外源NO處理對四種桉樹幼苗鋁脅迫抗性的影響

劉 冰, 郭榮琨, 石茂鑫, 羅義山, 蔣豐璟, 滕維超*

(1. 廣西大學 林學院, 南寧 530004; 2. 廣西森林生態與保育重點實驗室, 南寧 530004; 3. 亞熱帶農業生物資源保護與利用國家重點實驗室, 南寧 530004; 4. 國家林業和草原局中南速生材繁育重點實驗室, 南寧 530004; 5. 廣西高等學校林業科學與工程重點實驗室, 南寧 530004; 6. 廣西壯族自治區國有東門林場, 廣西 崇左 532108 )

鋁是地殼中含量最豐富的金屬元素,鋁毒害能夠誘導植物體生成大量活性氧(reactive oxygen species,ROS),從而使細胞發生氧化脅迫,導致細胞膜透性增大(Pereira et al., 2011)。如何解決植物鋁毒害,有效利用酸性土壤資源已成為土壤和植物科學家們重視的問題。桉樹(Eucalyptusspp.)是桃金娘科(Myrtaceae)桉屬(Eucalyptus)植物的統稱(謝耀堅,2015),種植歷史較長、生長迅速、適應性廣、產量高,在我國林業產業中占有重要地位(韋宜慧等,2021; 黃麗平等,2022)。桉樹栽植區域主要在我國南方地區,土壤偏酸性且風化程度較高,土壤中鋁鐵含量較豐富(黃倩倩,2021),抑制桉樹的生長發育,嚴重影響桉樹的產量和品質。 一氧化氮(NO) 是一種重要的氧化還原信號分子,能夠調控植物生長發育,在植物受到脅迫時傳導信息以提高植株抗逆性,但也可能作為一種活性氮在植物體內大量積累,引起硝化脅迫從而對植物造成損害(李焱,2017)。近年來,前人已開展了一些NO 緩解植物鋁毒害方面的研究,NO緩解金屬脅迫主要有3種機制:(1)增強抗氧化能力(González et al., 2012);(2)減少重金屬在植物體內的積累(Xiong et al., 2009);(3)調控與金屬抗性相關的基因表達(Xiong et al., 2010)。有研究表明,NO通過調節體內的滲透物質和增加抗氧化酶活性來降低鋁對閩楠(Phoebebournei)、大豆(Glycinemax)、煙草(Nicotianatabacum)等植物的氧化損傷,提高抗鋁性(劉強等,2017; 王華華等,2019; 李琳,2020)。過氧化氫(H2O2)和NO都屬于小分子信號物質,均具有毒害和保護細胞這兩種相反的生理功能(Yu et al., 2014)。逆境脅迫條件下,植物體內H2O2和外源添加NO對抗氧化系統代謝的影響在植物響應逆境脅迫中至關重要(Yin et al., 2010)。鋁脅迫下,桉樹外源添加NO對體內H2O2代謝和植物抗氧化系統的響應方面尚未見報道,值得深入研究。為更好地了解NO對不同耐鋁性桉樹的抗鋁性影響機制,我們選取課題組前期研究發現的耐鋁性顯著差異的4種桉樹 [純種桉樹巨桉(Eucalyptusgrandis)、圓角桉(E.tereticornis)、尾葉桉(E.urophylla)和雜交種桉樹尾巨桉(E.urophylla×E.grandis) ]為研究對象(黎湯侃,2020; 梁艷紅,2022),其中,巨桉和圓角桉為鋁敏感型桉樹,尾葉桉和尾巨桉為耐鋁型桉樹。采用水培方式培養,通過測定并分析不同NO濃度對鋁脅迫下桉樹幼苗ROS、抗氧化酶活性、滲透調節物質以及膜脂過氧化性等指標的影響,擬探討:(1)鋁脅迫下不同耐鋁性桉樹葉片的生理指標變化及其與耐鋁性的關系;(2)外源NO處理對4種桉樹的耐鋁性差異的影響;(3)有利于提高4種桉樹抗鋁性的NO濃度范圍。本研究結果將為提高酸性土壤下桉樹幼苗的耐鋁性以及耐鋁桉樹種質資源的選育與利用提供理論參考,為鋁毒污染的土壤區桉樹優質高產栽培提供指導依據。

