益生菌和中草藥復方制劑對凡納濱對蝦生長、非特異性免疫、代謝能力和腸道組織結構的影響

摘 要：為研究益生菌和中草藥復方制劑對工廠化養殖凡納濱對蝦生長、非特異性免疫、代謝能力和腸道組織結構的影響，將初始體質量（2.0±0.2）g的2 250尾凡納濱對蝦隨機分為3組，每組3個平行，每個平行250尾，其中對照組無添加，試驗組1添加多肽+氨基酸+枯草芽孢桿菌代謝物，試驗組2添加大蒜提取物+肉桂提取物+菊苣提取物+枯草芽孢桿菌，添加量為3 g/kg基礎飼料。30 d養殖周期結束后，通過分析對蝦的生長指標、肌肉營養成分、血清非特異性免疫酶和代謝酶活性以及腸道組織結構的變化以分析復方制劑的應用效果。試驗結果顯示：兩組復方制劑均可提高對蝦的體質量相對增長率和體質量特定生長率（P＜0.05），且試驗組2效果更好；試驗組1對蝦肌肉粗脂肪和呈味氨基酸含量較對照組顯著提高（P＜ 0.05）；試驗組對蝦血清中超氧化物歧化酶（SOD）、總抗氧化能力（T-AOC）、過氧化氫酶（CAT）、溶菌酶（LSZ）、一氧化氮合成酶（NOS）的活性較對照組均有所增強，其中試驗組2與對照組差異顯著（P＜0.05），但谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、堿性磷酸酶（AKP）、酸性磷酸酶（ACP）活性較對照組有所降低；試驗組對蝦血清中谷氨酰胺合成酶（GS）活性較對照組有所升高，其中試驗組1與對照組差異顯著（P＜0.05）；試驗組對蝦的蘋果酸脫氫酶（MDH）、己糖激酶（HK）活性與對照組差異不顯著（Pgt;0.05）；腸道組織H.E染色結果顯示，兩組復方制劑均可改善對蝦腸道組織結構，降低絨毛層脫落現象。試驗結果表明，在工廠化養殖基礎飼料中添加3 g/kg復方制劑2（大蒜提取物+肉桂提取物+菊苣提取物+枯草芽孢桿菌）可顯著促進凡納濱對蝦生長，提高其非特異性免疫和代謝能力，優化腸道組織結構，綜合提高對蝦免疫水平。

關鍵詞：凡納濱對蝦；中草藥；益生菌；非特異性免疫；營養代謝；腸道組織

凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）又名南美白對蝦、白腳蝦，隸屬于對蝦科、濱對蝦屬，因具有生長快、耐受性強、適應高密度集約化養殖等優點，已在全世界規模化養殖 ^［1］。中國是世界上最重要的對蝦生產國，對蝦養殖不僅在沿海地區，還擴展到內陸地區 ^［2］。然而，隨著對蝦養殖業的發展和養殖密度的增加，養殖病害日趨嚴重，已成為對蝦養殖業快速發展的瓶頸 ^［3］。為了解決病害問題，降低產業經濟損失，提高對蝦的健康狀況，生產中會采用抗生素或化學藥品來進行病害防治，但大量使用這些藥物會增加病原菌的抗藥性，對人類健康與環境安全造成潛在的影響。因此，積極尋求抗生素替代品，研發綠色環保、高效無殘留、安全無毒的新型飼料添加劑，已成為對蝦養殖業關注的熱點問題之一。

目前，已開發應用的抗生素替代品主要有益生菌（素）、益生元（寡糖類）、合生元（代謝物類）、酶制劑、有機酸、有機微量元素和中草藥及其提取物等 ^［4］。其中，中草藥或其提取物作為一種新型的飼料添加劑，因具有天然植物性、高效多樣化、毒副作用小等優點而被廣泛認可 ^［5］。它們不僅能有效防治養殖過程中水產動物的各種病害，減少抗生素或化學藥物的使用，又可以提高水產動物機體自身的消化酶活性，促進營養物質吸收，從而提高其生長性能 ^［6-9］。目前，中草藥應用于對蝦類的研究多集中在某一種中草藥或多種中草藥并用的效果評價上，對中草藥提取物和益生菌的復合應用報道較少。

