自擬平衡針灸通過調控PI3K-AKT信號通路及血清GABA水平對老年失眠的治療作用

許珂 蔡麗偉 周書喆 劉晨 劉淑清 馬學紅

(1北京大學第六醫院 北京大學精神衛生研究所 國家衛生健康委員會精神衛生學重點實驗室(北京大學) 國家精神心理疾病臨床醫學研究中心(北京大學第六醫院)精神科,北京 100191;2北京中醫藥大學第二臨床醫學院;3北京中醫藥大學東方醫院針灸科)

老年失眠是指年齡超過60歲的人在睡眠方面出現困難或睡眠質量下降,導致白天感到疲勞、精神不振等情況〔1〕。老年失眠與生理和心理因素有關,如老年人身體功能下降、慢性疾病、藥物副作用、情緒壓力等〔2〕。平衡針灸作為中醫傳統療法之一,在老年失眠治療中具有一定優勢和作用。通過調整神經系統功能、改善睡眠質量、促進身體代謝和調節內分泌系統等機制達到緩解老年失眠的目的〔3〕。磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶 B(AKT)信號通路在一定程度上反映了患者大腦神經元細胞的增殖與凋亡〔4〕。通過對患者PI3K/AKT信號通路相關指標的監測,可以對患者的治療效果進行評估。4-氨基丁酸(GABA)是一種重要的神經遞質,在老年失眠中具有重要作用〔5〕。當GABA水平下降時,可能會導致睡眠障礙〔6〕。本研究旨在通過對平衡針灸調控PI3K-AKT信號通路及血清GABA水平治療老年失眠的作用進行研究,以期為臨床治療提供科學依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2021年5月至2023年12月于北京大學第六醫院和北京中醫藥大學東方醫院治療的老年失眠患者120例作為研究對象,納入標準:①均符合失眠診斷標準〔7〕;②病程均在6個月以上;③近3個月未使用精神類藥品;④臨床資料完整。排除標準:①合并嚴重的腦血管疾病;②心理疾病異常;③自身免疫性疾病、凝血功能異常。按照隨機分組原則分為研究組及對照組各60例,兩組一般資料差異無統計學意義(P>0.05),見表1。患者均簽署知情同意書,本研究經倫理委員會研究通過。

表1 兩組一般資料比較

1.2干預方法 兩組均采取阿普唑侖〔江蘇恩華藥業股份有限公司,國藥準字H32020215,1次0.4 mg(1片),每日3次〕進行治療,研究組在此基礎上聯合采取平衡針灸進行治療,兩組均治療4 w。平衡針灸:分別對患者雙側肢體的失眠相關穴位進行針灸,針刺患者內關穴、關元穴、三陰交穴、神門穴、大陵穴、太溪穴針刺,順時針及逆時針分別進行捻轉6圈后退出針灸器具,留針15 min,連續治療4 w。

1.3兩組治療效果比較 分別對兩組治療4 w后的效果進行評價。治療效果評價標準〔8〕:患者睡眠得到完全恢復或夜間的整體睡眠時間在6 h以上則為痊愈;患者夜間的整體睡眠時間在3～6 h則為顯效;患者睡眠有所改善,夜間的整體睡眠時間不足3 h則為有效;其他則為無效。總有效率=(痊愈+顯效+有效)/總病例數。

1.4兩組臨床改善指標比較 分別對兩組治療4 w后睡眠潛伏期、睡眠總時間及覺醒次數之間的差異進行比較。

1.5兩組PI3K-AKT信號通路及GABA水平比較 分別對兩組治療前及治療4 w的PI3K、AKT、GABA水平進行比較。PI3K、AKT水平的檢測采用免疫印跡法進行檢測,GABA水平的檢測采用酶聯免疫法進行檢測。患者進行靜脈采血,對血細胞內總蛋白進行提取后,測定蛋白濃度,使用濃縮膠及分離膠對蛋白進行轉膜過夜,在封閉條件下進行常溫孵育1 h,同時使用兔抗人多克隆抗體常溫孵育再次進行洗膜,隨后再次進行兔抗人多克隆抗體進行常溫孵育1.5 h,使用化學法進行發光及顯影,使用ImageJ軟件進行蛋白測定,測定過程中使用β-actin作為內標。

1.6兩組多導睡眠監測儀指標比較 采用澳大利亞康迪公司的Somte 28多導睡眠監測儀,對治療組及對照組進行監測,監測指標包括總睡眠時間(TST)、睡眠效率(SE),第一(TS1)、二(TS2)、三(TS3)及四期(TS4)睡眠、快速眼動睡眠時間(REM)、覺醒期時間(WASO)、睡眠潛伏期時間(SL)等指標。

1.7兩組睡眠質量比較 睡眠質量采取匹茲堡睡眠質量指數(PSQI)進行評價,該量表主要通過對患者的日間功能障礙、睡眠質量、睡眠時間、睡眠障礙及入睡時間等進行評價,總分共計18分,分數越高,患者的睡眠質量越差〔9〕。

