規模豬場開展常態化非洲豬瘟檢測的做法與體會

李忠輝 建寧縣伊家鄉畜牧水產站 福建建寧 354500

非洲豬瘟防控常態化時期， 規模豬場要夯實非洲豬瘟防控基礎，保障規模豬場正常生產，最重要的是構建完善的生物安全體系，加強生產管理、調運監管、檢疫檢驗、疫病監測、病死豬無害化處理和糞污資源化利用等閉環管理。 在多年的防控非洲豬瘟的生產實踐中體會到，在做好生物安全的基礎上，規模豬場建設自檢實驗室，開展非洲豬瘟常態化檢測，對做好非洲豬瘟防控起到了重要的作用。

1 開展規模豬場常態化檢測的主要作用

1.1 風險評估與風險排查 豬場主動開展非洲豬瘟檢測，檢測樣品出陽性結果是代表核酸陽性，雖然不能判斷它具有活性或具有感染性， 但能夠表明病原的感染痕跡；檢測核酸陰性結果，最起碼能說明對環境的清理、清洗、消毒起到了一定作用；如果環境檢測核酸陽性，說明清理、清洗、消毒工作是不徹底的。如果沒有檢出非洲豬瘟病毒，說明可以繼續沿用現有方案“嚴防死守”，使自己心中有底氣，繼續養殖生產計劃。 豬場不開展檢測，豬未發病，算是僥幸逃過，但不能保證“明天”豬不得病；一旦得病，無藥可治、無計可施，而且可能大面積污染、大范圍感染，精準清除也不可能了，面臨的是全軍覆沒的風險。

1.2 做到早發現與早處理 據報道，豬感染非洲豬瘟病毒后， 一般2～3 d 血液病毒核酸檢測陽性，3～4 d 出現發熱等癥狀，4～5 d 口腔及肛拭子樣品病毒核酸檢測呈陽性，6～10 d 感染豬大部分發病死亡，同群接觸豬同樣全部發病、死亡。非洲豬瘟強毒株感染、發病、排毒，隨著病程的發展，排毒量增加，Ct 值減小，這也是非洲豬瘟早期檢測和精準清除的基礎。經過幾年實踐發現，非洲豬瘟傳播是有一個過程的，一般它的潛伏期就是預警預報， 早期預警預防通常為3～15 d 或更長，目的是檢測出陽性后，在還沒有感染到其它健康豬只時進行有效隔離。 通過定期抽檢檢出非洲豬瘟感染豬，采取適當措施，無害化處理患豬，并在短時間內轉移健康豬只，早發現、早精準清除，將損失降到最低。

靜默生產與精準清除的依據。實踐中，一些豬場在發現異常豬或者在豬死亡后進行檢測， 結果非洲豬瘟陽性，這時為時已晚。只有在豬場生產非常平穩的狀況下，按常態化監測計劃，對豬群進行抽查，即制定一套篩查方法， 按照一定的抽樣比例對正常豬群進行監測。一旦發現問題立即進行徹底篩查，全場靜默生產，發現異常情況，及時采取相應措施，最大程度減少損失。

2 常態化非洲豬瘟檢測方案

2.1 檢測頻率 常態化非洲豬瘟檢測頻率，可根據不同環節風險評估結果及周邊疫情情況， 結合本場實際確定，對高風險區域頻率要高些。如引種、車輛、精液，要求每批次均進行采樣檢測；采購飼料、物資產品等，實行定期監測，檢測頻率可按每月或每周進行；每周對豬群、圈舍、倉庫、藥房、通道等區域進行采樣檢測。

2.2 檢測采樣重點 規模豬場的非洲豬瘟風險點大小可以依次劃分為引種（精液）、運豬車、人員、飼料、物品。首先，對于實行自繁自養的規模豬場，調運生豬的車輛是風險最高的因素。 據全國非洲豬瘟疫情暴發以來有關流行病學調查結果顯示， 生豬運輸車輛，是疫情傳播擴散的首要因素；其次，由于人員和物資進入豬場，也是引發疫情的重要原因。做好對生豬運輸車輛以及進入豬場人員和物資的檢測，是常態化非洲豬瘟檢測的重點。

