高寒地區(qū)藏羊口瘡病的診斷方法與科學(xué)防治分析

扎西代宗

高原藏羊口瘡病是一種常見的病毒性接觸性傳染病。為了有效防范高原藏羊口瘡病的傳播流行，養(yǎng)殖戶需要掌握該種疾病的發(fā)生流行特點，并及時采取措施進行有效的防范。通過采用疫苗接種等方法來預(yù)防和控制該病。此外，養(yǎng)殖戶還需要定期對羊群進行檢查，并及時隔離和治療病羊，以避免疾病傳播。在疫情暴發(fā)時，需要及時報告相關(guān)部門，爭取獲得及時的支持和幫助，以便在短時間內(nèi)控制病情。這種疾病會對羊的健康造成嚴重影響，導(dǎo)致牙齦、舌頭和口腔內(nèi)壁出現(xiàn)潰瘍、疼痛等癥狀。如果不及時治療，還會導(dǎo)致羊的食欲不振、體重下降、甚至死亡。了解羊口瘡疾病的流行特點是防治的關(guān)鍵。養(yǎng)殖管理期間要做到要及時發(fā)現(xiàn)病例，對疑似羊口瘡病例進行檢疫隔離，避免病情擴散。同時要采取科學(xué)的診斷方法，如采集病羊的血液和口腔分泌物進行實驗室檢測，確診病情，然后制定針對性的治療措施，如使用消炎藥物、給予營養(yǎng)補充劑等，幫助羊恢復(fù)健康。

一、流行病學(xué)

1、病原學(xué)特征

羊傳染性膿皰病毒，又稱野痘病毒，是一種雙鏈DNA 病毒，屬于痘病毒科的真痘病毒亞科牛痘病毒屬。該病毒是引起家畜類動物和人類口部、面部、手部等處皮膚感染的主要病原體之一。羊傳染性膿皰病毒主要通過直接接觸感染，感染后在皮膚組織中引起小水泡和皰疹樣損傷，這些損傷隨著時間推移會逐漸形成膿皰，比較容易發(fā)生二次感染和繼發(fā)感染。感染后病原體在宿主體內(nèi)可產(chǎn)生持久性免疫效應(yīng)。該病毒的直徑約為250 納米，是一種球形的病毒顆粒。在電鏡下觀察，可以看到它具有一個球形的外殼和一個內(nèi)含DNA 的核心。羊傳染性膿皰病毒的基因組由雙鏈DNA 組成，其長度為約1300 個堿基對。該病毒基因組中包含了數(shù)十個編碼蛋白質(zhì)的基因，包括結(jié)構(gòu)蛋白、非結(jié)構(gòu)蛋白、酶等多種類型的蛋白質(zhì)。相對于其他病毒，具有較強的熱穩(wěn)定性。該病毒能夠在60℃下存活長達30 分鐘，對于消毒劑也有一定的抵抗力。

2、發(fā)病機理

羊傳染性膿皰病毒感染引發(fā)的羊口瘡病的致病機理主要涉及到以下方面：首先，侵入宿主細胞。羊傳染性膿皰病毒感染宿主后，首先通過病毒表面的蛋白質(zhì)與宿主細胞表面的受體進行結(jié)合，然后將病毒基因組釋放進入宿主細胞內(nèi)。其次，感染宿主細胞。一旦病毒基因組進入宿主細胞內(nèi)，它會利用細胞自身的生物合成系統(tǒng)來合成和復(fù)制其基因組蛋白質(zhì)以及新的病毒顆粒。再次，干擾宿主免疫系統(tǒng)。在感染過程中，羊傳染性膿皰病毒可以通過干擾宿主的免疫系統(tǒng)來逃避免疫攻擊。具體來說，該病毒會利用其編碼的非結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)抑制宿主細胞的巨噬細胞、T 淋巴細胞等免疫細胞對其的殺傷效應(yīng)。最后，引發(fā)病理反應(yīng)。在感染過程中，羊傳染性膿皰病毒會破壞宿主細胞的結(jié)構(gòu)和功能，造成皮膚水泡、皰疹、膿皰等病變和癥狀，并在感染部位誘導(dǎo)宿主免疫系統(tǒng)產(chǎn)生炎癥反應(yīng)。

