血清SCCA、HE4表達與宮頸癌MRI征象的相關性

王成雙 王華杰 李嬋嬋 郭成

(青島大學附屬青島市中心醫院 1婦瘤二科,山東 青島 266042;2婦科;3分子影像科)

宮頸癌是較為常見的女性生殖系統腫瘤,可發生淋巴結轉移,嚴重影響患者生存情況〔1〕。及早診斷、及時給予宮頸癌患者適當治療,是提高患者生存率的關鍵。隨著影像學發展,磁共振成像(MRI)逐漸用于宮頸癌診斷,其可輔助評估患者預后,判定淋巴結轉移、宮旁浸潤情況〔2〕。另外,鱗狀細胞癌抗原(SCCA)在宮頸癌患者血清中上調,具有輔助診斷宮頸癌的潛在價值〔3〕;人附睪上皮分泌蛋白(HE)4在宮頸癌患者血清中呈高水平,有利于診斷宮頸癌、評估患者病情及預后〔4〕。但血清SCCA、HE4水平與宮頸癌患者MRI征象的關系鮮有研究。本研究擬分析兩者與MRI征象的關系。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選取2019年6月至2020年1月青島大學附屬青島市中心醫院宮頸癌患者55例為宮頸癌組,其中年齡62～74歲,平均(68.00±3.06)歲;另選取同期體檢健康女性55例為健康組,其中年齡60～73歲,平均(66.50±3.32)歲。兩組年齡差異無統計學意義(P>0.05)。宮頸癌根據《宮頸癌及癌前病變規范化診療指南》相關宮頸癌判定標準進行診斷〔5〕。納入標準:(1)患者均符合宮頸癌有關診斷標準,經病理檢查確診為宮頸癌;(2)患者病歷檢查資料均完整,均有清晰的MRI征象;(3)年齡60～74歲;(4)患者術前均未行放化療。排除標準:(1)其他免疫系統疾病、感染性疾病、惡性腫瘤者;(2)合并嚴重肝、腎功能障礙者;(3)失訪者。受試者及其家屬均簽署知情同意書。本研究已獲青島大學附屬青島市中心醫院倫理委員會批準。

1.2主要試劑與儀器 人SCCA酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒(貨號:DRE11971)購于上海邦奕生物科技有限公司,人HE4 ELISA試劑盒(貨號:JLC20037)購于江西江藍純生物試劑有限公司。酶標儀(型號:CLARIOstar Plus)購買于伯齊科技有限公司,超導磁共振檢查儀(型號:Achieva 1.5T)購買于飛利浦公司。

1.3樣本收集 利用采血管收集宮頸癌患者行MRI檢查前、健康女性體檢當日清晨空腹外周血3～4 ml,室溫自然凝集35 min,4 000 r/min離心6 min,分離出血清,保存于-20 ℃冰箱中,用于檢測血清SCCA、HE4水平。

1.4ELISA檢測血清SCCA、HE4水平 從冰箱中取出人SCCA、HE4 ELISA試劑盒內配帶的標準品,按相應說明書將其標準品配制成不同濃度溶液,檢測各標準品溶液吸光度值,制作SCCA、HE4的標準回歸曲線;將血清解凍,平衡至室溫,于酶標板中加適量血清,置于37 ℃培養箱中,孵育25 min,加生物素工作液(含SCCA、HE4抗體),37 ℃孵育約45 min,棄反應液,用磷酸緩沖液洗2次;加顯色液,37 ℃孵育約30 min,加終止液,于450 nm處測各樣本的吸光度,計算血清SCCA、HE4濃度。