益生菌作為另一種被廣泛認可的飼料添加劑，不僅可以在動物消化道內通過競爭排斥病原微生物，減少其致病幾率，而且可以激活機體免疫系統，提高宿主的免疫能力和抗病力 ^［10-13］。探索以益生菌和中草藥提取物為代表的功能性飼料添加劑對水產動物生長性能、免疫和代謝能力、腸道組織結構的影響，可為養殖生產中抗生素替代品的研發提供參考。本試驗以凡納濱對蝦為研究對象，跟蹤中草藥和益生菌復方制劑在其養殖過程中的效果，從生長性能、免疫和代謝能力、腸道組織結構等方面進行分析評價，為中草藥和益生菌在對蝦健康養殖中的推廣應用提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗材料及管理

試驗用凡納濱對蝦來自山東濱州某養殖場，體長（3.0±0.2）cm，體質量（2.0±0.2）g，健康、規格整齊。將蝦隨機放入養殖桶（直徑1.5 m，養殖水體約300 L）內暫養，250尾/桶。

養殖水源為地下水，曝氣消毒后，經調溫直接注入養殖桶（直徑1.5 m）內。試驗期間水溫為（26±1）℃，pH在7.2～7.8，24 h持續充氣，溶解氧為5.5～6.5 mg/L，氨氮＜0.2 mg/L。每天上午固定時間9：00換水，日換水量為全部水體積的20%。基礎飼料為青島賽格林生物工程有限公司的凡納濱對蝦常規飼料，營養成分見表1。

試驗用復方制劑1的主成分包括多肽+氨基酸+枯草芽孢桿菌代謝物，復方制劑2的主成分包括大蒜提取物+肉桂提取物+菊苣提取物+枯草芽孢桿菌。

1.2 試驗設計

試驗共設3組，分別為對照組（基礎飼料）、試驗組1（基礎飼料添加復方制劑1）和試驗組2（基礎飼料添加復方制劑2），每組3個平行，每個平行250尾，共計2 250尾凡納濱對蝦。復方制劑添加量為3 g/kg基礎飼料。養殖試驗期間，每天投喂3次（6：00、12：00、18：00），日投飼量為對蝦體質量的6%，以投喂后2 h內吃完為佳（根據蝦的情況隨時調整）。養殖試驗周期為 30 d。

1.3 樣品采集

30 d的投喂試驗結束后，停食1 d，每個平行組中隨機抽取20尾對蝦，在冰上無菌條件下獲取其腸道、肌肉。腸道用無菌生理鹽水沖洗3次，棄內容物后置于波恩氏液中固定，用于H.E組織切片分析。去殼肌肉置于無菌離心管中，于-20 ℃下保存，用于常規營養成分分析。用1.0 mL一次性無菌注射器從對蝦心臟處吸取0.2 mL血液，每個平行組取6尾蝦血混合成一個樣品，混合均勻后立即于4 ℃下5 000 r/min離心10 min，棄沉淀，于-80 ℃下保存上清液，用于酶活性分析。

1.4 指標測定

1.4.1 生長指標

30 d的投喂試驗結束后，停食1 d，對每個平行組對蝦進行計數，稱量其終末體質量，計算體質量相對增長率和體質量特定生長率（specific growth rate，SGR），公式如下。

R WG=100×（Wt-W0）/W0（1）

R SG=100×（lnWt-lnW0）/t（2）

式（1）～（2）中，R WG為體質量相對增長率（%），W0、Wt分別為試驗對蝦的初始體質量（g）和終末體質量（g），R SG為體質量特定生長率（ %·d ^-1），t為試驗天數（d）。

