組織內TRIM3及FoxO1表達與原發性肝癌患者病理特征及預后間的關系分析

張莉莉 甄飛

原發性肝癌(PHC)在我國發病率較高,PHC可增加患者發生肝功能衰竭、多器官功能障礙的風險,提高病死率[1]。盡管可以通過手術及微創介入治療PHC,但其復發率仍然較高,患者5年生存率也較低。影響PHC患者預后的因素也較多,如腫瘤細胞分化程度低、發生轉移、門靜脈侵犯等,均可導致不良預后[2]。三重基序蛋白3(TRIM3)及叉頭轉錄因子O家族1(FoxO1)是與腫瘤相關的基因蛋白,已被證實其表達缺失可導致多種惡性腫瘤,但TRIM3及FoxO1與PHC的關系研究較少[3-4]。因此本研究旨在探討組織內TRIM3及FoxO1表達與PHC患者病理特征及預后間的關系。

資料與方法

一、納入標準

①PHC診斷符合相關標準[5];②肝功能Child A或B級;③經術后病理學檢查證實;④臨床資料完整。

二、排除標準

①人類免疫缺陷病毒感染;②轉移性肝癌;③接受過放化療治療;④合并其他惡性腫瘤;⑤長期應用免疫抑制劑;⑥繼發性肝癌;⑦有合并性腦病。

三、一般資料

回顧性分析2018年1月—2019年12月南京醫科大學附屬淮安第一醫院119例PHC患者的臨床資料。本研究獲得南京醫科大學附屬淮安第一醫院醫學倫理委員會批準(2018-04號)。

四、方法

(一)收集資料 收集患者的臨床資料。

(二)TRIM3、FoxO1檢測 采用免疫組化染色法檢測患者肝癌組織與癌旁組織內TRIM3、FoxO1表達,癌旁組織取腫瘤周圍5 cm內的肝組織。判斷標準：TRIM3主要分布于胞漿中,FoxO1主要分布于細胞核中,顯微鏡下均出現棕黃色顆粒判定為陽性細胞,依據染色強度評分：0分(未染色)、1分(淡黃色)、2分(棕黃色)、3分(褐色),依據染色細胞占比評分：1分(≤10%)、2分(11%～50%)、3分(51%～75%)、4分(>75%),兩者之積≥3分為陽性,<3分為陰性。

(三)隨訪觀察 電話或門診隨訪3年,觀察患者的3年生存情況。

五、統計學方法

應用SPSS 22.0統計軟件處理數據。計數資料用百分比(%)表示,采用χ2檢驗,采取Kaplan-Meier法繪制生存曲線。P<0.05為差異有統計學意義。

結 果

一、PHC患者肝癌組織與癌旁組織TRIM3、FoxO1表達比較

PHC患者肝癌組織中TRIM3、FoxO1陽性率顯著低于癌旁組織(P<0.05)。見表1。

表1 PHC患者肝癌組織與癌旁組織TRIM3、FoxO1表達比較[n(%)]

二、肝癌組織內TRIM3及FoxO1表達與PHC患者病理特征間的關系

TRIM3陽性患者腫瘤大小<5 cm、高分化、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期的占比顯著高于TRIM3陰性患者(P<0.05),FoxO1陽性患者腫瘤大小<5 cm、單發、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期的占比顯著高于FoxO1陰性患者(P<0.05)。見表2。

表2 肝癌組織內TRIM3及FoxO1表達與PHC患者病理特征間的關系[n(%)]

三、肝癌組織內不同TRIM3及FoxO1表達PHC患者預后比較

對119例PHC患者行3年隨訪,3年生存率為45.38 %(54/119);55例肝癌組織TRIM3陽性患者3年生存率為61.82 %(34/55),64例肝癌組織TRIM3陰性患者3年生存率為31.25 %(20/64),Kaplan-Meier生存分析顯示,兩組的3年生存率差異有統計學意義(Log Rank=10.242,P=0.001);50例肝癌組織FoxO1陽性患者3年生存率為60.00 %(30/50),69例肝癌組織FoxO1陰性患者3年生存率為34.78 %(24/69),Kaplan-Meier生存分析顯示,兩組的3年生存率差異有統計學意義(Log Rank=6.978,P=0.008)。見圖1。