1.5MRI檢查 利用8US TORSOPA線圈及3.0T超導磁共振檢查儀(型號:Discovery MR 750 plus 3.0 T,美國GE公司)進行MRI檢查。參數:矢狀T2WI 序列:TE為98 ms,TR為4 235 ms,矩陣為320×256,DFOV為26×40 cm,層距1 mm,層厚4.5 mm;軸位T2WI序列:TE為985 ms,TR為6 280 ms,矩陣為320×320,DFOV為36×56 cm,層距1 mm,層厚5 mm;軸位T1WI序列:TE為1.96 ms,TR為4.33 ms,矩陣為320×256,DFOV為42×65 cm,層距1 mm,層厚5 mm;軸位DWI序列:TE為64.9 ms,TR為2 000 ms,矩陣為128×128,層距1 mm,層厚5 mm,b=1 000。

由兩名資深磁共振醫生利用雙盲法對MRI進行分析。于各序列觀察宮頸癌患者MRI學征象,評估腫瘤直徑、宮旁浸潤、宮頸浸潤、盆壁受侵、陰道受侵、遠處轉移及淋巴結轉移情況。在國際婦產科學聯合會(FIGO)基礎上進行MRI判斷,在T2WI上見宮頸腫瘤組織高信號,測定腫瘤直徑,以4 cm為界限;宮頸病灶外緣模糊、不規則或有軟組織,則判斷為宮旁受侵;病灶局限于宮頸內,其周圍顯示正常宮頸間質低信號環完整,若低信號環不完整則判斷為宮頸間質受侵(宮頸浸潤);宮腔T2WI顯示正常,而宮頸壁三層結構顯示消失,則判斷為盆壁受侵(宮體受侵);腫瘤突破陰道,陰道T2WI顯示略低信號,則判斷為陰道受侵;T2WI或壓脂序列中呈高信號,DW1呈高信號,且淋巴結直徑>10 cm,則判斷為淋巴結轉移。

1.6統計學方法 采用SPSS25.0軟件進行t檢驗。

2 結 果

2.1兩組血清SCCA、HE4水平比較 與健康組相比,宮頸癌組血清SCCA、HE4水平明顯升高(P<0.001)。見表1。

表1 兩組血清SCCA、HE4水平比較

2.2宮頸癌患者不同參數間血清SCCA、HE4水平比較 宮頸癌患者血清SCCA、HE4水平與其臨床分期及腫瘤分化程度有關(P<0.05)。見表2。

表2 宮頸癌患者不同參數間血清SCCA、HE4水平比較

2.3宮頸癌患者影像學表現 宮頸明顯增粗,T1WI稍低信號,T2WI略高信號,DWI序列為明顯高信號病灶大小清晰可見,下端侵犯陰道,見圖1。

圖1 宮頸癌侵犯陰道

2.4血清SCCA水平與宮頸癌患者MRI征象的關系 與腫瘤直徑<4 cm者、宮旁浸潤陰性者、宮頸浸潤陰性者、盆壁受侵陰性者、陰道受侵陰性者、遠處未轉移者、淋巴結轉移陰性者相比,宮頸癌患者腫瘤直徑≥4 cm、宮旁浸潤陽性者、宮頸浸潤陽性者、盆壁受侵陽性者、陰道受侵陽性者、遠處轉移者、淋巴結轉移陽性者血清SCCA、HE4水平均明顯升高(P<0.001)。見表3。

表3 血清SCCA、HE水平與宮頸癌患者MRI征象的關系

3 討 論

宮頸癌發生率較高,其晚期生存率較低,對女性健康構成極度威脅〔6,7〕。目前,宮頸癌發病相關因素尚未闡述完全,但學者認為其發病與人乳頭瘤病毒(HPV)感染、免疫功能異常、多孕多產、信號傳導異常、細胞異常增殖等密切相關〔8,9〕。此外,MRI可有效評估原發腫瘤、陰道浸潤、宮旁侵犯、淋巴結轉移及術后情況〔10〕。因此,尋找與宮頸癌發病及MRI征象相關的指標,對診治宮頸癌有一定積極意義。