2.3 檢測采樣方案

2.3.1 豬場外圍環境采樣 運豬車輛： 對車輛前中后、上下、里外采集環境拭子，不少于10 個點。 車輛洗消中心：主要采集地面、工作人員身上（包括衣物、手臂、鞋底）等環境拭子，不少于8 個點。 售豬中轉區：主要采集地面、中轉臺欄桿等環境拭子，不少于8 個點。病死豬及無害處理區：每頭病死豬鼻肛拭子各1 份；同時采集地面、工作人員身上等環境拭子，不少于8 個點。 門衛值班室： 主要采集地面和門把等環境拭子，不少于4 個點。 物品消毒間：主要采集地面和物品表面等環境拭子，不少于4 個點。飼料運輸車：主要采集車輛外圍、司機身上等環境拭子，不少于8 個點。進場人員：主要采集人員身上及行李表面等環境拭子，各1 份。

2.3.2 豬場緩沖區環境采樣 食堂廚房：地面、案板采樣，不少于5 個點。辦公區：地面采樣，不少于3 個點。員工宿舍：地面采樣，每房間不少于3 個點。場區環境：地面采樣，不少于10 個點。食材：外包裝采樣，不少于3 份。

2.3.3 豬場內部環境采樣 獸醫室：地面采樣，不少于3 個點。 飼料倉庫：地面采樣，不少于5 個點。 休息間：地面采樣，不少于3 個點。生產區員工鞋靴：鞋靴外周拭子采樣，取樣比例20%。 豬舍通道：地面采樣，不少于10 個點。 死亡母豬：豬鼻肛拭子采樣，每豬必采1 份。 殘豬、弱豬：鼻肛拭子采樣，每豬1 份。

2.4 采樣注意事項

2.4.1 樣品的種類 對可疑豬、病死豬、殘豬采樣，可采集深部咽拭子、前腔靜脈或尾根抗凝血、口鼻拭子等；對分娩母豬，應采集臍帶血、胎衣；對死胎和流產胎兒，應采集淋巴結、脾臟等組織樣品。豬群轉群、分娩、免疫等應激會促進非洲豬瘟病毒的復制，可在豬群受到應激刺激后2～3 d 內及時采咽拭子、 尾根血、胎衣液等樣品進行檢測，以提高檢出率。

2.4.2 樣品混樣檢測 同一采樣對象可混樣檢測，混樣數量盡量不要超過10 個。

3 檢測結果的應用

實驗室檢測是生物安全體系的重要內容， 投入人力、物力開展檢測，目的是預警風險，查找漏洞，發現問題，解決問題。 如車輛樣本為檢測陽性，車輛必須隔離停運，按規程規范消毒，再進行檢測評估；外來人員及行李樣本檢測陽性的， 應當拒絕相關人員及物品進入，并對污染場所嚴格消毒；豬場內部樣品檢測陽性的，包括獸醫室、飼料倉庫、休息間、生產區員工鞋（衣服）、豬舍通道、殘豬、弱豬、病死豬、病死豬無害處理區等，應立即啟動相關防控應急預案。

4 體 會

4.1 規范建設企業自檢實驗室 一是實驗室應建在生產場區之外，根據所使用的檢測方法，確定樣品處理室（含核酸提取）、試劑準備室（含體系配制）和擴增室等功能的室內布局；二是配齊儀器設備，非洲豬瘟常態化檢測實驗室必須配備生物安全柜、PCR儀、核酸提取儀、離心機、高壓滅菌鍋等；三是要加強檢測人員的管理，必須配備專職的檢測人員，最好要具有獸醫、生物醫學或者相關專業的學習背景，接受過檢測工作培訓； 四是要做好生物安全防護和生物安全管理技術培訓工作，定期參加實驗室開展比對。

4.2 檢測結果要與豬群生產數據、臨床表現結合起來進行分析 非洲豬瘟的檢測只針對采樣時的狀態， 檢測結果可能受采樣質量低、 實驗室檢測不規范、檢測試劑盒不敏感、實驗室污染、操作失誤等因素影響，因此，當檢測結果與豬群臨床表現和生產數據等不相符時，要重新進行檢測復核。