1 材料與方法

1.1 材料

供試材料為廣西國有東門林場林業科學研究所(107°84′ E、 22°17′ N)提供的生長健康、長勢均勻的3月生桉樹實生幼苗(巨桉、尾葉桉、圓角桉、雜交種尾巨桉)。將苗木運回廣西大學林學院(108°17′09.00″ E、 22°50′28.41″ N,屬于亞熱帶季風氣候,年均氣溫22.6 ℃,年降雨量1 100～1 300 mm)后,在室外進行水培,培養期從 2022年 4 月 10 日開始,至 2022 年 4 月 24 日結束。水培方法按照陸明英(2014)的方法進行。首先將試驗苗根部的土質輕輕去除,并用自來水沖洗干凈后,浸入1‰多菌靈溶液消毒20 min,其次用自來水沖洗干凈,再次用全黑不透光的珍珠棉泡沫板固定植株,每塊泡沫板按照黑色塑料桶桶口直徑的大小切割成圓形(塑料桶規格:17.8 cm × 17.9 cm),將桉樹幼苗均勻固定在珍珠棉泡沫板上,之后移入盛有2.5 L含0.5 mmol·L-1CaCl2的pH=5.5霍格蘭德(Hoagland)營養液的黑色塑料桶中(營養液配方如表1),最后接通氧氣泵,保證氧氣泵24 h不間斷供氧(整體裝置見圖1)。培養期間,每3 d更換一次培養液,水培一周后,更換的營養液用1 mol·L-1的HCl和1 mol·L-1NaOH溶液逐漸調節pH至4.5,待苗木水培14 d后取長勢優良、大小一致的桉樹幼苗進行處理。

圖1 桉樹水培裝置簡圖Fig. 1 Schematic illustration of Eucalyptus hydroponic device

表1 霍格蘭德營養液配方Table 1 Hoagland nutrient solution formula

1.2 設計

在廣西大學林學院室外進行試驗處理,采用完全隨機試驗,從2022年4月24日(培養期結束)開始試驗處理,至2022年4月26日結束。水培期結束后篩選出生長良好、長勢基本一致[株高(30±10) cm,地徑(5±2) mm]的桉樹幼苗,以AlCl3·7H2O作為Al3+供體,硝普鈉(sodium nitroproside, SNP)作為NO的供體,對桉樹幼苗設置7個處理(表2),其中鋁濃度120 mg·L-1是根據課題組前期實驗獲得 (黎湯侃,2020; 梁君霞,2020; 梁艷紅,2022; Liang et al., 2022)。每處理3個重復(3盆),每個重復6株(每盆6株),每種桉樹126株,4種共計504株。接通氧氣泵處理48 h后,分別采集幼苗中間位置葉片置于-80 ℃冰箱中保存以用于后續指標測定。

表2 實驗設計與各組處理明細表Table 2 Experimental design and treatment list of each group

1.3 指標測定方法

丙二醛(MDA)含量測定采用硫代巴比妥酸法,可溶性蛋白質含量測定采用考馬斯亮藍G-250 法,可溶性糖含量測定采用蒽酮比色法,抗壞血酸過氧化物酶(APX)活性測定采用維生素C氧化法(王學奎,2000; 李合生,2000);超氧化物歧化酶(SOD)活性測定采用氮藍四唑法,過氧化物酶(POD)活性測定采用愈創木酚法,過氧化氫酶(CAT)活性測定采用紫外吸收法(陳建勛和王曉峰,2006);超氧陰離子(O2-)產生速率測定采用羥胺氧化反應法(孔祥生和易現峰,2008);過氧化氫(H2O2)含量測定采用硫酸鈦比色法(Yi et al., 2015)。

1.4 數據處理

采用Excel 2016軟件對試驗數據進行整理,試驗數據均為3次重復取平均值±標準差,并用SPSS 26.0軟件進行Duncan多重比較分析(P<0.05),柱狀圖采用Sigmaplot 12.0軟件進行繪制,主成分分析采用R軟件進行計算和繪制。在進行主成分分析時,為了更好地比較4種桉樹對Al和SNP處理的響應程度差異,必須平衡它們在原始狀態(CK,無Al或SNP處理)下的差異,故使用相對生理指標來反映它們對Al和SNP處理的響應程度,計算公式如下(Liang et al., 2022):

T1相對值=T1實測值/CK實測值;

