喜炎平聯(lián)合沙丁胺醇對(duì)兒童哮喘及輔助性T 細(xì)胞2/輔助性T 細(xì)胞17 表達(dá)的作用

吳岳彪,蔡露良,林魯飛

海口市第四人民醫(yī)院兒科，海口 571100

哮喘是兒童多見(jiàn)的呼吸系統(tǒng)疾病［1］。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為是多因素（包括遺傳、環(huán)境）共同作用導(dǎo)致的結(jié)果［2-3］。臨床上常使用支氣管擴(kuò)張劑，以解除氣道平滑肌痙攣，緩解哮喘患兒的臨床癥狀、異常體征［4］。沙丁胺醇是適用于任何年齡兒童的短效（吸入型）β2受體激動(dòng)劑，可濕化氣道，止咳平喘，能快速改善通氣功能，防范氣道痙攣［5］。因部分患兒不能正確掌握吸入技術(shù)、部分家長(zhǎng)擔(dān)憂(yōu)藥物相關(guān)不良反應(yīng)等，導(dǎo)致部分患兒不能堅(jiān)持規(guī)范治療，臨床療效不理想。為提高兒童哮喘的臨床療效，有必要優(yōu)化臨床治療方案。中藥不良反應(yīng)小，易被患兒、患兒家長(zhǎng)接受。因此，本研究試聯(lián)合中藥，充分發(fā)揮中醫(yī)中藥治療兒童哮喘的優(yōu)勢(shì)。喜炎平藥物的主要成分為穿心蓮內(nèi)酯磺化物［6］，其具有解熱、鎮(zhèn)咳等藥理作用，適用于多種呼吸系統(tǒng)疾病的治療。且與沙丁胺醇聯(lián)用治療兒童哮喘或能實(shí)現(xiàn)中西醫(yī)優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，提升臨床療效。本研究觀(guān)察喜炎平聯(lián)合沙丁胺醇治療兒童哮喘的臨床療效。

1 資料

1.1 臨床資料

選擇到本院就診的哮喘患兒76 例，用隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組（n=38）與研究組（n=38），2 組臨床資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。見(jiàn)表1。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

表1 2 組臨床資料的比較 （n=38，±s）Tab.1 Comparison of clinical information between the 2 groups （n=38，±s）

表1 2 組臨床資料的比較 （n=38，±s）Tab.1 Comparison of clinical information between the 2 groups （n=38，±s）

項(xiàng)目對(duì)照組研究組χ2/t/Z P男∶女22∶16 25∶13 0.502 0.479年齡/歲10.69±1.43 10.11±1.52 1.713 0.091病程/年2.04±0.45 2.11±0.37 0.741 0.461嚴(yán)重程度分級(jí)/例第1 級(jí)10 7-0.497 0.619第2 級(jí)16 18第3 級(jí)8 10第4 級(jí)43

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合哮喘診斷，診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南（2016年版）》［7］；②年齡為4～14 歲；③首次治療或停止規(guī)范治療＞3 個(gè)月；④患兒家屬對(duì)本研究知情同意。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①對(duì)本研究所用藥物過(guò)敏；②嚴(yán)重器質(zhì)性疾病；③免疫缺陷；④納入本次研究前3 周內(nèi)出現(xiàn)過(guò)呼吸道感染；⑤入組前4 周內(nèi)服用過(guò)糖皮質(zhì)激素等藥物；⑥合并精神疾病。

2 方法

2.1 治療方案

對(duì)照組給予常規(guī)治療：參照《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南（2016年版）》［7］予以常規(guī)治療，包括解痙、平喘和氧療等。2.5 mL 沙丁胺醇+9 g·L-1氯化鈉注射液2 mL，加壓霧化，吸入15 min，每日2 次。研究組在對(duì)照組治療的基礎(chǔ)上加用喜炎平。喜炎平注射液150 mg 加入9 g·L-1氯化鈉注射液中，靜脈滴注，每日1 次。2 組療程均為4 周。

2.2 觀(guān)察指標(biāo)

2.2.1 臨床療效 參考文獻(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)［8］制定療效標(biāo)準(zhǔn)。①顯效：哮喘癥狀、體征顯著緩解；②有效：哮喘癥狀、體征有一定減輕；③無(wú)效：哮喘癥狀、體征基本無(wú)好轉(zhuǎn)。總有效率=［（顯效例數(shù)+有效例數(shù)）/總例數(shù)］×100%。

2.2.2 外周血輔助性T 細(xì)胞（T helper cell，Th）2、Th17 表達(dá) 治療前、后取空腹肘部靜脈血6 mL，分2份，1 份用流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周血Th2、Th17 細(xì)胞水平，1 份離心后留取血清，用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-4、IL-17 水平。

2. 2. 3 肺功能 治療前后用肺功能儀（6200 型，美國(guó) Sensor Medics 公司）檢查肺功能指標(biāo)，共4 項(xiàng)：①第1 秒用力呼氣容積（forced expiratory volume in 1 s econd，F(xiàn)EV1）；②FEV1/用力肺活量（forced vital capacity，F(xiàn)VC）；③呼氣峰值流速（peak expiratory flow，PEF）；④呼氣高峰流量（peak expiratory flow rate，PEFR）。

