40%咪鮮胺銅鹽·氟環唑懸浮劑分析方法

羅 琳，袁玉兵

(1.安道麥輝豐(江蘇)有限公司，江蘇 鹽城 224100；2.江蘇輝豐石化有限公司，江蘇 鹽城 224100)

1 前言

40%咪鮮胺銅鹽·氟環唑懸浮劑(福滿美)是由咪鮮胺銅鹽和氟環唑復配而成的殺菌劑，兼具保護和治療作用，能較好地防治小麥赤霉病、褐斑病[1]和水稻稻曲病[2-4]、稻瘟病、紋枯病[5-8]、花生葉斑病[9]等病害。“福滿美”內吸滲透性強，藥效持續期長，可控制小麥、水稻等農作物的多種病害，同時能大大提高農作物的產量。因此40%咪鮮胺銅鹽·氟環唑懸浮劑的含量對小麥的增產和病害防治的重要性與藥效不言而喻。目前該產品兩種有效成分咪鮮胺與氟環唑含量分析方法[10-12]對40%咪鮮胺銅鹽·氟環唑懸浮劑有干擾，本文開發的液相色譜分析方法能同時分離并測定兩種組分的含量并經過驗證。

2 氟環唑與咪鮮胺含量測定方法

2.1 方法提要 試樣用乙腈溶解，以乙腈∶水=60∶40為流動相，使用以Eclipse Plus-C84.6×250 mm，5 μm色譜柱和紫外檢測器，波長270 nm，流速1.0 mL/min，對試樣中的氟環唑與咪鮮胺進行高效液相色譜分離，外標法定量。

2.2 試劑和溶液 乙腈：色譜純/分析純；水∶新制二次蒸餾水。

2.3 標準品

2.3.1 氟環唑標準品 標準品化學名稱、化學結構、CAS號如下：

圖1 氟環唑的結構

中文名：(2RS，3SR)-1-[3-(2-氯苯基)-2，3-氧橋-2-(4-氟苯基)丙基]-1H-1，2，4-三唑

CAS號：135319-73-2

分子式：C17H13ClFN3O

分子量：329.76(按2011年國際相對原子質量計)

2.3.2 咪鮮胺標準品 標準品化學名稱、化學結構、CAS號如下：

圖2 咪鮮胺的結構

中文名：N-丙基-N-[2-(2，4，6-三氯苯氧基)乙基]-1H-咪唑-1-甲酰胺

CAS號：67747-09-5

分子式：C15H16Cl13N3O2

分子量：376.7(按2011年國際相對原子質量計)

2.4 儀器 高效液相色譜儀：具有可變波長紫外檢測器；色譜數據處理工作站；色譜柱：4.6×250 mm，5μm不銹鋼柱，內裝Eclipse Plus-C8填充物；微量進樣器：50 μL；超聲波清洗器。

2.5 高效液相色譜操作條件 流動相：乙腈∶水=60∶40；流速：1.0 mL/min；柱溫：30℃；檢測波長：270 nm；進樣體積：10 μL；運行時間：15 min；保留時間：氟環唑約6.11 min，咪鮮胺約8.38 min。

2.6 測定步驟

2.6.1 標樣溶液的配制 準確稱取氟環唑標樣50 mg(精確至0.000 2 g)、咪鮮胺標樣150 mg(精確至0.000 2 g)置于同一50 mL容量瓶中，用乙腈溶解定容到刻度，搖勻。

2.6.2 試樣溶液的配制 準確稱取含氟環唑約50 mg(咪鮮胺約150 mg)(精確至0.000 1 g)的試樣置于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解定容到刻度，超聲5 min用0.45 um濾膜過濾。

2.6.3 測定 在上述色譜條件下，待儀器穩定后，先注入數針標樣溶液，直至標樣的響應值基本穩定后，按下列順序進樣：標樣溶液，試樣溶液，試樣溶液，標樣溶液。

2.7 計算 將測得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標樣溶液中的氟環唑與咪鮮胺峰面積分別進行平均。試樣中氟環唑質量百分含量X1按式(1)計算，咪鮮胺銅鹽質量百分含量X2按式(2)計算：

(1)

(2)