3、流行特點

從傳染源來講羊傳染性膿皰病毒感染的動物（主要為羊）以及感染的人充當(dāng)了羊口瘡的傳染源。感染動物的皮膚分泌物、呼吸道分泌物和糞便等均含有傳染性病毒。從傳播渠道分析羊口瘡主要通過直接接觸感染動物或接觸其分泌物等途徑傳播，如接觸患有口瘡的動物、處理其分泌物或被污染的器具和環(huán)境等也可能導(dǎo)致病毒傳播。此外，人與人之間也可以通過飛沫、接觸性傳播感染。從易感群體來看偶蹄類動物和人類都屬于容易感染的群體。其中，人群中以人群聚集場所、動物飼養(yǎng)者、屠宰場工人、野生動物研究者、獸醫(yī)等人員易于感染。從流行特點來分析羊口瘡主要在農(nóng)村地區(qū)流行，多數(shù)發(fā)生在夏秋季節(jié)，且大多數(shù)發(fā)病羊的年齡相對較小，年齡越小的羊群癥狀越嚴重。同時，因為該病在一定程度上影響到偶蹄類動物的飼養(yǎng)和經(jīng)濟價值，因此它也是一個重要的畜牧業(yè)問題。

4、發(fā)病原因

羊傳染性膿皰病毒感染引起的羊口瘡的流行原因是多方面的，并與人類行為、動物管理、環(huán)境等因素密切相關(guān)。因此，要預(yù)防和控制該病的流行，需要從多個方面入手，包括加強動物管理、改善生態(tài)環(huán)境、做好防疫工作等。羊口瘡主要通過直接接觸感染動物或接觸其分泌物等途徑傳播。因此，獸醫(yī)和農(nóng)民在動物接觸和管理過程中應(yīng)注意衛(wèi)生防護。羊傳染性膿皰病毒在潮濕環(huán)境下易于生長繁殖，尤其是在夏季高溫多雨的季節(jié)中，往往會有更多的病例出現(xiàn)。在羊養(yǎng)殖密度高的地方，如規(guī)?；B(yǎng)殖場、集市等，病毒的傳播容易導(dǎo)致大規(guī)模的疫情。養(yǎng)殖管理期間，如果沒有做好動物隔離、消毒、防疫等措施，容易導(dǎo)致病毒傳播以及疫情擴散。羊傳染性膿皰病毒可以在野生動物攜帶下傳播，野外動物和家畜的接觸也可能導(dǎo)致病毒傳播。

二、臨床癥狀

羊傳染性膿皰病毒感染引起的羊口瘡，在家畜中的表現(xiàn)與劇烈的皮膚病變和口腔粘膜潰瘍有關(guān)。患牲畜的嘴唇、鼻部、蹄子內(nèi)側(cè)及外乳突等處出現(xiàn)皰疹、水泡甚至膿皰。這些皮表損傷可能會結(jié)痂、干燥、裂開，或者在惡劣情況下直接發(fā)展為壞死性潰瘍。該病容易導(dǎo)致患牲口的口腔黏膜表面受到嚴重的侵害，表現(xiàn)為粘膜潰瘍、口角破裂、唾液減少。由于口部疼痛和胃腸道不適，患牲口常常表現(xiàn)出明顯的食欲不振或拒絕進食。感染初期，患牲口常常表現(xiàn)出中度發(fā)熱、體溫升高?；忌罂赡軙霈F(xiàn)蹄部損傷的情況，表現(xiàn)為蹄匣、蹄冠或者在血液中擴散波及到蹄部。