(T2-T6)相對值= (T2-T6)實測值/T1實測值。

2 結果與分析

2.1 各處理對桉樹幼苗O2-產生速率、H2O2和MDA含量的影響

由圖2可知,與CK相比,鋁脅迫處理(T1)對巨桉O2-產生速率無顯著影響,而顯著增加了其余3種桉樹幼苗O2-的產生速率。隨著SNP濃度的上升,4種桉樹幼苗葉片O2-的產生速率均呈現先降后升的趨勢,巨桉在T2時最低,較T1顯著下降3.48%(P<0.05),尾葉桉在T3時最低,較T1顯著下降3.79%(P<0.05),圓角桉在T4時最低,較T1顯著下降5.67%(P<0.05),尾巨桉在T2時最低,較T1顯著下降1.94%(P<0.05),4種桉樹在T2、T3和T4普遍較低,表明適當濃度的SNP有助于降低桉樹體內O2-的產生速率。

不同小寫字母表示相同指標處理間差異顯著(P<0.05)。下同。Different lowercase letters indicate significant differences between treatments of the same index (P<0.05). The same below.圖2 各處理對桉樹幼苗O2-、H2O2及MDA含量的影響Fig. 2 Effects of different treatments on O2-, H2O2 and MDA contents in Eucalyptus seedlings

與CK相比, T1顯著增加了尾葉桉幼苗葉片H2O2含量的累積,而對其余3種桉樹幼苗的H2O2含量無顯著影響。隨著SNP濃度的上升,4種桉樹幼苗葉片H2O2含量均呈現先降后升的趨勢,巨桉在T3時最低,較T1顯著下降13.50%(P<0.05),尾葉桉在T5時最低,較T1顯著下降23.77%(P<0.05),圓角桉在T4時最低,較T1顯著下降4.69%(P<0.05),尾巨桉在T4時最低,較T1顯著下降13.32%(P<0.05),4種桉樹在T3、T4和T5時普遍較低,表明適當濃度的SNP有助于降低桉樹體內的H2O2含量。

與CK相比,鋁脅迫下尾葉桉T1處理的MDA含量無顯著變化,其余3種桉樹幼苗T1處理的MDA含量顯著增加。隨著SNP濃度的上升,4種桉樹幼苗葉片MDA含量普遍呈現先降后升的趨勢,巨桉幼苗在T3時最低,較T1顯著下降54.29%(P<0.05),尾葉桉在T3時最低,較T1顯著下降36.03%(P<0.05),圓角桉在T4時最低,較T1顯著下降40.81%(P<0.05),尾巨桉在T3時最低,較T1顯著下降65.57%(P<0.05),4種桉樹分別在T3或者T4達到最低值,表明適當濃度的SNP有助于降低桉樹體內的MDA含量。

2.2 各處理對桉樹幼苗抗氧化酶活性的影響

由圖3可知,與CK相比,T1顯著提升了圓角桉幼苗葉片SOD活性。隨著SNP濃度的上升,4種桉樹幼苗葉片SOD活性普遍呈現先升后降的趨勢,巨桉幼苗在T3時活性最大,較T1顯著提高9.14%(P<0.05),尾葉桉在T5時活性最大,是T1的2.22倍,圓角桉在T4時活性最大,是T1的1.82倍,尾巨桉在T4時活性最大,是T1的1.86倍,4種桉樹普遍在T3、T4或者T5達到最大值,表明適當濃度的SNP有助于提高SOD活性。

圖3 各處理對桉樹幼苗抗氧化酶活性的影響Fig. 3 Effects of different treatments on antioxidant enzyme activities in Eucalyptus seedlings

與CK相比,T1顯著提升了巨桉和圓角桉幼苗葉片POD活性,而對尾葉桉和尾巨桉的POD活性無顯著影響。隨著SNP濃度的上升,尾巨桉POD活性無明顯變化,其余3種桉樹幼苗葉片POD活性普遍呈現先升后降的趨勢,巨桉幼苗在T3時活性最大,較T1顯著提高53.06%(P<0.05),尾葉桉在T5時活性最大,較T1顯著提高66.04%(P<0.05),圓角桉在T4時活性最大,較T1顯著提高50.00%(P<0.05),尾巨桉在T6時活性最大,與T1相比無顯著影響(P>0.05),表明適當濃度的SNP有助于提高POD活性。