1.4.2 營養成分

采用凱氏定氮法（GB 5009.5—2016）測定對蝦肌肉中粗蛋白質量分數，采用氯仿-甲醇抽提法（GB 5009.6—2016）測定粗脂肪質量分數。用氨基酸自動分析儀（GB 5009.124—2016）測定呈味氨基酸（天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸）質量分數。

1.4.3 營養代謝酶活性

谷氨酰胺合成酶（glutamine synthetase，GS）、蘋果酸脫氫酶（malate dehydrogenase，MDH）、己糖激酶（hexokinase，HK）活性檢測按照南京建成生物工程研究所的試劑盒操作說明完成。

1.4.4 非特異性免疫酶活性

總抗氧化能力（total antioxidant capacity， T-AOC）、谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）、過氧化氫酶（catalase，CAT）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、一氧化氮合成酶（nitric oxide synthase，NOS）、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP）、酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）、溶菌酶（lysozyme，LSZ）活性檢測均按照南京建成生物工程研究所的試劑盒操作說明完成。

1.4.5 腸道組織結構

腸道組織經波恩氏液固定，石蠟包埋、切片，切片厚度為4～5 μm，之后用蘇木精-伊紅染色，于Olympus顯微鏡下觀察、拍照。

1.5 數據統計分析

試驗數據用平均值±標準誤表示，用SPSS 19.0軟件進行單因素方差分析（one-way "ANOVA）和Duncan’s法比較，設P＜0.05為差異 顯著。

2 結果

2.1 益生菌和中草藥復方制劑對凡納濱對蝦生長及營養成分的影響

益生菌和中草藥復方制劑對凡納濱對蝦生長的影響情況見表2。投喂試驗結束后，試驗組對蝦的終末體質量均顯著高于對照組（P＜0.05）。試驗組1、2的體質量相對增長率分別達 120.88%、122.40%，均顯著高于對照組（P＜ 0.05）。試驗組對蝦的體質量特定生長率均顯著高于對照組（P＜0.05）。

益生菌和中草藥復方制劑對凡納濱對蝦營養成分的影響見表3。對照組和試驗組之間的粗蛋白含量無顯著差異（P＞0.05）。在粗脂肪含量方面，試驗組1顯著高于對照組（P＜0.05），試驗組2與對照組差異不顯著（P＞0.05）。呈味氨基酸含量也同樣，試驗組1顯著高于對照組（P＜ 0.05），試驗組2與對照組差異不顯著（P＞0.05）。水分含量方面，兩個試驗組間差異不顯著（P＞ 0.05），而均顯著低于對照組（P＜0.05）。

2.2 "益生菌和中草藥復方制劑對凡納濱對蝦非特異性免疫指標的影響

益生菌和中草藥復方制劑對凡納濱對蝦非特異性免疫指標的影響見表4。試驗組血清中抗氧化相關酶SOD、T-AOC、CAT、NOS的活性較對照組均有所增強，其中試驗組2與對照組差異顯著（P＜0.05）。試驗組的GSH-Px活性較對照組有所降低，其中試驗組2與對照組差異顯著（P＜ 0.05）。試驗組的AKP、ACP活性均比對照組有所降低，試驗組1的ACP與對照組間差異顯著（ P＜0.05），試驗組2的AKP與對照組間差異顯著（P＜0.05）。試驗組的LSZ活性較對照組有所增強，試驗組2與對照組間差異顯著（P＜0.05）。

2.3 益生菌和中草藥復方制劑對凡納濱對蝦代謝酶活性的影響

益生菌和中草藥復方制劑對凡納濱對蝦代謝酶活性的影響見表5。試驗組對蝦血清中GS的活性與對照組相比有所升高，其中試驗組1與對照組間差異顯著（P＜0.05）。試驗組MDH、HK的活性與對照組均無顯著性差異（Pgt;0.05）。