三、病理學(xué)變化

羊傳染性膿皰病毒感染引起的羊口瘡的病理和組織學(xué)變化主要表現(xiàn)為皮膚上的皰疹、潰瘍和出血，口腔黏膜損害，淋巴結(jié)腫大和肌肉損傷等病理變化。感染初期，在病畜體表部位出現(xiàn)小皰疹，逐漸發(fā)展為水皰和大小不等的膿皰。病變部位的皮膚組織出現(xiàn)血管充血、炎性細胞浸潤、水腫、壞死和潰瘍等病理變化。口腔黏膜受到感染時，黏膜表層出現(xiàn)潰瘍和出血，同時伴有炎癥細胞浸潤，病變的區(qū)域逐漸擴大，可侵犯到喉嚨和賁門部位。病毒感染后，患牲口的淋巴結(jié)往往會出現(xiàn)腫大、硬化，表面可見淺色斑點。病毒還可能侵犯肌肉組織，導(dǎo)致肌肉痙攣、腫脹、壞死，嚴重時可能會失去活動功能。

四、疾病診斷

1、實驗室診斷

①瓊脂擴散試驗

羊傳染性膿皰病毒瓊脂擴散試驗是一種常用的病毒血清學(xué)檢測方法，用于檢測抗體陽性和陰性動物，以及判斷病毒血清型。在正式實驗之前應(yīng)該準備瓊脂和病毒抗原。準備2%瓊脂溶液并在無菌條件下加熱至溶解。將病毒抗原稀釋至適當(dāng)濃度備用。將瓊脂溶液均勻地倒入無菌平板中，并在冷卻前使之均勻。使用自動板組裝器將平板制成6mm 的孔。向孔內(nèi)分別加入樣品血清和陰性對照血清。每一孔內(nèi)滴入30μl 血清。加入50μl 的病毒抗原于每個孔內(nèi)并輕輕搖晃混合。在25℃條件下孵育24-48小時。觀察乳白色區(qū)域，如果有沉淀形成則表示反應(yīng)陽性。如果無沉淀，且陰性對照孔內(nèi)發(fā)生了沉淀，則該結(jié)果無效。根據(jù)樣品血清結(jié)合的抗原種類和強度，以及陽性對照血清和陰性對照血清的反應(yīng)情況，可以判定樣品是否感染羊傳染性膿皰病毒以及抗體陽性或陰性。具體判定方法如下：在陽性和陰性血清成立的基礎(chǔ)上，根據(jù)各種抗原的特異性，判斷血清中反應(yīng)的抗原種類和其強度。

②補體結(jié)合實驗

羊傳染性膿皰病毒補體結(jié)合試驗是一種常用的血清學(xué)檢測方法，用于檢測病毒抗體水平和判斷疾病的診斷。先將組織抗原溶于0.9%的氯化鈉溶液中，制成適宜的濃度，使用前需要搖勻。取含有新鮮兔血清在內(nèi)的補體，置于4℃冰箱中保持冷卻狀態(tài)。將微量板中的每一孔中加入1∶5 稀釋的血清樣品，每孔加入50μL。向每一孔中各加入50μL 組織抗原，并進行一次搖晃。在37℃孵育2 小時。加入50μL 補體到每一個孔內(nèi)，再次搖動。在37℃孵育4 小時。將已知濃度的溶解紅細胞稀釋至適當(dāng)濃度后加入每一孔中，輕輕搖晃混合。觀察各孔內(nèi)是否出現(xiàn)沉淀的顏色，如發(fā)生沉淀，則表示血清陽性。如果無沉淀，則為陰性反應(yīng)。當(dāng)樣品血清中含有特異性病毒抗體時，血清與抗原發(fā)生反應(yīng)，致使補體結(jié)合被抑制，最終結(jié)果為陰性。當(dāng)樣品血清中沒有特異性病毒抗體時，補體與抗體、抗原發(fā)生反應(yīng)，溶解紅細胞被破壞，最終結(jié)果為陽性。

