾液分泌、有機酸積累、食糜流速等因素的共同影響［49-50］，其是直觀反映瘤胃內環境以及用于評價瘤胃健康狀況的重要指標之一。研究表明，反芻動物瘤胃微生物群落組成、結構及其功能均受pH 的調控［50］，例如纖維分解菌對pH 變化較為敏感，其最佳范圍為6.2～7.2［16］。當瘤胃pH 低于6.2 時，纖維分解菌生長將會受到抑制［51］，而淀粉分解菌卻在低pH 時仍然能展現出較高的生物活性［52］。在本研究中，牦牛瘤胃pH 為6.78～7.15，處在纖維分解菌最適的生長范圍內，這可能與試驗飼糧由富含纖維類碳水化合物的單一燕麥干草組成有關。NH3-N 是瘤胃微生物生長和增殖的重要氮源之一，約占其合成菌體蛋白所需氮素營養的40%～68%［53］。一般而言，反芻動物瘤胃液NH3-N 濃度隨著飼糧蛋白質水平或采食量的升高而增加［54］。在本研究中，雖然試驗牦牛的氮素攝入量也隨著飼喂水平升高而增加，但是瘤胃液NH3-N 濃度卻維持相對穩定，其原因可能是：在低飼喂水平下，瘤胃中可發酵碳水化合物供應不足，微生物合成代謝過程由于缺乏碳鏈骨架而導致活性受到抑制，進而造成NH3-N 消耗量減少。TVFAs 是瘤胃微生物降解飼糧中碳水化合物所產生的代謝終產物，也是反芻動物能量的主要來源，其能夠為宿主機體提供約70%～80%的能量需求［8］。試驗牦牛瘤胃pH 隨著采食量的升高而線性降低，這主要是因為在瘤胃微生物的作用下發酵底物的增加促使生成更多的乙酸、丙酸、丁酸和TVFAs，而有機酸的積累又會進一步導致瘤胃pH 降低。然而，瘤胃液TVFAs 中各酸占比以及乙酸/丙酸均不受燕麥干草飼喂水平的影響，這表明牦牛在采食同一種飼糧時，即使采食量不一致，其瘤胃微生物區系及其發酵模式可能也都較為穩定或相似。

4 結論

通過本試驗中牦牛ME 攝入量（X）和日增重（Y）可建立數學回歸模型Y=973X-513 （R2=0.727），據此可估測得到其維持代謝能需要量為0.527 MJ·kg-1·BW-0.75·d-1。再者，牦牛血液生理生化參數與瘤胃發酵性能均在不同程度上受牧草飼喂水平的影響。因此，在青藏高原牦牛飼養過程中，應特別關注家畜采食量的季節性差異，尤其需在冷季實施合理的營養補飼策略，進而才能實現該產業的高效與可持續發展。