與CK相比, T1顯著提升了圓角桉幼苗葉片CAT活性。隨著SNP濃度的上升,4種桉樹幼苗葉片CAT活性普遍呈現先升后降的趨勢,巨桉幼苗在T3時活性最大,與T1相比無顯著影響(P>0.05),尾葉桉在T2時活性最大,是T1的3.72倍,圓角桉在T6時活性最大,較T1顯著提高41.11%(P<0.05),尾巨桉在T3時活性最大,是T1的3.08倍,表明適當濃度的SNP有助于提高CAT活性。

與CK相比,T1顯著提升了巨桉和尾葉桉幼苗葉片APX活性,而對圓角桉和尾巨桉的APX活性無顯著影響。隨著SNP濃度的上升,4種桉樹幼苗葉片APX活性普遍呈現先升后降的趨勢,巨桉幼苗在T3時活性最大,較T1顯著提高25.33%(P<0.05),尾葉桉在T5時活性最大,較T1顯著提高33.59%(P<0.05),圓角桉在T5時活性最大,較T1顯著提高54.24%(P<0.05),尾巨桉在T4時活性最大,是T1的2.36倍,表明適當濃度的SNP有助于提高APX活性。

2.3 各處理對桉樹幼苗滲透調節物質含量的影響

由圖4可知,與CK相比, T1顯著提升尾葉桉幼苗葉片可溶性蛋白含量。隨著SNP濃度的上升,4種桉樹幼苗葉片可溶性蛋白含量普遍呈現先升后降的趨勢,巨桉幼苗在T5時活性最大,較T1顯著提高8.04%(P<0.05),尾葉桉在T5時活性最大,較T1顯著提高15.37%(P<0.05),圓角桉在T5時活性最大,較T1顯著提高10.96%(P<0.05),尾巨桉在T2時活性最大,較T1顯著提高5.02%,4種桉樹分別在T2或T5達到最大值,表明適當濃度的SNP有助于提高桉樹幼苗葉片可溶性蛋白含量。

圖4 各處理對桉樹幼苗滲透調節物質含量的影響Fig. 4 Effects of different treatments on contents of osmotic regulatory substances in Eucalyptus seedlings

與CK相比,T1顯著提升了尾葉桉和圓角桉的可溶性糖含量,而對巨桉和尾巨桉幼苗葉片可溶性糖含量影響效果不顯著。隨著SNP濃度的上升,4種桉樹幼苗葉片可溶性糖含量普遍呈現先升后降的趨勢,巨桉幼苗在T3時活性最大,較T1顯著提高13.51%(P<0.05),尾葉桉在T2時活性最大,較T1顯著提高33.20%(P<0.05),圓角桉在T3時活性最大,較T1顯著提高31.11%(P<0.05),尾巨桉在T4時活性最大,較T1顯著提高8.21%,4種桉樹分別在T2、T3或T4達到最大值,表明適當濃度的SNP有助于提高桉樹幼苗葉片可溶性糖含量。

2.4 4種桉樹主成分分析

為了解9個生理指標在4種桉樹間的差異,我們使用主成分分析來減少響應變量的維數。由表3可知,在單一鋁脅迫下保留了2個主成分,主成分1和主成分2的貢獻率分別為42.90%、37.11%,累計貢獻率達80.01%。主成分1主要受SOD、MDA和CAT影響。主成分2主要受O2-產生速率、可溶性糖和可溶性蛋白影響。在SNP處理下,主成分1、主成分2和主成分3的貢獻率分別為27.96%、21.58%和15.20%,累積貢獻率達64.74%。主成分1主要受APX、SOD、CAT和可溶性糖影響,主成分2主要受O2-產生速率、MDA和可溶性蛋白影響,主成分3主要受H2O2影響。

表3 桉樹幼苗主成分特征值矩陣Table 3 Eigenvalue matrix of principal components of Eucalyptus seedlings

由圖5可知,在單一鋁脅迫下,4種桉樹的點彼此分離(圖5:A),尾葉桉的抗鋁性最強, 其次是尾巨桉和巨桉,圓角桉的抗鋁性最弱。在鋁脅迫添加SNP處理下,4種桉樹的點相對集中(圖5:B,C,D),表明在添加NO時4種桉樹的抗鋁性趨于一致。