2.4 益生菌和中草藥復方制劑對凡納濱對蝦腸道組織結構的影響

益生菌和中草藥復方制劑對凡納濱對蝦腸道組織結構的影響見圖1。對照組對蝦的腸道組織絨毛層有脫落現象，環肌層較厚，結締組織中細胞散列不緊密，見圖1-（a）中箭頭所示位置。試驗組1可見整齊的絨毛層，絨毛層、環肌層、結締層清晰有分隔，見圖1-（b）中箭頭所示位置。試驗組2的絨毛層也有脫落現象，但與對照組相比程度較輕，其結締組織中細胞排列緊密，見圖1-（c）中箭頭所示位置。

3 討論

3.1 益生菌和中草藥復方制劑對凡納濱對蝦生長性能和營養成分的影響

益生菌或中草藥均可單獨作為飼料添加劑使用，發揮積極的促生長作用。符云等 ^［14］報道，復方中草藥制劑（杜仲15％、黃芪20％、甘草15％、陳皮5％、金銀花15％、黃連5％、魚腥草10％和白術10％等）可顯著促進凡納濱對蝦生長，提高其機體免疫能力，以1.0 g/kg添加量為宜。黃忠等 ^［15］進一步分析了中草藥制劑（以黃芪、板藍根、藿香、大青葉等為主要成分）投喂策略產生的影響，結果表明，連續3周投喂質量分數為0.2%的中草藥飼料，或者第1周投喂0.4%的中草藥飼料，第2周和第3周投喂對照飼料，這兩種策略均可使凡納濱對蝦獲得較好的生長性能和免疫機能。陳輝輝等 ^［16］研究發現，質量分數為0.8%和1.2%的復方中草藥可顯著促進凡納濱對蝦的生長和消化能力，并可顯著提高對蝦抗白斑綜合征（white spot syndrome virus，WSSV）的能力。Chien等 ^［17］通過核磁共振氫譜（1H nuclear magnetic "resonance，1H NMR）代謝分析發現，益生菌組對蝦的肝胰腺代謝物中，肌酸酐和谷氨酰胺含量明顯增加；轉錄組分析發現，枯草芽孢桿菌E20顯著增強抗氧化相關基因的表達。Duan等 ^［18］研究發現，丁酸梭菌（Clostridium butyricum）可明顯改善凡納濱對蝦的生長性能，增加腸道短鏈脂肪酸SCFA和肌肉粗蛋白含量，調節腸道消化能力，增強腸道對氨脅迫的免疫功能。

一般認為，益生菌和中草藥之間具有一定的協同作用，中草藥具有多糖、酚類、甾醇、皂苷等多種有效成分，益生菌發酵可促進中草藥營養物質被吸收、利用，中草藥中的營養物質亦可促進益生菌的繁殖、代謝 ^［19］。另外，益生菌發酵過程中產生的復合酶能夠彌補動物機體胃腸道內源酶的不足，通過促進動物對飼料的消化吸收，提高中草藥有效成分的利用率，進而提高動物的生長性能 ^［20］。Fan等 ^［21］研究表明，黃芪多糖（astragalus polysaccharide，APS）、茯苓多糖（tuckahoe polysaccharide，TPS）和枯草芽孢桿菌可顯著提高刺參（Stichopus japonicus）的特定生長率，且其溶菌酶、超氧化物歧化酶、堿性磷酸酶活性和補體3含量顯著增加。Alagawany等 ^［22］研究發現，在尖齒胡鯰（Clarias gariepinus）幼魚的膳食中添加大蒜和蘆薈（Aloe vera）的混合物，試驗組魚的生長得到改善，且飼料利用率也明顯提升，推測這些有益作用歸因于大蒜素。本研究復方制劑中的菊苣包括菊粉（synanthrin）、糊精和淀粉等多糖，還含有菊苣酸（chicoric acid）、綠原酸等酚酸類化合物，未發現對試驗動物產生任何負面影響 ^［23］。肉桂在人或畜牧上則常被用來刺激進食、健胃強脾。 El-hamid等 ^［24］用肉桂醛納米微乳飼喂尼羅羅非魚（Oreochromis niloticus），發現飼料轉化率升高，魚的生長速率和蛋白質效率顯著提升。本試驗在基礎飼料中直接添加多肽、氨基酸等營養物質，具有提供能量速度快、消化吸收利用率高、促進新陳代謝等優點 ^［25-26］，益生菌代謝產物中含有高濃度的短鏈脂肪酸等物質，更利于動物生長過程中對飼料的有效利用。大蒜含有多種氨基酸、脂肪酸等營養成分及多酚類和多糖類等功效型化合物，菊苣和肉桂則發揮了營養促進作用。中草藥和益生菌的協同機制呈現出較強的促生長效果，推測原因是復方中草藥含有維生素、氨基酸、多糖類等營養物質和一些潛在的誘食因子，在增強養殖動物食欲的同時促進機體代謝，而且益生菌能夠產生蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等消化酶類，增強了對蝦體內消化酶的活性，從而促進飼料的降解、吸收、利用，最終提升促生長效果 ^［27-28］。此外，芽孢桿菌還可通過分泌活性抑菌物質影響腸道組織發育和調節腸道菌群組成，在增強機體免疫功能的同時促進生長性能，這與已發表的研究結果相 一致 ^［29-30］。

