文│賈北寧 (遼寧省葫蘆島市南票區動物疫病預防控制中心)
定時輸精是指注射外源性激素,達到人為控制畜禽繁殖周期的目的,使母畜能在特定時間內出現集體發情、排卵,并進行人工授精的一種技術。是基于傳統人工授精技術,配合同期發情、同期排卵而發展起來的一種新繁殖技術。不僅可以實現精準把控人工授精的時間,提高受精率,還可以減少母畜發情鑒定工作,直接輸精減少了人工工作量和管理成本,適用于批次化生產模式。使用同期發情技術可以實現妊娠、分娩、哺乳高峰期的同步,提高生產效率,降低生產成本。定時輸精技術的應用為促進養殖業集約化發展提供了非常大的便利,是日常管理程序不可或缺的重要環節。
1.同期發情。同步發情和排卵是定時輸精的必要前提。多種外源性激素可用于控制母豬的卵泡發育和同步排卵,包括孕馬血清促性腺激素(eCG)、人絨毛膜促性腺激素(hCG)、卵泡刺激素(FSH)、促黃體素(LH)等,hCG是一種LH類似物。eCG協同HCG使用可能相對更有效,因為在豬中,黃體生成素是從4或5毫米中等卵泡階段到排卵期發育的主要驅動因素。雖然eCG經常被認為是一種FSH替代物,但它也有一些LH樣活性。當用eCG誘導發情時,可以注射500~1000國際單位的eCG誘導母豬發情,500~750國際單位的劑量通常對斷奶的經產母豬有效,因為其內源性LH可能不受限制。對于經產母豬和年輕母豬,400國際單位的eCG和200國際單位的hCG的組合是首選。
2.同期排卵。發情到排卵的天數取決于卵泡期持續時間,具有一定的變異性。與外源性促性腺激素注射的結果相似,除非排卵也得到控制,否則不同母畜排卵時間相差太久,無法進行定時人工授精。外源性GnRH在垂體水平起作用,誘導內源性LH激增。雖然排卵期不需要一個特別大的LH峰,但LH峰值太低可能會對卵泡黃體化的質量產生負面影響。已經證明GnRH類似物能誘導畜禽排卵,也可以減少發情期和排卵期之間的間隔時間,并且產仔率和產仔數不受影響。hCG作用于卵巢水平,不受內源性LH的限制。一般注射hCG約42小時后發生排卵(39~49小時)。因此,如果母豬可能是排卵時間較晚(即在發情開始后超過42小時),可在斷奶后80小時注射hCG,母豬在注射后24~36小時固定時間排卵。
1.定時輸精在豬養殖的應用。
(1)初產母豬的定時人工授精。在發情后24小時到32小時用解凍的精液人工授精,發現大多數受精發生在排卵期,分娩率達70%。此外,雖然不受對照研究的影響,但據報道,給初產母豬注射1000國際單位的eCG,然后在發情時檢測GnRH,這樣母豬的產仔率非常高。
(2)斷奶母豬的定時人工授精。泌乳可抑制母豬發情,因此,仔豬斷奶是母豬同期發情的重要啟動因素。無繁殖障礙癥的母豬在斷奶后一周內可出現發情癥狀的概率高達90%以上。但由于日常飼養管理等因素的影響,正常母豬在斷奶后一周內發情概率僅為60%~80%,甚至更低,因此,定時人工授精技術在斷奶母豬的應用上尤為重要。
注射GnRH可以控制發情檢測后的排卵。Driancourt等在斷奶后5天給母豬注射GnRH,對注射30~33小時的發情母豬進行單次人工授精,受精率分別為91%(經產母豬)和82%(初產母豬),產仔率分別為84%(經產母豬)和78%(初產母豬),與未處理多次受精的母豬無差異。同樣,產仔數不受注射GnRH的影響。但初產母豬誘導排卵的成功率較低。
LH 也被用于斷奶后的定時輸精。Zak等評估了在發情檢測時注射5毫克LH后接受雙授精的母豬的繁殖性能。結果發現,這種方法對產仔率沒有影響,但LH處理的母豬產仔數更多。這種效應的機制尚未確定,但有可能是LH影響輸卵管運動,并有助于受精和胚胎向子宮遷移事件的同步。在另一項研究中,在發情檢測時給母豬注射5毫克LH,然后在24小時后或發情檢測時進行人工授精,在24小時后再次進行。對照組采用常規的多次人工授精。結果發現,處理組的產仔率和產仔數沒有影響,這表明所采用的定時人工授精方案可行。
綜上所述,在斷奶后第一次發情時單次給予LH、GnRH或hCG可以促進同期排卵,并在預測時間進行一次或兩次授精,產仔率和產仔數與發情期間授精2~3次的對照組動物沒有差異。
(3)泌乳母豬的定時人工授精。定時人工授精在哺乳期的主要優勢是在哺乳期妊娠,消除了早期斷奶和減少兩者之間的時間間隔。但在哺乳期,內源性LH分泌減少,由于不能產生排卵前LH峰,產后發情為無卵型。事實上,卵巢對外源性促性腺激素是可感的,在哺乳期間給予促性腺激素可誘導排卵。
