FGFR1蛋白在ER陽性乳腺癌中的表達(dá)情況及其與ER、預(yù)后的相關(guān)性

楚陽光 孫 勝 鄧小強(qiáng) 何 巖

作者單位：462000 河南省漯河市中心醫(yī)院

乳腺癌好發(fā)于女性群體,多由乳腺上皮細(xì)胞增殖失控所致,若不及時(shí)治療,腫瘤細(xì)胞可出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,引起相應(yīng)器官功能障礙,從而威脅患者生命[1-2]。雌激素受體(ER)陽性乳腺癌則主要指術(shù)后免疫組化檢示ER陽性的一類乳腺癌患者,該類患者普遍對內(nèi)分泌治療較為敏感,術(shù)后常需聯(lián)合內(nèi)分泌治療,以降低術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn),以獲得長期生存[3-4]。但臨床長期隨訪發(fā)現(xiàn),部分乳腺癌患者對內(nèi)分泌治療已經(jīng)發(fā)生耐藥現(xiàn)象,預(yù)后欠佳,若能尋找到與耐藥及預(yù)后相關(guān)的生物學(xué)指標(biāo),則有助于完善臨床治療方案,改善患者預(yù)后。成纖維細(xì)胞生長因子受體(FGFRs)屬于存在自身磷酸化活性的受體酪氨酸激酶,可參與細(xì)胞生長、新生血管形成等多種生物學(xué)過程。成纖維細(xì)胞生長因子受體1(FGFR1)則為FGFRs家族重要成員,臨床認(rèn)為其在多種惡性腫瘤內(nèi)均存在一定表達(dá),可能與腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移存在密切關(guān)系[5-6]。但關(guān)于FGFR1在ER陽性乳腺癌中的表達(dá)及與ER間的關(guān)系仍未能夠完全明確,且FGFR1與ER陽性乳腺癌患者預(yù)后的相關(guān)性仍需深入研究。鑒于此,本研究旨在分析FGFR1蛋白在ER陽性乳腺癌中的表達(dá)水平及與ER、預(yù)后的關(guān)系。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2016年1月至2019年1月我院收治的89例ER陽性乳腺癌患者臨床資料,其中年齡41～65歲,平均年齡(51.36±5.12)歲;體質(zhì)量指數(shù)18～27 kg/m2,平均體質(zhì)量指數(shù)(24.19±2.13)kg/m2;腫瘤分期:25例Ⅰ期,45例Ⅱ期,19例Ⅲ期;腫瘤大小:72例≤2 cm,17例>2 cm;腫瘤類型:80例浸潤性導(dǎo)管癌,9例其他;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移:49例未轉(zhuǎn)移,40例轉(zhuǎn)移;發(fā)病部位:43例左側(cè),46例右側(cè)。納入標(biāo)準(zhǔn):經(jīng)手術(shù)病理確診,均為單側(cè)乳腺癌;精神狀態(tài)正常;患者及家屬簽署知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn):伴有其他惡性腫瘤;存有心肺功能障礙;存在急慢性感染;存有凝血功能缺陷;中途隨訪失聯(lián)。

1.2 方法

所有患者均依據(jù)病情選取適宜的手術(shù)治療,并將切除的腫瘤標(biāo)本送檢,術(shù)后采用免疫組織化學(xué)法測定患者腫瘤標(biāo)本內(nèi)FGFR1表達(dá)情況。免疫組織化學(xué)法:選取美國Ventana Medical Systems公司生產(chǎn)的Benchmark XT自動染色儀進(jìn)行染色,FGFR1抗體為英國Abcam公司生產(chǎn)的兔抗人多克隆抗體,稀釋比例為1∶2000;取4 μm厚石蠟組織切片,經(jīng)脫蠟、水化、梯度乙醇處理,其中梯度乙醇為95%、75%、50%,再置于PBS中漂洗;之后將3% H2O2過氧化物酶加入其中,依次開展溫育一抗及二抗,并進(jìn)行顯色處理。ER、人表皮生長因子受體2(HER-2)、Ki-67、p53等使用北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司提供的小鼠抗人單克隆抗體開展免疫組織化學(xué)檢測。結(jié)果判定:ER陽性為可見細(xì)胞核著色且≥1%;陰性為無著色或陽性細(xì)胞數(shù)<1%;之后依據(jù)陽性細(xì)胞占比分為1+、2+、3+;HER-2陽性為>10%腫瘤細(xì)胞呈完整、均勻細(xì)胞著色(3+),陰性為無著色或≤10%腫瘤細(xì)胞呈不完整微弱細(xì)胞膜著色(0分),>10%腫瘤細(xì)胞呈不完整微弱的細(xì)胞膜著色(1+);Ki-67、p53陽性為腫瘤細(xì)胞核呈棕褐色或棕黃色顆粒,其中Ki-67陽性細(xì)胞數(shù)≥14%則為高陽性率,反之則為低陽性率;p53陽性細(xì)胞數(shù)>10%則為陽性,≤10%為陰性。FGFR1表達(dá)以細(xì)胞內(nèi)染色陽性細(xì)胞比例進(jìn)行評估,以10%為臨界值,≥10%則為高表達(dá),<10%則為低表達(dá)。免疫組化切片均由兩名病理醫(yī)師閱片,若出現(xiàn)不一致則進(jìn)行討論協(xié)商,給出統(tǒng)一結(jié)果。所有患者均隨訪5年,記錄生存情況,通過電話及門診復(fù)查方式隨訪。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)FGFR1蛋白表達(dá)水平:通過開展病理標(biāo)本檢測,統(tǒng)計(jì)89例ER陽性乳腺癌患者體內(nèi)FGFR1表達(dá)狀況。(2)FGFR1蛋白表達(dá)與臨床病理特征間關(guān)系:分析不同F(xiàn)GFR1表達(dá)患者年齡、腫瘤分期、腫瘤大小、腫瘤類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、發(fā)病部位、ER表達(dá)水平、HER-2表達(dá)、Ki-67表達(dá)、p53表達(dá)間差異。(3)FGFR1蛋白表達(dá)與生存率:隨訪3年,比較不同F(xiàn)GFR1蛋白表達(dá)患者生存率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 FGFR1蛋白表達(dá)水平