本研究中，試驗組1凡納濱對蝦的粗脂肪和呈味氨基酸質量分數與對照組相比差異顯著，而試驗組2與對照組差異不顯著，可能是因為多肽、氨基酸等營養物質可在短時間內直接影響對蝦的機體成分，而中草藥中的營養成分則需要更長時間才能發揮作用。Yu等 ^［31］的研究同樣發現，芽孢桿菌和中草藥未對凡納濱對蝦體成分產生顯著影響，這可能與試驗周期及養殖環境不同存在一定聯系，需進一步探討。

3.2 益生菌和中草藥復方制劑對凡納濱對蝦非特異性免疫能力的影響

益生菌和中草藥均被認為是潛在的免疫調節物質，在水產養殖中被廣泛應用。文國樑等 ^［32］研究表明，0.2%中草藥和0.3%芽孢桿菌能夠對凡納濱對蝦的免疫指標產生積極影響，而且表現出一定的協同作用。彭張明等 ^［20］發現，在育苗過程中添加一定比例的中草藥（芪參散）和草分枝桿菌，試驗組凡納濱對蝦蝦苗的標粗成活率、生長速度、養成效果均高于無任何添加的對照組。王苓等 ^［33］研究發現，飼料中添加1×109 CFU/kg蠟樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌，可提高凡納濱對蝦血清非特異性指標SOD、AKP、ACP、LSZ、T-NOS、 iNOS活性和血清蛋白質量濃度。

對于沒有適應性免疫系統的甲殼動物對蝦來說，非特異性免疫功能尤為重要 ^［34］。T-AOC可以防止活性氧（ROS）的有害影響，反映了生物體細胞內的抗氧化防御狀態 ^［35］。SOD可以催化高活性O2-分解為O2和低活性H2O2 ^［36］。CAT可促使H2O2分解為H2O和O2，清除過度的自由基，減輕氧化應激反應，維持動物機體的動態平衡 ^［37］。GSH-Px可以將有毒的過氧化物還原為無毒的羥基化合物，從而保護動物機體結構和功能不受過氧化物的損害 ^［10］。AKP和ACP是重要的磷酸酶，參與機體信號傳導、能量轉化和磷酸酶代謝 ^［38］。對蝦的免疫系統正常運行過程中，機體內的一氧化氮合成酶激活后，免疫物質誘導釋放出大量的NO，其后參與免疫反應，提高機體抗病力 ^［39］。溶菌酶作為重要的非特異性免疫因子之一，主要存在于血清中，具有殺滅革蘭氏陽性菌的作用 ^［40］。血清非特異性免疫指標代表對蝦機體在某一時期特定條件下所處的免疫狀態，對蝦機體較快適應外源添加，其免疫狀態表現為正常水平，而顯著的波動性變化可能會出現在機體不適應的應激情況下。本試驗中，試驗組1凡納濱對蝦血清非特異性免疫指標除ACP和NOS外，均與對照組無顯著性差異，這可能與養殖環境和對蝦機體生理狀態有關，需要更長的攝入時間才會出現增強或降低的效果，同時也說明試驗對蝦的養殖環境中應激因子極少，整個試驗環境處于一個穩定的水平。試驗組2對蝦的非特異性免疫指標除ACP外，均與對照組差異顯著，推測原因是中草藥中的復雜功效成分協同益生菌發酵產生了更強的效果。另外，當動物進食高脂肪含量的飼料時，AKP活性會升高，試驗組2對蝦血清AKP和ACP活性有所降低，說明該組飼料脂肪含量 正常。