哺乳期促性腺激素誘導排卵產生了矛盾的結果,因為它的效果取決于動物接受處理時泌乳階段和卵泡發育水平。在泌乳期第15天和第20天注射不同數量的eCG和hCG,之后定期進行授精,平均妊娠率可達77%。當臨近斷奶時注射400國際單位的eCG和200國際單位的hCG可提高母豬發情率,但在泌乳早期注射只有6%的處理母豬正常排卵。平均產后25天給予1000或1500國際單位的eCG,96小時后給予500或1000國際單位的hCG,24小時和注射后36~42小時進行定時人工授精,在接受兩種高劑量激素的母豬中,分娩率為76%,而接受低劑量的母豬分娩率只有62%,這清楚地表明了分娩率對外源性激素劑量的依賴效應。
總之,在泌乳第三周前應用定時人工授精方案在泌乳母豬中不太可能成功,最好開始于3周以上。這可能是因為在處理時基礎LH水平和卵泡的發育得到了改善,如果注射在哺乳期開始得太早,卵泡對激素沒有反應,定時輸精也不成功。
2.定時輸精在奶牛養殖中的應用。同期發情技術在各類畜禽生產中均可應用,但不同畜禽間由于品種、生理階段等因素的影響,其使用的各類激素劑量具有一定的差異,因此,在實際應用過程中應有針對性地加以區別和分析。以奶牛為例,常用的定時輸精技術如下:
(1)孕激素陰道栓-定時輸精法。養殖人員可根據經驗選用不同的設備在母牛體內放置陰道栓,10~12天后撤栓。通常母??稍诔匪ê蟮?天出現發情癥狀,撤栓后第56小時可實施輸精操作。若母牛在撤栓后發情現象不明顯,可適當延長輸精時間。另外也可利用B超等設備觀測卵泡發育情況,一旦發現有體積較大的卵泡發育時,可對其進行肌內注射促性腺激素釋放激素,激素注射2小時后開始輸精。
(2)PG處理法。PG處理法包括兩次輸精處理。第1次處理是對母牛肌內注射25毫升的前列腺素F2α。注射處理后2~5天出現發情癥狀,通過對母牛進行發情鑒定,確定輸精時間。第2次處理是在第1次處理后間隔11天再注射相同劑量的前列腺素F2α,80小時后進行輸精處理。
(3)孕激素-PG法。首先,使用孕激素處理1周,隨后注射前列腺素。經過上述處理的母牛通常在2~3天內出現發情癥狀并排卵。
同期發情+定時輸精+B超,可大大提高母牛受胎率。通過B超可觀察到卵巢和卵泡的發育狀況,避免卵泡發育不良時盲目輸精,延長配種間隔、浪費精液。該技術的應用克服了傳統上靠配種員一個人“摸”卵巢的局限性。
3.定時輸精在羊養殖中的應用。綿羊具有季節性發情的特征,因此,定時輸精技術對提高其受胎率至關重要。除綿羊外,山羊、湖羊等品種羊在繁殖過程中也常應用定時輸精技術。通常母羊發情時間可持續1~2天,發情后30~40小時開始排卵,因此,在發情后30小時后進行人工授精可大大提高受胎率。不同的方案與輸精時間對不同季節、不同胎次、不同生理時期羊的繁殖效果不同。孕激素+前列腺素F2α+孕馬血清促性腺激素聯合應用。首先,第0天注射前列腺素F2α,同時放置含孕酮的陰道栓。5~6天后撤栓的同時注射孕馬血清促性腺激素,2天后進行人工授精。Ovsych程序是仿照奶牛Ovsych程序,在第0天注射促性腺激素釋放激素類似物布舍瑞林,促進母羊排卵,產生黃體。在第7天注射前列腺素F2α,溶解黃體,使羊群的卵巢狀態趨于一致。在第9天再次注射促性腺激素釋放激素,16小時后人工授精。與長期海綿栓處理方式相比,該處理方法具有成本低,操作簡單,可顯著提高母羊產羔率等優勢。一般2次注射前列腺素F2α,間隔多為6~8天或10~11天。此外,為了增加排卵率,可在輸精的同時注射LH等激素。相比于綿羊,此定時輸精程序處理山羊發情率較高。
王晶晶等對中國美利奴羊(新疆軍墾型)使用孕酮陰道海綿栓+孕馬血清促性腺激素和CIDR栓+前列腺素F2α處理均取得較好的同期發情效果;孕酮陰道海綿栓+孕馬血清促性腺激素處理后2天是人工授精的最佳時間,此時開展輸精可獲得較高的受胎率。
肖西山等采用氯前列烯醇一次注射法和陰道栓+孕馬血清促性腺激素法進行同期發情處理,處理結束后48小時第1次定時輸精,間隔約12小時第2次輸精,結果表明,受胎率分別為62.5%和68.33%,說明秋季采用氯前列烯醇和陰道栓+孕馬血清促性腺激素同期發情,定時輸精技術方法可以在規模化養羊企業(場)推廣應用。
隨著養殖場的標準化和不斷改進,定時輸精技術在養殖領域得到廣泛應用,提高了良種公畜母畜利用率。經過多年的發展,定時輸精技術已形成成熟的工作流程和技術體系,但由于管理水平和養殖環境存在差異。導致該技術在應用過程中存在繁殖成績頻繁波動的現象,尤其是豬和羊的應用,同步加工和批量生產的技術流程有待進一步完善。定時輸精可以節省畜禽養殖的人力、物力、財力,并在促進畜牧業標準化和高質量發展方面發揮了重要作用,助力規?;B殖場向工業化方向轉變。