血清乳脂肪球表皮生長(zhǎng)因子8、鳶尾素對(duì)結(jié)直腸息肉病人復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)價(jià)值

劉玉杰，趙志強(qiáng)，王子琤

作者單位：1石家莊市中醫(yī)院肛腸科，河北 石家莊 050000；

2河北北方學(xué)院研究生學(xué)院，河北 張家口 075000

結(jié)直腸息肉是隆起于結(jié)腸、直腸黏膜表面的向腸腔突出的一類贅生物的統(tǒng)稱［1］，其早期并無(wú)任何癥狀，容易被病人忽視，后期可出現(xiàn)便血、貧血、腹痛、乏力等癥狀。及時(shí)進(jìn)行手術(shù)切除是結(jié)直腸息肉的主要治療方案，但術(shù)后復(fù)發(fā)依然比較常見(jiàn)。因此，尋找與結(jié)直腸息肉復(fù)發(fā)相關(guān)的生物標(biāo)志物對(duì)于臨床改善復(fù)發(fā)情況意義重大。乳脂肪球表皮生長(zhǎng)因子8（MFG-E8）是一種親脂性分泌型糖蛋白，已被證實(shí)在血管肉瘤［2］、肝細(xì)胞癌［3］、口腔鱗狀細(xì)胞癌［4］、結(jié)直腸癌［5］中表達(dá)上調(diào)，對(duì)疾病進(jìn)展不利。鳶尾素是一種是由纖維連結(jié)蛋白Ⅲ型域包含蛋白5（FNDC5）水解后產(chǎn)生的可分泌型肌源細(xì)胞因子［6］，能夠通過(guò)改變腸道菌群減輕潰瘍性結(jié)腸炎模型小鼠的炎癥［7］。目前尚未見(jiàn)兩者在結(jié)直腸息肉中的相關(guān)報(bào)道。本研究通過(guò)檢測(cè)結(jié)直腸息肉病人血清MFG-E8、鳶尾素水平，以探討其對(duì)結(jié)直腸息肉病人復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料以石家莊市中醫(yī)院2021 年6—12月收治的96 例結(jié)直腸息肉病人為息肉組進(jìn)行回顧性研究，另選取該院同期健康體檢志愿者96例為對(duì)照組。息肉組年齡范圍為32～75 歲，對(duì)照組年齡范圍為34～76 歲。兩組性別、年齡、身體質(zhì)量指數(shù)（BMI）水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 健康體檢志愿者96例與結(jié)直腸息肉96例基線資料比較

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）經(jīng)內(nèi)鏡檢查確認(rèn)為結(jié)直腸息肉；（2）接受結(jié)腸鏡鏡下結(jié)直腸息肉切除術(shù)；（3）同意術(shù)后半年的隨訪；（4）臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）家族性息肉病變、腸炎等其他腸道疾病病人；（2）結(jié)腸癌、直腸癌病人；（3）妊娠期及哺乳期病人；（4）心肝腎等重要器官功能障礙病人；（5）合并其他惡性腫瘤病人。

兩組受試者對(duì)研究?jī)?nèi)容知情并簽署書面同意書，本研究經(jīng)石家莊市中醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（批號(hào)20220311）。

1.2 研究方法

1.2.1 一般資料收集病人入院后，收集病人臨床資料，包括性別、年齡、BMI，吸煙、飲酒、高血壓、血脂異常、糖尿病。采用日本富士能電子結(jié)腸鏡（EG-590WR）進(jìn)行檢查，記錄息肉位置、息肉直徑、息肉數(shù)目。病人均接受結(jié)腸鏡鏡下結(jié)直腸息肉切除術(shù)，取術(shù)中切除的息肉組織進(jìn)行病理檢查。

1.2.2 血液樣本收集息肉組病人于入院次日清晨（對(duì)照組于體檢當(dāng)日）采集空腹靜脈血5 mL，4 ℃以3 000 r/min（離心半徑8 cm）離心10 min 分離血清，-80 ℃冰箱中保存待測(cè)。