3.3 益生菌和中草藥復方制劑對凡納濱對蝦代謝能力的影響

益生菌或中草藥的促生長、調免疫機理包含多個方面，其中分泌多種酶類促進代謝是一個非常重要的方面 ^［41-42］。谷氨酰胺合成酶（GS）主要參與蛋白質合成和氮的代謝，在動物肌肉、肝臟、腸道等組織中作用活躍，產生的谷氨酰胺為后續含氮化合物的生物合成提供基礎 ^［43］。己糖激酶（HK）是參與葡萄糖代謝的第一個酶，可將葡萄糖轉化為己糖，作為生物體的能量來源，其活性受二磷酸腺苷（ADP）和葡萄糖-6-磷酸的限制 ^［44］。蘋果酸脫氫酶（MDH）屬于糖酵解酶，是三羧酸循環的關鍵酶，可以促進糖分代謝，在一定程度上能起到促消化、抗氧化作用，而且MDH可刺激體內免疫類蛋白的合成，間接提高機體免疫力。當機體狀態不佳或有炎癥等情況存在時，MDH活性升高 ^［45］。廖栩崢等 ^［25］發現，普遍存在于動植物、細菌體內的小分子多肽具有合成成本低、提供能量速度快、消化吸收利用率高、能促進新陳代謝等一系列優點，可直接參與蛋白質合成，比氨基酸更快速地影響蛋白質的代謝。Fan等 ^［43］研究表明，日糧中補充地衣芽孢桿菌可顯著提高凡納濱對蝦的生長性能，提高消化酶、抗氧化酶和代謝酶活性，增強其抗亞硝酸鹽脅迫的非特異性免疫能力。本試驗中，試驗組1凡納濱對蝦的GS活性較高，可能是因為復方制劑1中含有易消化吸收的多肽、氨基酸等營養成分，再加上枯草芽孢桿菌代謝產物中的肽類、糖類、氨基酸等物質，在底物供給方面促進了蛋白質代謝。兩個試驗組凡納濱對蝦的MDH活性與對照組比較無顯著差異，HK活性與對照組基本持平，說明復方制劑未對養殖對蝦及養殖環境帶來供氧不足等負向影響，隨著養殖周期延長可能會出現營養代謝功能的顯著提高。

3.4 益生菌和中草藥復方制劑對凡納濱對蝦腸道組織結構的影響

對于對蝦而言，腸道是抵御外源侵害和環境脅迫、保護健康的第一道防線，其結構完整性在腸道屏障作用中至關重要 ^［46］。飼料成分是影響腸道組織形態的重要因素之一，且隨著營養水平或環境改變，腸道結構特別是腸道絨毛高度和肌層厚度會發生不同程度的變化 ^［47］。張三珊等 ^［48］研究顯示，在飼料中單獨或配合添加大蒜、茯苓，草魚幼魚腸道的絨毛長度和寬度顯著增加，杯狀細胞數目增多。與之相似，本試驗結果顯示，含有大蒜的復方制劑2有利于凡納濱對蝦腸道形態的改善。張冬梅等 ^［49］在飼料中加入枯草芽孢桿菌，逆轉了以絨毛、黏膜和肌層為特征的腸道組織損傷，緩解了2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）誘導的炎癥。本試驗復方制劑中的芽孢桿菌也呈現了改善凡納濱對蝦腸道組織結構的效果。