③間接ELISA 實驗

羊傳染性膿皰病毒間接酶聯(lián)免疫吸附試驗是一種常用的血清學(xué)檢測方法，用于檢測病毒抗體水平和判斷疾病的診斷。操作過程中將羊傳染性膿皰病毒抗原溶于適宜的緩沖液中，并加入ELISA 板中，置于4℃冰箱中保持冷卻狀態(tài)。取待測抗體血清樣品，用PBS 緩沖液按比例適當(dāng)稀釋。將包被抗原加入每個孔中，通常每個孔加入100μL（根據(jù)實際情況調(diào)整），在4℃下孵育過夜或2 小時以上。然后將空的ELISA 板放于溫度為37℃的干燥箱中加熱至干燥，去除內(nèi)部的水分。加入100μL 稀釋后的血清樣品到每個孔中，每個樣品至少重復(fù)3 次，在37℃孵育1 小時。將酶化的檢測抗體加入到每個孔中，通常每個孔加入100μL，然后在37℃的恒溫箱中孵育1 小時。將底物加入到每個孔中，通常每個孔加入100μL，然后在37℃的恒溫箱中孵育30 分鐘。底物溶液中有酶和底物（一般為TMB）。用硫酸或者其他停止劑停止反應(yīng)，此步驟是為了停止底物反應(yīng)并固定結(jié)果。最后使用微量板讀板儀，測定樣品的吸光度值，分別在450nm 和630nm 波長下測定。通過比較樣品的光密度值來判斷樣本是否含有羊傳染性膿皰病毒的抗體。一般來說，如果樣品的OD450nm 與陰性對照組（不含抗體）相比增加2 倍以上，則樣品為陽性；如果樣品的OD450nm 與陰性對照組無明顯差異，則為陰性。

2、鑒別診斷

①與羊痘病的鑒別診斷

羊傳染性膿皰病毒感染引起的羊口瘡和羊痘病是兩種病毒引起的不同疾病，其臨床癥狀有些相似，但還是可以通過以下幾個方面進行鑒別診斷：羊傳染性膿皰病毒感染引起的羊口瘡主要發(fā)病部位為嘴唇、鼻部、蹄子內(nèi)側(cè)及外乳突等處，而羊痘病的主要發(fā)病部位為耳后、頭頸部及四肢等區(qū)域。羊口瘡的皮膚病變以水皰和大小不等的膿皰為主（黏膜亦如此），而羊痘病的皮膚病變則表現(xiàn)為疫情早期出現(xiàn)暗紅色斑點或小丘疹，繼而形成水泡，最終干燥結(jié)痂。羊口瘡病程通常為1-2 周左右，在家畜中的傳播主要是通過接觸傳染；而羊痘病的病程約為2-3 周，在動物間主要通過接觸、呼吸道傳播或者蚊蟲叮咬等方式進行傳播。

②與羊口蹄疫的鑒別診斷

羊口瘡由羊傳染性膿皰病毒引起，而羊口蹄疫則是由口蹄疫病毒引起。羊口瘡的皮膚病變主要集中在嘴唇、鼻部和前肢，而羊口蹄疫則主要表現(xiàn)為口腔潰瘍、蹄部病變和乳房炎等。羊口瘡的病情進展較緩慢，通常需要數(shù)周才能表現(xiàn)出明顯的癥狀，而羊口蹄疫則發(fā)病急劇，癥狀迅速惡化。在組織學(xué)上，羊口蹄疫的病變主要出現(xiàn)在蹄子和庫存區(qū)，而羊口瘡則表現(xiàn)為皮膚病變和口腔粘膜損害。