處理A為單一鋁脅迫處理; 處理B、C、D為鋁脅迫下添加SNP處理; SS和SP分別代表和可溶性糖和可溶性蛋白。Treatment A is treated with single aluminum stress; treatment B, C and D are treated with SNP added to aluminum stress; SS and SP represent soluble sugar and soluble protein, respectively.圖5 4種桉樹的9個生理變量的主成分分析Fig. 5 Principal component analysis of nine physiological variables of four Eucalyptus species

3 討論

3.1 添加NO對桉樹響應鋁脅迫的影響

桉樹幼苗對鋁脅迫的響應主要表現在細胞膜系統、保護酶活性、滲透調節物質和代謝活性等方面(黎湯侃,2020),本研究從上述3個方面分別選取具有代表性的指標,探討鋁脅迫下施加外源物質SNP對4種桉樹幼苗的保護效果。鋁脅迫下植物體內會產生大量活性氧,引起氧化脅迫,破壞脂質、蛋白質、DNA等生物大分子,使細胞死亡,從而影響植物生理狀態(郭朋,2018)。其中O2-和H2O2是植物氧化損傷的主要指標,MDA是質膜過氧化的產物,它們常作為反映植物質膜氧化脅迫水平的重要生理指標,其含量多少與細胞膜的氧化損傷呈正相關(Yamamoto, 2019)。當植物體內積累大量ROS時,就會激活抗氧化系統進行清除,從而維持細胞內氧化還原的穩態。本研究中,與對照組相比,鋁脅迫處理顯著加劇4種桉樹的O2-產生速率和MDA含量的累積,添加適量SNP(巨桉和尾葉桉SNP添加量在50～100 μmol·L-1之間,圓角桉在100～200 μmol·L-1之間,尾巨桉在50～200 μmol·L-1之間)能有效提高鋁脅迫下桉樹幼苗的SOD、POD、CAT、APX酶活性和可溶性蛋白、可溶性糖的含量,并降低O2-產生速率和MDA含量,減輕質膜過氧化損傷,表明鋁脅迫下適當濃度的SNP可以提高抗氧化酶活性,增強植物體消除ROS能力以提高植物耐鋁性,這與侯文娟等(2019)的研究結果類似。但施加800 μmol·L-1SNP導致4種桉樹葉片O2-產生速率和可溶性蛋白含量提高,同時4種桉樹可溶性糖含量以及巨桉的SOD等抗氧化酶活性降低,這可能是因為NO 除了作為信號分子參與調控植物生理代謝過程外,還可能是因為NO是一種活性氮,高濃度的SNP施加后活性氮在植物體內過量積累導致硝化脅迫,鋁脅迫和硝化脅迫的雙重脅迫,這嚴重破壞抗氧化系統,抑制抗氧化酶活性。由此可見,NO這種重要的氣體信號分子具有雙重性,適當外施NO能緩解鋁脅迫下桉樹幼苗的生理損傷,而高濃度則產生抑制作用,該研究結果與西瓜(肖家昶等,2021)、尾巨桉DH3229 (侯文娟等,2019)以及紅錐(李琳等,2020)等的研究結果一致。為驗證硝化脅迫的影響程度,后續我們將測定并分析硝化脅迫特有的生理指標[谷胱甘肽還原酶(GSNOR)活性、過氧亞硝基陰離子(ONOO-)和一氧化氮(NO)在植物組織中的分布],完善試驗結論。

3.2 表征桉樹耐鋁性強弱的主要指標

在單一鋁脅迫下,PC1主要表征抗氧化能力和膜脂過氧化程度,PC2主要表征滲透調節物質含量。在鋁脅迫下添加NO,PC1主要表征抗氧化能力,PC2主要表征膜脂過氧化程度,PC3主要表征活性氧積累程度。綜上可知,SOD、MDA、CAT、O2-、可溶性蛋白和可溶性糖這些指標可作為評判桉樹耐鋁性強弱的關鍵指標。桉樹在受到鋁脅迫時,大量的活性氧(包括O2-和H2O2等)在體內累積,主要通過提高抗氧化酶活性來清除活性氧,此外還可以生物合成可溶性化合物(包括可溶性糖和可溶性蛋白等),以調節細胞滲透情況,保持膜的完整性和功能(Benzarti et al., 2014)。