SCCA是一種糖蛋白,可抑制腫瘤細胞程序性死亡,通過調節信號傳導,進而促進腫瘤細胞生長、增殖,可作為婦科腫瘤的血清指標〔11〕。研究發現,SCCA在宮頸癌患者血清中水平升高,其可能參與宮頸癌病變過程,有利于判定宮頸癌患者病理分級〔12〕;此外,SCCA在宮頸癌患者中表達失調,其與腫瘤分化程度、病理類型、預后復發關系密切,SCCA有望成為診斷、評估宮頸癌患者預后的標志物〔13〕。以上研究表明,SCCA水平異常可能與宮頸癌病理發展顯著相關。本研究中宮頸癌組血清SCCA水平明顯高于健康組,與王燕翔等〔12〕研究結果相符,提示SCCA可能在宮頸癌發病進展中具有重要作用,推測高水平SCCA可能通過調節相關信號通路,進而促進宮頸癌細胞增殖、遷移,抑制凋亡,從而在宮頸癌發生發展中發揮促進作用,但其具體作用機制有待進一步研究證實。另外,HE4在腫瘤細胞染色質組裝、合成中起重要作用,其水平在宮頸癌患者血清中顯著升高,HE4可作為診斷宮頸癌的輔助指標,有助于臨床篩查宮頸癌患者〔14〕。本研究中宮頸癌患者血清HE4水平明顯高于體檢健康者,與鄧冰彬等〔4〕研究結果一致,提示HE4可能與宮頸癌發生發展有關,究其原因,高水平HE4可能通過調節有關靶基因及信號傳導,影響機體免疫應答,促進血管新生、宮頸癌細胞增殖,抑制宮頸癌細胞凋亡,從而在宮頸癌發病進程中起作用,但仍需深入探究其作用機制。且宮頸癌患者血清SCCA、HE4水平與其臨床分期及腫瘤分化程度均有關,宮頸癌患者臨床分期越晚、分化程度越高,其血清SCCA、HE4水平越高,提示SCCA、HE4與宮頸癌患者臨床進展有關,關于其具體機制還需進一步探究。

MRI可多方位、多序列成像,具有較高組織分辨率,正常組織與腫瘤組織影像學信號存在明顯差異,其不僅可顯示病灶大小、位置、形態,還可顯示腫瘤向周圍侵犯情況〔15,16〕。既往研究發現,宮頸癌患者行MRI檢查,其宮頸區表現為不規則分葉狀或類圓形的軟組織腫塊影,T2WI呈中高信號,T1WI呈等信號/稍低信號,DWI序列呈高信號,壓脂序列呈略高信號,有助于判斷腹股溝、盆腔區淋巴結影、盆壁及宮旁侵犯,對宮頸癌具有較高診斷價值〔17〕。另外,魏榮富等〔2〕研究表明宮頸癌患者血清SCCA水平與盆腔淋巴結轉移、宮旁浸潤相關,其有利于預測宮頸癌患者預后;鄧冰彬等〔4〕研究認為宮頸癌患者血清HE4水平與淋巴結轉移、腫瘤浸潤深度相關,HE4參與并影響宮頸癌病變進程。本研究結果顯示,MRI可清晰顯示病灶大小,且血清SCCA、HE4水平與腫瘤大小、宮旁浸潤、宮頸浸潤、盆壁受侵、陰道受侵、遠處轉移、淋巴結轉移顯著相關,進一步提示SCCA、HE4可能在宮頸癌發展過程中發揮重要作用,宮頸癌患者血清SCCA、HE4水平與MRI征象密切相關。但本研究未深入探究SCCA、HE4在宮頸癌中的作用機制,且未評估SCCA、HE4、MRI對宮頸癌的診斷價值,后期將擴大樣本量進行深入探討。

綜上,宮頸癌患者血清SCCA、HE4水平均顯著升高,兩者均可能參與并影響宮頸癌病理進程,與MRI征象關系密切,檢測血清SCCA、HE4水平有利于臨床篩查宮頸癌患者。