圖1 肝癌組織內不同TRIM3及FoxO1表達PHC患者3年生存曲線

討 論

近年來有較多研究報道表明,基因等位突變、基因缺失等遺傳因素在PHC的發生、發展過程中具有重要作用[6-7]。因此在早期診斷PHC時對其遺傳基因進行研究,可能為PHC的早期發現及治療提供新的方法。研究發現[8-10],TRIM3、FoxO1表達與食管鱗狀細胞癌、卵巢癌、子宮內膜癌等多種惡性腫瘤相關,TRIM3減少可增加食管鱗狀細胞癌淋巴結轉移及微淋巴管密度,FoxO1可影響卵巢癌、子宮內膜癌患者的腫瘤細胞形態及分期,但TRIM3、FoxO1與PHC的相關研究較少。

本研究結果顯示,TRIM3、FoxO1均在肝癌組織中陰性表達較多,在癌旁組織中陽性表達較多,提示TRIM3及FoxO1表達缺失或低表達對PHC的發生、發展具有重要作用。腫瘤的惡化和進展離不開單個或多個基因突變的發生,TRIM3屬于抑癌基因,其陽性表達有助于延緩肝癌細胞增殖。有研究證實[11],TRIM3在其他惡性腫瘤中也有抑癌效果,也有研究顯示[12-14],TRIM家族的其他蛋白,如TRIM19、TRIM21、TRIM24等,與細胞的周期、分化、凋亡相關。FoxO1具有穩定癌細胞周期的作用,其水平變化可以調控癌細胞的分化成熟及黏附能力[15]。FoxO1陰性表達可使肝癌細胞的增殖調控異常,增強其持續性自我增殖能力;同時改變肝癌細胞的侵襲能力,顯著提高上皮細胞突破基底膜的風險[16]。

本研究在觀察TRIM3表達與PHC患者病理特征的關系時發現,TRIM3表達與腫瘤大小、病理分級、TNM分期具有相關性,FoxO1表達與腫瘤大小、數量、TNM分期具有相關性。TRIM3陰性或低表達時可以促進腫瘤生長,TRIM3陽性及高表達可能通過抑制腫瘤細胞克隆形成、遷移和侵襲,使肝癌細胞在細胞周期G1期出現生長阻滯,并調節p21蛋白的表達及獲細胞的敏感性,導致肝癌細胞凋亡,從而對腫瘤大小、病理分級及TNM分期產生影響[17]。FoxO1表達與PHC患者病理特征的關系主要體現在其對腫瘤大小、數量、TNM分期的影響,FoxO1陰性表達可以使肝癌細胞侵襲正常肝臟上皮組織的能力增強,擴大癌栓深度和癌栓范圍,從而提高患者臨床分期;FoxO1表達缺失可能通過改變肝臟上皮細胞增殖特性影響腫瘤的大小和數量[18-20]。

另外,本研究結果顯示,TRIM3及FoxO1陽性的患者3年生存率均顯著高于TRIM3及FoxO1陰性的患者,提示TRIM3及FoxO1表達與PHC患者預后顯著相關,TRIM3及FoxO1陽性表達可延長患者生存時間,這可能是因為TRIM3及FoxO1蛋白陽性表達有利于腫瘤細胞生物學特征的穩定,從而可使腫瘤細胞發生轉移及復發的風險降低,進而影響患者的預后。

綜上所述,組織內TRIM3及FoxO1表達與PHC的疾病進展相關,可能起到抑癌作用,同時TRIM3、FoxO1可用于PHC患者預后的評估,為PHC的診治提供新的思路。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。