1.2.3 血清MFG-E8、鳶尾素水平檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）檢測(cè)所有受試者血清MFGE8（試劑盒貨號(hào)FY-04025H1）、鳶尾素（試劑盒貨號(hào)FY-04025H1）水平，試劑盒均購(gòu)自上海富雨生物科技有限公司，操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3 隨訪病人術(shù)后進(jìn)行半年的隨訪，以結(jié)腸鏡檢查結(jié)果為判斷是否復(fù)發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)。隨訪期間無(wú)失訪病例，隨訪率100%。經(jīng)過(guò)半年的隨訪，有32 例病人出現(xiàn)復(fù)發(fā)，歸為復(fù)發(fā)組，其余64例歸為未復(fù)發(fā)組。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法SPSS 25.0 作為本研究數(shù)據(jù)的分析軟件。計(jì)量資料經(jīng)檢驗(yàn)符合正態(tài)分布，以表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例（%）表示，兩組間比較采用χ2檢驗(yàn)；受試者操作特征曲線（ROC 曲線）評(píng)價(jià)血清MFG-E8、鳶尾素水平對(duì)結(jié)直腸息肉病人復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)價(jià)值，MFG-E8、鳶尾素聯(lián)合預(yù)測(cè)與兩者單獨(dú)預(yù)測(cè)ROC 曲線下面積（AUC）的比較采用Z檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 息肉組與對(duì)照組血清MFG-E8、鳶尾素水平比較息肉組血清MFG-E8［（145.31±22.44）μg/L 比（92.39±15.65）μg/L］水平明顯高于對(duì)照組（t=18.95，P＜0.001），鳶尾素［（5.17±0.82）ng/L 比（8.54±1.13）ng/L］水平明顯低于對(duì)照組（t=23.65，P＜0.001）。

2.2 復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組血清MFG-E8、鳶尾素水平比較復(fù)發(fā)組血清MFG-E8［（163.39±26.31）μg/L 比（136.27±17.51）μg/L］水平明顯高于未復(fù)發(fā)組（t=6.01，P＜0.001），鳶尾素［（4.58±0.74）ng/L 比（5.46±0.86）ng/L］水平明顯低于未復(fù)發(fā)組（t=4.94，P＜0.001）。

2.3 復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組臨床資料比較經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，復(fù)發(fā)組性別、年齡、BMI、吸煙、飲酒、高血壓、血脂異常、糖尿病、息肉位置、息肉直徑、息肉數(shù)目與未復(fù)發(fā)組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），復(fù)發(fā)組組織病理類型、家族史與未復(fù)發(fā)組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 結(jié)直腸息肉96例術(shù)后復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組臨床資料比較

2.4 血清MFG-E8、鳶尾素水平對(duì)結(jié)直腸息肉病人復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)價(jià)值對(duì)復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組血清MFGE8、鳶尾素水平進(jìn)行ROC 曲線分析，結(jié)果顯示，血清MFG-E8 單獨(dú)預(yù)測(cè)結(jié)直腸息肉病人復(fù)發(fā)的AUC 為0.74［95%CI：（0.64，0.85）］，靈敏度、特異度分別為84.4%、71.3%，截?cái)嘀禐?50.68 μg/L；鳶尾素單獨(dú)預(yù)測(cè)結(jié)直腸息肉病人復(fù)發(fā)的AUC 為0.72［95%CI：（0.62，0.83）］，靈敏度、特異度分別為81.3%、73.4%，截?cái)嘀禐?.01 ng/L；兩者聯(lián)合預(yù)測(cè)結(jié)直腸息肉病人復(fù)發(fā)的AUC 為0.87［95%CI：（0.80，0.95）］，靈敏度、特異度分別為78.1%、85.9%，兩者聯(lián)合預(yù)測(cè)的AUC顯著大于MFG-E8 單獨(dú)預(yù)測(cè)的AUC（Z=1.88，P=0.030）及鳶尾素單獨(dú)預(yù)測(cè)的AUC（Z=2.27，P=0.011）。

3 討論

結(jié)直腸息肉的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，部分病人會(huì)出現(xiàn)便血、腹痛等胃腸道癥狀，甚至?xí)l(fā)展為惡性腫瘤［8］。結(jié)腸鏡下手術(shù)切除息肉是治療結(jié)直腸息肉的主要手段，但部分結(jié)直腸息肉病人接受手術(shù)后會(huì)出現(xiàn)復(fù)發(fā)，嚴(yán)重影響病人生活質(zhì)量。如何降低結(jié)直腸息肉的復(fù)發(fā)率，依然是困擾醫(yī)學(xué)界的重大難題。近年來(lái)，隨著分子生物學(xué)及醫(yī)學(xué)的不斷進(jìn)步，不斷有學(xué)者開(kāi)始將目光轉(zhuǎn)向分子研究，為結(jié)直腸息肉的治療和預(yù)后的改善提供了一定的依據(jù)［9-10］。尋找更多的與結(jié)直腸息肉復(fù)發(fā)相關(guān)的生物標(biāo)志物，對(duì)于結(jié)直腸息肉的治療及降低復(fù)發(fā)率具有重大的現(xiàn)實(shí)意義。

本研究通過(guò)對(duì)病人的臨床資料分析發(fā)現(xiàn)，有息肉家族史、組織病理類型（腺瘤性）與病人復(fù)發(fā)情況顯著相關(guān)，而性別、年齡、BMI、吸煙、飲酒、高血壓、血脂異常、糖尿病、息肉位置、息肉直徑、息肉數(shù)目等比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這與葛軍等［11］的研究存在一定的差異，與本研究所納入樣本數(shù)量較少有關(guān)，也可能與所納入病人的個(gè)體差異及生活習(xí)慣等因素具有一定的關(guān)系。