89例ER陽性乳腺癌患者體內(nèi)均存在FGFR1蛋白表達(dá),其中高表達(dá)58例,低表達(dá)31例。

2.2 FGFR1蛋白表達(dá)與臨床病理特征間關(guān)系

高、低表達(dá)組腫瘤分期、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER表達(dá)相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 FGFR1蛋白表達(dá)與臨床病理特征間關(guān)系(例,%)

2.3 FGFR1蛋白表達(dá)與生存率

隨訪3年,89例ER陽性患者存活71例,存活率為79.78(71/89)。FGFR1蛋白高表達(dá)組存活42例,存活率為72.41%(42/58);FGFR1蛋白低表達(dá)組存活29例,存活率為93.55%(29/31)。FGFR1蛋白低表達(dá)組存活率高于FGFR1蛋白高表達(dá)組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.593,P=0.018)。

3 討論

3.1 乳腺癌發(fā)病機(jī)制及治療現(xiàn)狀

乳腺癌病因復(fù)雜,臨床認(rèn)為遺傳、月經(jīng)初潮年齡早、哺乳時(shí)間短、絕經(jīng)年齡晚等多種高危因素不斷累積,延長了機(jī)體雌激素暴露時(shí)間,久之則可促使乳腺上皮細(xì)胞發(fā)生異常增生,最終形成腫瘤組織[7-8]。手術(shù)為治療乳腺癌首選方案,通過切除腫瘤組織能夠直接阻斷腫瘤浸潤及擴(kuò)散,延長患者生存時(shí)間[9]。術(shù)后為進(jìn)一步降低乳腺癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn),還需采取相應(yīng)輔助治療,以增強(qiáng)手術(shù)療效。臨床對于ER陽性患者,術(shù)后常采取內(nèi)分泌輔助治療,能夠阻斷激素對腫瘤的營養(yǎng)供給,以達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞生長目的,從而改善患者預(yù)后[10-11]。但長期隨訪發(fā)現(xiàn)部分ER陽性患者存在內(nèi)分泌耐藥現(xiàn)象,導(dǎo)致預(yù)后較差,若能于早期尋找到能夠?qū)R陽性患者預(yù)后評估的相關(guān)指標(biāo),則有助于完善治療方案,提高遠(yuǎn)期生存率。

3.2 血管形成與腫瘤關(guān)系

臨床認(rèn)為腫瘤的發(fā)生及發(fā)展均依賴于腫瘤血管的形成,當(dāng)腫瘤存在豐富血供后可迅速生長,并向周圍浸潤及轉(zhuǎn)移。而FGFRs家族能夠介導(dǎo)多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,其配體為堿性成纖維生長因子,廣泛分布于體內(nèi),可加速血管新生,故FGFRs與腫瘤發(fā)展關(guān)系密切[12-13]。本研究結(jié)果顯示,89例ER陽性乳腺癌患者FGFR1蛋白高表達(dá)58例,低表達(dá)31例;FGFR1蛋白高表達(dá)患者腫瘤分期Ⅲ期、腫瘤大小>2 cm、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及ER表達(dá)1+率高于FGFR1蛋白低表達(dá)患者;隨訪3年,89例ER陽性患者存活71例,存活率為79.78(71/89);FGFR1蛋白高表達(dá)組存活42例,存活率為72.41%(42/58);FGFR1蛋白低表達(dá)組存活29例,存活率為93.55%(29/31);FGFR1蛋白低表達(dá)組存活率高于FGFR1蛋白高表達(dá)組。提示FGFR1蛋白在ER陽性患者中存在不同程度表達(dá),且高表達(dá)患者腫瘤臨床分期更高,腫瘤更大,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)更大,預(yù)后更差。

3.3 FGFR1表達(dá)與腫瘤關(guān)系

FGFR1屬于FGFRs家族重要成員,正常情況下能夠促使絲裂原激活蛋白激酶及蛋白激酶B的轉(zhuǎn)錄,實(shí)現(xiàn)對管腔上皮細(xì)胞生長及分化的調(diào)控,且其處于異常高表達(dá)狀態(tài)時(shí)可激活磷脂酰肌醇-3-激酶、蛋白激酶等多種信號通路,該類通路的激活與乳腺正常生長發(fā)育密不可分[14-15]。而FGFR1高表達(dá)能夠參與腫瘤侵襲、腫瘤血管新生等多種過程。因此,當(dāng)FGFR1處于高表達(dá)狀態(tài)時(shí),患者常呈現(xiàn)出腫瘤分期高、淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移等特點(diǎn),而該類因素又是導(dǎo)致不良預(yù)后的重要因素,故FGFR1高表達(dá)可對患者預(yù)后造成影響。FGFR1表達(dá)高則ER表達(dá)降低,考慮FGFR1可能通過抑制ER的表達(dá)來介導(dǎo)內(nèi)分泌治療耐藥,故預(yù)后較差。

綜上所述,在ER陽性乳腺癌患者中FGFR1表達(dá)水平越高則ER表達(dá)越低,且FGFR1高表達(dá)與腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤大小關(guān)系密切,可作為影響患者預(yù)后的重要因素。