2.2.4 循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞（circulating endothelial cells，CEC）與白三烯C4（leukotriene C4，LTC4） 治療前后取患兒靜脈血2 mL，加38 g·L-1枸櫞酸鈉抗凝，檢測(cè)0.9 μL 中CEC 數(shù)量；用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清LTC4 水平。

2.2.5 復(fù)發(fā)率 隨訪(fǎng)患兒24 周，統(tǒng)計(jì)各組哮喘患兒的復(fù)發(fā)情況。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析使用SPSS 23.0。計(jì)量資料（外周血Th2、Th17 表達(dá)情況等多項(xiàng)指標(biāo)）符合正態(tài)分布，均用（±s)表示，行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料（復(fù)發(fā)率等多項(xiàng)指標(biāo)）用“例（%）”表示，行χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 2 組臨床療效的比較

研究組的總有效率（92.11%）高于對(duì)照組（71.05%）（χ2=5.604，P=0.018）。見(jiàn)表2。

表2 臨床療效的比較 （n=38）Tab.2 Comparison of clinical efficacy （n=38）

3.2 2 組外周血及血清指標(biāo)水平的比較

治療后，2 組外周血Th2、Th17 細(xì)胞水平較治療前降低（P＜0.05），血清IL-4、IL-17 水平較治療前降低（P＜0.05），且研究組以上指標(biāo)較對(duì)照組均更低（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 2 組外周血Th2、Th17 表達(dá)情況及血清IL-4、IL-17 水平的比較 （n=38，±s）Tab.3 Expression of Th2 and Th17 in peripheral blood and comparison of serum IL-4 and IL-17 levels between the 2 groups （n=38，±s）

表3 2 組外周血Th2、Th17 表達(dá)情況及血清IL-4、IL-17 水平的比較 （n=38，±s）Tab.3 Expression of Th2 and Th17 in peripheral blood and comparison of serum IL-4 and IL-17 levels between the 2 groups （n=38，±s）

注：與同組治療前比較，*P＜0.05。

項(xiàng)目對(duì)照組研究組tP外周血Th2 細(xì)胞水平治療前0.89%±0.21%0.86%±0.24%0.580 0.564治療后0.77%±0.19%*0.65%±0.17%*2.901 0.005外周血Th17 細(xì)胞水平治療前1.84%±0.22%1.88%±0.23%0.775 0.441治療后0.75%±0.17%*0.51%±0.11%*7.307 0.000血清IL-4 水平/（ng·mL-1）治療前17.35±3.47 18.44±3.34 1.395 0.167治療后15.26±2.36*13.52±2.13*3.374 0.001血清IL-17 水平/（ng·mL-1）治療前33.89±5.75 35.05±6.18 0.847 0.400治療后29.32±5.26*25.83±4.47*3.117 0.003

3.3 2 組肺功能的比較

治療后，2 組肺功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果（FEV1、FEV1/FVC、PEF、PEFR）較治療前均升高（P＜0.05），且研究組肺功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果均較對(duì)照組更高（P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表4 2 組肺功能的比較 （n=38，xˉ±s）Tab.4 Comparison of pulmonary function between the 2 groups (n=38，±s)

表4 2 組肺功能的比較 （n=38，xˉ±s）Tab.4 Comparison of pulmonary function between the 2 groups (n=38，±s)

注：與同組治療前比較，*P＜0.05。

項(xiàng)目對(duì)照組研究組tP FEV1/L治療前1.34±0.25 1.38±0.27 0.670 0.505治療后1.68±0.34*1.89±0.38*2.539 0.013 FEV1/FVC 值治療前57.92%±8.33%59.22%±7.49%0.715 0.477治療后66.43%±8.46%*70.42%±7.04%*2.235 0.028 PEF/（L·s-1）治療前2.84±0.56 2.78±0.59 0.455 0.651治療后3.93±0.52*4.24±0.45*2.779 0.007 PEFR/（L·s-1）治療前1.49±0.32 1.46±0.28 0.435 0.665治療后2.96±0.48*3.24±0.52*2.439 0.017

3.4 2 組CEC、LTC4 的比較

治療后，2 組的CEC、LTC4 值較治療前降低（P＜0.05），且研究組CEC、LTC4 值較對(duì)照組更低（P＜0.05）。見(jiàn)表5。

表5 2 組CEC、LTC4 的比較 （n=38，±s）Tab.5 Comparison of CEC and LTC4 between the 2 groups（n=38，±s）

表5 2 組CEC、LTC4 的比較 （n=38，±s）Tab.5 Comparison of CEC and LTC4 between the 2 groups（n=38，±s）