式中：

A1—試樣溶液中氟環唑峰面積的平均值；

A2—標樣溶液中氟環唑峰面積的平均值；

A3—試樣溶液中咪鮮胺峰面積的平均值；

A4—標樣溶液中咪鮮胺峰面積的平均值；

m1—試樣的質量，g；

m2—氟環唑標樣的質量，g；

m3—咪鮮胺標樣的質量，g；

p—標樣中氟環唑、咪鮮胺的含量，%；

1.089—咪鮮胺換算成咪鮮胺銅鹽的換算系數。

2.8 允許差 2次平行測定結果之差≤0.5%，取其算術平均值作為測定結果。

3 方法特異性和非分析物的干擾分析

按照配方比例，將除氟環唑原藥、咪鮮胺銅鹽原藥以外的所有助劑混勻，作制劑空白，稱500 mg左右制劑空白，按照上述方法進行處理，并檢測，氟環唑約6.11 min、咪鮮胺約8.38 min(原藥保留時間)處無響應，證明非分析物對氟環唑、咪鮮胺含量的測定無干擾。

將制劑及標樣按照2中方法進行處理并檢測，方法的拖尾因子、理論塔板數和峰純度(表1)。標樣、試樣液相色譜圖及光譜圖(圖3～6)。

表1 方法特異性

圖3 標樣(SD5)的液相色譜圖

圖4 標樣(SD5)的光譜圖

圖6 試樣(Sample1)的光譜圖

4 線性相關

4.1 標準系列溶液的配置 準確稱取氟環唑標準品39.6 mg、咪鮮胺標準品121.2 mg于同一50 mL容量瓶中；氟環唑標準品45.4 mg、咪鮮胺標準品136.2 mg于同一50 mL容量瓶中；氟環唑標準品51.0 mg、咪鮮胺標準品151 mg于同一50 mL容量瓶中；氟環唑標準品55.4 mg、咪鮮胺標準品164.0 mg于同一50 mL容量瓶中；氟環唑標準品61.4 mg、咪鮮胺標準品180.8 mg于同一50 mL容量瓶中，用乙腈溶解稀釋后，用乙腈定容，搖勻。分別標為SD1至SD5。其中稱重重量精確到±0.1 mg，氟環唑標準品含98.7%，咪鮮胺標準品含量98.60%。

4.2 線性關系測定 在上述色譜條件下，待儀器穩定后，進不同濃度的標準溶液，測定其相應的峰面積，以濃度為橫坐標、峰面積值為縱坐標進行線性回歸，(表2～3、圖7～8)。結果表明，氟環唑的濃度在0.781 8～1.212 0 mg/mL之間具有良好的線性范圍。線性回歸方程為y= 991.65x+4.131 4，相關系數R2=0.999 5。咪鮮胺的濃度在2.390 0～3.565 4 mg/mL之間具有良好的線性范圍。線性回歸方程為y=581.94x～13.434，相關系數R2=0.999 6。

表2 氟環唑的線性范圍測定結果

表3 咪鮮胺的線性范圍測定結果

圖7 氟環唑的線性范圍曲線

圖8 咪鮮胺的線性范圍曲線

5 準確度

在用2中方法檢測的空白樣品中加入一定量的氟環唑與咪鮮胺標準品，再按2中方法步驟測定其含量，計算回收率，其結果(表4～5)：

表4 氟環唑測定準確度

表5 咪鮮胺測定準確度

氟環唑的平均回收率為100.26%。回收率在98.98%與101.05%之間，表明本方法用于40%咪鮮胺銅鹽·氟環唑懸浮劑中氟環唑的定量分析是可行的。

咪鮮胺的平均回收率為100.80%。回收率在99.79%與101.52%之間，表明本方法用于40%咪鮮胺銅鹽·氟環唑懸浮劑中咪鮮胺的定量分析是可行的。

6 精密度

分別稱取5個40%咪鮮胺銅鹽·氟環唑懸浮劑至50 mL容量瓶，用乙腈稀釋定容至刻度，按照2中方法測定氟環唑與咪鮮胺含量(表6～7)。

表6 氟環唑測定方法的精密度

表7 咪鮮胺測定方法的精密度

7 結論

40%咪鮮胺銅鹽·氟環唑懸浮劑的有效成分含量分析方法：試樣用乙腈溶解，以乙腈∶水=60∶40為流動相，使用以Eclipse Plus-C84.6×250 mm，5 μm色譜柱和紫外檢測器，波長270 nm，流速1.0 mL/min，經過方法特異性驗證無干擾，線性關系分別為0.999 5和0.999 6，準確度分別為100.26%和100.80%，相對標準偏差分別為0.24%和0.55%，各項驗證均符合分析標準，且簡單高效易操作，因此該方法可用于產品質量檢測，具有很強的可行性和實際應用價值。