本研究中，結(jié)直腸息肉病人血清MFG-E8 水平升高，表明MFG-E8 在結(jié)腸腸息肉中起促進(jìn)作用。MFG-E8 是一種分泌型多效性糖蛋白，參與多種腫瘤的進(jìn)展。膠質(zhì)瘤細(xì)胞本身產(chǎn)生大量的MFG-E8，將其敲低后，膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖受到抑制，同時(shí)小鼠GL261 膠質(zhì)瘤實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ惋@示，敲除MFG-E8 可顯著減小腫瘤大小，延長(zhǎng)存活時(shí)間［12］。在肝細(xì)胞癌中，MFG-E8 表達(dá)上調(diào)，并能夠促進(jìn)肝腫瘤細(xì)胞系Huh7、HepG2 和Hep3B 的增殖，并能提高Huh7 細(xì)胞的遷移能力［3］。過(guò)表達(dá)MFG-E8 可通過(guò)調(diào)控磷脂酰肌醇3 激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信號(hào)通路促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞的遷移、侵襲和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化過(guò)程［13］，MFG-E8 在結(jié)直腸息肉中的作用可能與PI3K/Akt 信號(hào)通路具有一定的關(guān)系，需進(jìn)一步研究。本研究中結(jié)直腸息肉病人血清鳶尾素水平降低，鳶尾素是一種新的內(nèi)分泌肌動(dòng)蛋白標(biāo)志物，可在多種疾病中發(fā)揮作用。腹腔注射鳶尾素能夠減輕L-精氨酸誘導(dǎo)的急性胰腺炎模型小鼠的腸道組織凋亡和損傷程度［14］。Bi 等［15］學(xué)者發(fā)現(xiàn)，腸道再灌注模型小鼠血清中鳶尾素水平顯著降低，外源性鳶尾素能夠與整合素αVβ5 受體結(jié)合，激活A(yù)MP 活化蛋白激酶（AMPK）/解耦聯(lián)蛋白（UCP）2通路，進(jìn)而逆轉(zhuǎn)腸道缺血再灌注引起的腸上皮屏障功能障礙。以上研究表明，鳶尾素對(duì)疾病進(jìn)展有利，尤其是對(duì)于腸道損傷具有保護(hù)作用。

研究已證實(shí)，Wnt 信號(hào)通路在結(jié)直腸腺瘤性息肉中顯著富集，對(duì)疾病發(fā)展起促進(jìn)作用［16］。結(jié)直腸息肉是結(jié)直腸癌的起源，結(jié)直腸息肉微環(huán)境的惡性進(jìn)展中伴隨著Wnt 通路的異常激活［17］。而包括Wnt/β-連環(huán)素（β-catenin）、RAS-細(xì)胞外信號(hào)調(diào)控的激酶（ERK）通路在內(nèi)的多種信號(hào)通路參與結(jié)直腸癌的疾病進(jìn)展過(guò)程［18］。MFG-E8、鳶尾素可能通過(guò)這些信號(hào)通路在結(jié)直腸息肉中發(fā)揮作用，但需要進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組MFG-E8、鳶尾素水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，兩者聯(lián)合對(duì)病人復(fù)發(fā)具有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值。影響結(jié)直腸息肉病人復(fù)發(fā)的影響因素較多，遺傳病史、生活習(xí)慣、藥物的使用、基因多態(tài)性以及息肉特征等多種因素均可能對(duì)其復(fù)發(fā)造成影響［19-20］。本研究?jī)H對(duì)少量樣本的血清指標(biāo)MFG-E8、鳶尾素進(jìn)行了相關(guān)研究，旨在為臨床判斷結(jié)直腸息肉的復(fù)發(fā)情況提供一定的血清學(xué)參考依據(jù)，對(duì)于病人復(fù)發(fā)情況的預(yù)測(cè)還需要結(jié)合病人個(gè)體差異和臨床指標(biāo)等多種因素綜合考慮，以便制定相應(yīng)的干預(yù)措施。

綜上所述，結(jié)直腸息肉病人血清MFG-E8 水平上調(diào)，鳶尾素水平下調(diào)，兩者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)病人是否會(huì)出現(xiàn)復(fù)發(fā)具有一定的輔助意義。但本研究尚存在不足之處，所納入樣本數(shù)量較少，受病人個(gè)體影響差異較大，所研究的數(shù)據(jù)結(jié)果可能存在一定的偏倚，同時(shí)并未對(duì)MFG-E8、鳶尾素的具體作用機(jī)制進(jìn)行探討，后續(xù)將擴(kuò)大樣本數(shù)量，結(jié)合基礎(chǔ)研究，進(jìn)行更加深入地探討。