③與羊傳染性口炎的鑒別診斷

羊傳染性膿皰病毒感染引起的羊口瘡和羊傳染性口炎都是家畜常見的口腔傳染病，它們的癥狀和病理變化有相似之處，但也存在著一些鑒別特征，羊口瘡由羊傳染性膿皰病毒引起，而羊傳染性口炎則是由羊傳染性口炎病毒引起。羊口瘡主要表現(xiàn)為皮膚病變和口腔粘膜損害，而羊傳染性口炎則主要影響口腔黏膜和咽喉部位。羊口瘡的病情進展較緩慢，需要數(shù)周才能表現(xiàn)出明顯的癥狀，而羊傳染性口炎則病情發(fā)展較快，發(fā)病急劇，且病程相對較短。羊口瘡的主要臨床表現(xiàn)為口周皮膚損害、口腔黏膜潰瘍和呼吸道癥狀，而羊傳染性口炎則表現(xiàn)為高熱、口腔潰瘍、呼吸急促等。在組織學(xué)上，羊口瘡的病變主要出現(xiàn)在皮膚和口腔黏膜，而羊傳染性口炎的病變則主要集中在咽喉部位。

五、治療措施

羊口瘡是由羊傳染性膿皰病毒引起的，治療需要綜合考慮病情嚴重程度、動物年齡、免疫狀態(tài)等因素。目前，尚無特效藥物可以針對羊傳染性膿皰病毒進行直接抗病毒治療，因此治療主要以支持和輔助治療為主。確診之后應(yīng)該將患病要單獨隔離并向羊群提供提供高質(zhì)量、易消化的飼料，及時剔除飼料當(dāng)中堅硬的秸稈飼料，并做好飼料的過篩處理。推薦使用抗生素進行針對性的治療，預(yù)防繼發(fā)感染，例如選擇使用土霉素、環(huán)丙沙星進行肌肉注射，使用劑量為30mg/kg 體重和0.1mL/kg 體重。使用漱口劑或噴霧劑進行口腔局部處理，如高錳酸鉀溶液、氯化鋁溶液、過氧化氫等。例如應(yīng)用0.1%的高錳酸鉀溶液，對結(jié)痂或者創(chuàng)傷進行精神處理，等到結(jié)痂軟化之后輕輕接觸，然后使用2%的過氧化氫溶液，對創(chuàng)面進行全面沖洗，然后在上方撒上冰硼散，每天使用一次，連續(xù)使用1-2 周，結(jié)痂就會自動脫落。使用免疫增強劑可以幫助提高羊體內(nèi)的免疫力，促進疾病的康復(fù)。例如使用黃芪多糖注射液，使用劑量為0.1mL/kg 體重，每天使用一次，連續(xù)使用三天。

六、預(yù)防措施

羊口瘡是由羊傳染性膿皰病毒引起的，為了預(yù)防該病的發(fā)生，日常養(yǎng)殖管理期間加強羊舍和飲水設(shè)施的清潔衛(wèi)生，避免污水、污染牧草和飼料等。同時注重對畜禽的定期檢查和監(jiān)測，及時發(fā)現(xiàn)和處理疑似病例。如驅(qū)蟲等，通過使用殺蟲劑殺滅病媒，降低病害的傳播。對羊進行規(guī)律的疫苗接種，提高羊體內(nèi)的免疫力，從而減少患病風(fēng)險。在疫苗免疫接種期間根據(jù)疾病流行情況、免疫對象年齡和免疫歷史等因素，選擇適合的疫苗品種。通常選擇使用羊叉二小膿皰病毒滅活疫苗，接種免疫接種，每年春季的3-4 月份和秋季的10-11 月份進行一次免疫接種，按照疫苗說明書要求，選擇合適的接種方法，一般采用口腔內(nèi)皮下注射，每次注射時發(fā)現(xiàn)口腔黏膜出現(xiàn)一個清亮的水泡為止，也可以在后尾部進行皮下注射，每只羊使用0.1mL，并保證注射部位清潔無菌。免疫后，要注意觀察羊只身體狀況，及時處理可能出現(xiàn)的異常情況，確保免疫效果。盡量不把不同地方來源或流行病區(qū)的羊放在一起，以免交叉感染。隨時注意衛(wèi)生情況，如飲水場所、運輸工具、羊舍等的消毒，嚴格執(zhí)行高標(biāo)準的衛(wèi)生防疫措施，防止疫情擴散。