4 結論

試驗結果表明，復方制劑1（多肽+氨基酸+枯草芽孢桿菌代謝物）和復方制劑2（大蒜提取物+肉桂提取物+菊苣提取物+枯草芽孢桿菌）均可提高凡納濱對蝦的生長性能，在一定程度上提高呈味氨基酸含量，增強機體非特異性免疫能力和營養代謝能力，改善腸道組織絨毛層脫落現象，其中復方制劑2效果更好。

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Effects of probiotics and traditional Chinese

herbal compound preparation on

growth，non-specific immunity， metabolic capability and intestinal

tissue structure of Litopenaeus vannamei

MA Danping， WANG Xiaolu， WANG Youhong， YU Xiaoqing，

FAN Ying， GAI Chunlei， XU La， HOU Fusheng

［Marine Science Research Institute of Shandong Province（National

Oceanographic Center，Qingdao），" Key Laboratory for Disease Control in Mariculture Shandong

Province of Municipal

Engineering Research Center of Aquatic Biological Quality

Evaluation and Application， Qingdao 266104， China］

Abstract： To investigate the effects of probiotics and traditional Chinese herbal compound preparation on growth performance， non-specific immunity， metabolic capability and intestinal tissue structure of Litopenaeus vannamei under the industrial farming model， 2 250 L. vannamei with an initial body weight of （2.0±0.2）g were randomly divided into 3 groups with 3 replicates， each replicate with 250 inds.The control diet was basic feed without any additives.The test diet 1 was basic feed supplemented with peptides+amino acids+Bacillus subtilis.The test diet 2 was basic feed supplemented with garlic（Allium sativum L.） extract+cinnamon（Cinnamomum cassia L.） extract+chicory（Cichorium intybus L.） extract+Bacillus subtilis.The supplemented dosage of two test diets was 3 g/kg basic feed.After a 30-day culture cycle， the weight gain rate and the specific growth rate of shrimp fed two test "diets were significantly increased（P＜0.05）， and the performance of test diet 2 was the best.The crude fat and "flavor amino acid content of shrimp fed two test diets were significantly higher than the control（P＜0.05）.The "activities of antioxidant enzymes such as superoxide dismutase（SOD）， total antioxidant capacity（T-AOC）， catalase（CAT）， lysozyme（LSZ） and nitric oxide synthase（NOS） of two test groups were increased compared to the "control group， and significant difference was observed between group 2 and control（P＜0.05）.However， the "activities of glutathione peroxidase（GSH-Px）， alkaline phosphatase（AKP） and acid phosphatase（ACP） in the test groups were significantly decreased compared with the control（P＜0.05）.The activities of glutamine "synthetase（GS） in test groups were increased， and the significant differences were observed between test group 1 and the control（P＜0.05）.There were no significant differences in activities of malate dehydrogenase（MDH） and hexokinase（HK） among 3 treatments（Pgt;0.05）.Hamp;E staining showed that both compound formulations could "improve the intestinal tissue structure and reduce the villi shedding.The results indicated that supplemented "3 g/kg compound preparation（Garlic extract+Cinnamon extract+Chicory extract+Bacillus subtilis） could "significantly promote the growth， enhance the non-specific immunity and metabolic capability， optimize intestinal tissue structure， improve the whole immune levels in shrimp cultured in the factory ponds.

Key words：" Litopenaeus vannamei; Chinese herb; probiotics; non-specific immunity; metabolize; intestinal "tissue