注：與同組治療前比較，*P＜0.05。

項(xiàng)目對(duì)照組研究組tP 0.9 μLCEC/個(gè)治療前6.94±1.45 7.21±1.72 0.740 0.462治療后5.86±1.13*5.02±1.01*3.417 0.001 LTC4/（ng·mL-1）治療前14.34±2.19 13.96±2.27 0.743 0.460治療后9.49±1.76*7.73±1.28*4.985 0.000

3.5 2 組復(fù)發(fā)率的比較

隨訪(fǎng)24 周，研究組的復(fù)發(fā)率［7.89%（3/38）］低于對(duì)照組［26.32%（10/38）］（χ2=4.547，P=0.033）。

4 討論

喜炎平為中藥注射劑，其主要成分為穿心蓮內(nèi)酯磺化物，能清熱、解毒、止咳，現(xiàn)常用于呼吸系統(tǒng)疾病的輔助治療［9-10］。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究顯示，喜炎平注射液可促進(jìn)金黃色葡萄球菌感染小鼠外周血中性粒細(xì)胞和腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能恢復(fù)正常，繼而增強(qiáng)機(jī)體抗感染能力及藥物殺菌作用［11］。本研究結(jié)果顯示，喜炎平聯(lián)合沙丁胺醇治療兒童哮喘療效顯著。與占文君［12］的研究結(jié)論一致。

Th 細(xì)胞參與哮喘氣道慢性炎癥，能產(chǎn)生免疫調(diào)節(jié)作用［13］。國(guó)內(nèi)大量研究指出，哮喘的發(fā)生、進(jìn)展與Th2 細(xì)胞占優(yōu)勢(shì)的Th1/Th2 失衡有關(guān)［14］。Th2 細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄因子在細(xì)胞免疫反應(yīng)過(guò)程中發(fā)揮一定調(diào)節(jié)作用，通常由IL-4（炎性因子）驅(qū)動(dòng)，可活化肥大細(xì)胞，加快組胺、血清素等的釋放進(jìn)程，激發(fā)氣道收縮，Th2過(guò)度激活是哮喘的誘發(fā)因素。Th17 與Th2 不同，有相對(duì)獨(dú)立的分化路徑，同樣參與哮喘免疫紊亂過(guò)程［15］。Th17 本身可釋放IL-17（炎性因子），可致免疫失衡，增加氣道高反應(yīng)性，阻塞呼吸道［16］。本研究重點(diǎn)觀(guān)察了外周血Th2、Th17 細(xì)胞水平與血清IL-4、IL-17 水平變化，結(jié)果顯示，喜炎平聯(lián)合沙丁胺醇可改善哮喘患兒免疫機(jī)制失衡，推測(cè)可能是喜炎平聯(lián)合沙丁胺醇治療兒童哮喘的機(jī)制。

促進(jìn)肺功能的改善是治療兒童哮喘的目標(biāo)之一。肺功能檢查是呼吸系統(tǒng)疾病的重要檢查項(xiàng)目［17］。文獻(xiàn)報(bào)道［18］，監(jiān)測(cè)肺功能可明確診斷兒童哮喘。本研究通過(guò)觀(guān)察肺功能指標(biāo)（FEV1、FEV1/FVC值、PEF、PEFR）檢測(cè)結(jié)果以明確診斷患兒氣道功能恢復(fù)情況。表4 結(jié)果顯示，喜炎平聯(lián)合沙丁胺醇可改善哮喘患兒的肺功能。分析原因可能是，常規(guī)治療聯(lián)合沙丁胺醇能溫養(yǎng)皮毛、開(kāi)泄腠理，以復(fù)肺之宣降。

據(jù)報(bào)道，兒童哮喘的發(fā)生、進(jìn)展與CEC 和LTC4值變化存在關(guān)聯(lián)［19-20］。CEC 檢測(cè)值可反映呼吸道內(nèi)皮細(xì)胞損傷程度。王紅偉［21］在研究中指出，小兒哮喘發(fā)病后將引起CEC 值異常增高，其增幅與哮喘嚴(yán)重程度有關(guān)，依據(jù)CEC 值的變化可輔助判斷哮喘患兒的病情與療效。LTC4 在兒童哮喘發(fā)生、進(jìn)展過(guò)程中扮演重要角色，可收縮支氣管平滑肌、增加氣道高反應(yīng)性、誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞聚集在氣道，進(jìn)而加劇氣道炎癥反應(yīng)及病情進(jìn)展［22］。表5 結(jié)果顯示，喜炎平聯(lián)合沙丁胺醇治療兒童哮喘，可降低CEC、LTC4 水平。另外，隨訪(fǎng)24 周，研究組復(fù)發(fā)率［7.89%（3/38）］低于對(duì)照組［26.32%（10/38）］（χ2=4.547，P=0.033）。結(jié)果表明喜炎平聯(lián)合沙丁胺醇治療兒童哮喘復(fù)發(fā)率低。

綜上所述，喜炎平聯(lián)合沙丁胺醇可改善哮喘患兒肺功能與免疫機(jī)制失衡，降低CEC、LTC4 水平，臨床療效顯著，且復(fù)發(fā)率低。