1.8統計學方法 采用SPSS26.0軟件進行χ2檢驗、χ2分割法及獨立樣本t檢驗。

2 結 果

2.1兩組治療效果比較 研究組治療總有效率(95.00%;包括痊愈27例,顯效20例,有效10例)顯著高于對照組(83.33%;包括痊愈20例,顯效10例,有效20例;χ2、U值分別為4.227、2.561,均P<0.05)。

2.2兩組臨床改善指標比較 治療前,兩組睡眠潛伏期、睡眠總時間及覺醒次數比較,差異無統計學意義(P>0.05)。治療后,兩組睡眠潛伏期、睡眠總時間及覺醒次數均顯著改善,且研究組睡眠潛伏期、覺醒次數顯著低于對照組,睡眠總時間顯著高于對照組(均P<0.05),見表2。

2.3兩組PI3K-AKT信號通路及GABA水平比較 治療前,兩組PI3K、AKT相對表達量及GABA水平比較,差異無統計學意義(P>0.05)。治療后,兩組PI3K、AKT及GABA均顯著改善,且研究組PI3K、AKT顯著低于對照組,GABA顯著高于對照組(均P<0.05),見表2、3。

表2 兩組臨床改善指標及GABA水平比較

表3 兩組PI3K-AKT信號通路比較

2.4兩組多導睡眠監測儀指標比較 治療前,兩組TST、SE、TS1、TS2、TS3、TS4、REM、WASO、SL差異無統計學意義(P>0.05)。治療后,兩組TST、SE、TS1、TS2、TS3、TS4、REM、WASO、SL均顯著改善,且研究組以上指標改善顯著優于對照組(均P<0.05),見表4。

2.5兩組睡眠質量比較 治療前,兩組睡眠效率、日間功能障礙、睡眠質量、睡眠時間、睡眠障礙、入睡時間及總分差異無統計學意義(P>0.05)。治療后,兩組睡眠效率、日間功能障礙、睡眠質量、睡眠時間、睡眠障礙、入睡時間及總分均顯著改善,且研究組睡眠效率、日間功能障礙、睡眠質量、睡眠時間、睡眠障礙、入睡時間及總分評分顯著低于對照組(均P<0.05),見表5。

表4 兩組多導睡眠監測儀指標比較

表5 兩組睡眠質量比較分)

3 討 論

老年失眠表現為入睡困難、夜間醒來頻繁、早醒等〔10〕,對生活質量和健康狀態都會產生不良影響。統計數據顯示〔11〕,老年失眠患病率高達30%～50%,其中女性比男性更容易受到影響。隨著年齡的增長,人體內分泌系統和神經系統等逐漸衰退,導致身體代謝率下降、免疫力下降等問題,從而引起睡眠質量下降,老年失眠的發生率也逐漸升高。中醫學中,失眠癥主要表現為“不寐”“不得眠”,多由于勞神思慮過度、情志不暢等導致神失所養〔12〕。清末名醫張錫純曾提出“心神共主神明”的理念,強調心神與腦神共同維持人體情志活動。因此,治療失眠的關鍵在于調節身體內部功能,而通督則是調節身體內部機能的重要途徑〔13〕。

本研究采用的平衡針灸法,通過針灸的方法給患者的神經支進行有效的刺激,較為迅速對患者的中樞指揮系統進行應激性調整,同時還可以對機體的遞質進行優化調控,提升患者的治療效果。有研究通過對患者GABA水平分析顯示,患者的GABA水平得到有效提升,改善遞質的異常分布〔14〕。GABA是一種神經遞質,在神經系統中起到抑制性調節作用,其能夠結合到神經元膜上的受體上,從而抑制神經元的興奮性〔15〕。在睡眠過程中,GABA能夠降低大腦皮層的興奮性,使人產生困倦和進入睡眠狀態。因此,GABA水平的改變會導致睡眠障礙。而在本研究中,隨著患者GABA水平的提升,患者的治療效果及睡眠質量得到顯著的改善。同時也有研究認為,在對患者進行平衡針灸法進行治療過程中,可以對患者神經系統的炎性反應進行優化,通過機體的自我修復作用,進而改善局部的新陳代謝紊亂狀態〔16〕。PI3K-AKT信號通路在調節神經元生長、存活和突觸可塑性等方面發揮著重要作用〔17〕,該通路能夠通過激活AKT蛋白激酶來促進突觸形成和維持。而在老年人中,這一信號通路則會發生變化,從而導致老年失眠。首先,在老年人中,PI3K-AKT信號通路通常會受到抑制。在大腦皮層中,AKT蛋白激酶的活性下降,導致突觸可塑性降低,從而影響睡眠質量。此外,老年人PI3K-AKT信號通路可能會受到一些損傷因素的影響,如氧化應激、炎癥反應等,導致AKT激酶的活性下降,從而影響突觸可塑性和神經元存活〔18〕。其次,PI3K-AKT信號通路還與老年失眠相關的神經遞質有關,該通路能夠調節多巴胺、5-羥色胺等神經遞質的合成和釋放〔19〕。黃攀登等〔20〕在對慢性失眠患者的治療中,通過對PI3K-AKT信號通路的改善及治療效果的分析,發現其呈現顯著的相關性,與本研究結果一致。