3.3 種間耐鋁性差異及NO對鋁脅迫的影響效益

在單一鋁脅迫下,尾葉桉的抗鋁性最強,其次是尾巨桉和巨桉,圓角桉的抗鋁性最弱,主要是因為鋁脅迫下尾葉桉的APX活性提升幅度較大,抗氧化能力提高,滲透調節物質含量提升幅度較大,對細胞膜有更好的保護作用,膜脂過氧化程度較低。圓角桉雖然具有較高的抗氧化酶活性和滲透調節能力,但是MDA含量也很高,這可能由于圓角桉對鋁脅迫的響應較敏感,抗性響應積極,然而受限于自身的不足,膜脂過氧化程度較高,因此抗性較弱。這與課題組前期研究結果大致相當(Liang et al., 2022)。桉樹種間耐鋁性差異可能與它們的適應性進化歷史有關。尾葉桉原生長在印尼東部島嶼(7°30′—10°0′ S)的火山衍生土壤上(Sein &Mitl?hner, 2011),那里的土壤富含鋁礬土、鐵礬土和鋁/鐵腐殖質復合體(Ugolini &Dahlgren, 2002; Yatno &Zauyah, 2008),長期的富鋁環境導致尾葉桉進化出較強的抗鋁性(Steane et al., 2011)。巨桉原產于澳大利亞東部(17°—32° S)(Burgess, 1988)。圓角桉的自然分布范圍最廣,從巴布亞新幾內亞到南澳大利亞(6°—38° S)(González et al., 2021),巨大的緯度差異引起人為和環境因素直接或間接影響土壤環境(如pH值),可能導致圓角桉較強的抗逆可塑性,本次試驗發現圓角桉的抗鋁能力最弱,但是在前期試驗中發現圓角桉的耐鋁性位于尾葉桉和巨桉之間(Liang et al., 2022),這可能是由于不同批次苗木的個體差異。總的來說,巨桉、尾葉桉和圓角桉這3種桉樹之間的耐鋁性差異可能歸因于它們不同的棲息地,而尾巨桉作為尾葉桉和巨桉的雜交種,其抗鋁性介于尾葉桉和巨桉之間。尾巨桉具有與其母本物種(尾葉桉)相似的特性,表明抗鋁脅迫的能力是可遺傳的,由少數基因調控,并在很大程度上由雜交物種遺傳。在許多植物中發現了耐鋁的遺傳控制機理,一些作物的耐鋁品種已被選育(Zhao et al., 2018; Coelho et al., 2019; Sara et al., 2020; Miftahudin et al., 2021)。許多國家都開展了桉樹雜交改良品種選育和種植的相關研究,選育出了一批高產、高抗、高適應性的改良品種(Zhu et al., 2018)。這表明桉樹耐鋁基因型的選育是可行的和有前景的。值得注意的是,雖然本研究發現雜交品種具有與母本品種相似的強耐鋁能力,但是父本品種的耐鋁能力較低。因此,需要進行反交試驗來進一步驗證桉樹的耐鋁能力的遺傳特性。

本研究結果表明外源NO可以通過激活桉樹體內抗氧化酶活性和增加滲透調節物質來降低鋁脅迫的危害,提高耐鋁性。有研究發現,在黑麥草(吳亞,2019)、煙草(劉強等,2016)植物中,外源NO對鋁脅迫下敏感型黑麥草Nagahahikari、敏感基因型煙草云煙105的緩解效果分別比耐鋁型更明顯,表現出較強的耐鋁性。本研究也發現類似結果,在外源NO作用下,4種桉樹耐鋁性相對集中,這可能是因為NO有類似緩沖劑的平衡作用,即提高原本較弱的巨桉和圓角桉(敏感型)的抗鋁性,對原本抗鋁性較強的尾葉桉(耐受型)影響不大,所以在NO的作用下4種桉樹的抗鋁性最終趨于一致。

4 結論

適量的NO濃度(50～200 μmol·L-1)可通過提高鋁脅迫下桉樹抗氧化酶活性和滲透調節物質含量,降低MDA含量來提高桉樹抗鋁性。而濃度過高(≥800 μmol·L-1)的NO會對桉樹產生脅迫作用。NO對于敏感型桉樹的耐鋁性有較強的提升作用,對耐受型桉樹的耐鋁性提升不明顯,在NO的作用下4種桉樹的抗鋁性最終趨于一致。SOD、MDA、CAT、O2-、可溶性蛋白和可溶性糖這些指標可作為評判桉樹耐鋁性強弱的關鍵指標。