木質素磺酸鈣對食用菌菌絲生長影響初探

楊諾林 邵改革 張瑞穎 崔 嫚 鄭素月*

（1河北工程大學園林與生態工程學院，河北邯鄲 056038；2中國農業科學院農業資源與農業區劃研究所，北京 100081；3陜西省西安市農業技術推廣中心，陜西西安 710007）

食用菌又稱蕈菌、蘑菇，是一種大型可食用真菌，不僅包含多種營養元素，還具有藥用價值，深受消費者歡迎[1]。我國是世界上最大的食用菌生產國和出口國之一，同時食用菌產業是我國重要產業之一，也是我國精準扶貧、鄉村振興的主導產業[2]。

食用菌的主要栽培料是農林業生產的廢棄物，如秸稈、木屑、棉籽殼等。木質素磺酸鈣是亞硫酸鹽制漿或生物質預處理的副產品，是一種廉價且可再生的資源，含有羥基、羧基和磺酸基等親水基團[3-4]。木質素磺酸鈣可以作為肥料添加劑，可改善土壤性狀和促進植物生長，如木質素磺酸鈣可以促進香草蘭莖段生長，提高其總蛋白、葉綠素、糖、類酮及酚類物質的含量[5]，還可以降低鹽脅迫對大麥的有害影響[6]。

食用菌栽培料富含木質素，但培養母種的PDA培養基或PDB培養基不含木質素。為進一步研究木質素磺酸鈣對食用菌菌絲生長的作用，試驗以平菇（Pleurotus ostreatus）、香菇（Lentinula edodes）、毛木耳（Auricularia cornea）、黑木耳（Auricularia heimuer）、杏鮑菇（Pleurotus eryngii）、秀珍菇（Pleurotus geesteranus）、茶樹菇（Agrocybe aegerita）、雞腿菇（Coprinus comatus）、灰樹花（Grifola frondosa）、靈芝（Ganoderma lingzhi）、真姬菇（Hypsizygus marmoreus）和金針菇（Flammulina filiformis）為供試食用菌，研究不同質量濃度的木質素磺酸鈣對其菌絲生長的影響，為木質素磺酸鈣在食用菌栽培中的應用提供數據支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

（1）供試菌株：試驗食用菌由國家食用菌標準菌株庫（China center for mushroom spawn standards and control，CCMSSC）以及中國農業科學院食用菌團隊提供，菌株編號及名稱如表1所示。

表1 供試食用菌菌株及來源

（2）供試試劑：木質素磺酸鈣，上海阿拉丁生化科技股份有限公司生產；PDA培養基，Becton，Dickinson and Company。

（3）供試儀器：高溫高壓滅菌鍋MLS-3780（SANYO Electric Biomedical Co.，日本），超凈工作臺（北京東聯哈爾儀器制造有限公司），恒溫培養箱（SANYO Electric Biomedical Co.，日本），UTP-313 型電子天平（上海花潮電器有限公司），數顯游標卡尺（寧波得力工具有限公司）。

1.2 試驗方法

1.2.1 培養基制備

PDA培養基：39 g PDA培養基干粉中加1 L ddH2O。在PDA培養基中分別添加木質素磺酸鈣0.1 g、0.4 g，制成2種質量濃度的培養基，攪拌均勻后，于121 ℃高壓滅菌30 min。以不添加木質素磺酸鈣的PDA為對照（CK）。

1.2.2 菌株活化與培養

將保藏的供試試管菌株挑取直徑約為5 mm的菌塊接入PDA培養皿中，置25 ℃培養箱避光培養。待菌絲長滿平皿前挑選均勻、無污染、長勢較好的轉接到空白PDA培養皿中培養，然后沿菌落邊緣用打孔器挑取直徑5 mm的菌塊，接入不同質量濃度木質素磺酸鈣培養基中，觀察并記錄菌絲的生長情況。每個菌株的每個處理設5個重復。

1.3 指標測定

菌絲生長速度測定：采用十字交叉劃線法，利用游標卡尺測量菌落直徑。菌絲生長速度（mm/d）=（菌落半徑-菌塊半徑）/培養天數。

菌絲促進（抑制）率測定：菌絲促進（抑制）率（%）=[（處理組菌落直徑-對照組菌落直徑）/對照組菌落直徑]×100%

1.4 數據處理

試驗數據采用Microsoft Excel 2010處理統計，用SPSS 25.0軟件進行數據分析，用GraphPad Prism 8.0繪制圖表。

2 結果與分析

2.1 不同質量濃度木質素磺酸鈣對供試食用菌菌絲促進作用

由表2、圖1可知，PDA培養基添加木質素磺酸鈣對平菇、毛木耳、黑木耳、杏鮑菇、秀珍菇、真姬菇、灰樹花和靈芝菌絲生長均有促進作用。與對照（CK）相比，PDA培養基添加0.4 g/L木質素磺酸鈣對平菇2菌株菌絲生長的促進作用最顯著，菌絲促進率為39.47%，菌絲生長速度為5.87 mm/d；添加0.1 g/L木質素磺酸鈣，該菌株菌絲促進率為15.76%，菌絲生長速度為4.74 mm/d，此質量濃度的木質素磺酸鈣對平菇1菌株菌絲生長無明顯作用。與對照（CK）相比，PDA培養基添加0.4 g/L木質素磺酸鈣對黑木耳7菌株菌絲生長也有顯著促進作用，菌絲促進率為34.79%，菌絲生長速度為3.76 mm/d；添加0.1 g/L木質素磺酸鈣，該菌株菌絲促進率為11.29%，菌絲生長速度為3.05 mm/d。

表2 木質素磺酸鈣對13種食用菌菌絲生長的影響

PDA培養基添加木質素磺酸鈣對同種類食用菌不同菌株的菌絲生長影響也不同。相同質量濃度的木質素磺酸鈣處理對平菇1與平菇2菌株菌絲促進率相差較大；與對照（CK）相比，PDA培養基添加0.4 g/L木質素磺酸鈣明顯促進真姬菇18菌株菌絲生長，而對真姬菇19菌株菌絲生長促進不明顯。與對照（CK）相比，PDA培養基添加0.1 g/L木質素磺酸鈣，雞腿菇15菌株菌絲促進率為0，菌絲生長速度為5.81 mm/d，而PDA培養基添加0.4 g/L木質素磺酸鈣，雞腿菇15菌株菌絲抑制率為0.01%，菌絲生長速度為5.77 mm/d。

2.2 不同質量濃度木質素磺酸鈣對食用菌菌絲的抑制作用

添加木質素磺酸鈣對雞腿菇14菌株和金針菇20菌株菌絲生長有抑制作用。由表2、圖1可知，與對照（CK）相比，PDA培養基添加0.1 g/L木質素磺酸鈣，雞腿菇14菌株菌絲抑制率為0.47%，菌絲生長速度為4.90 mm/d；當PDA培養基添加0.4 g/L木質素磺酸鈣時，雞腿菇14菌株菌絲抑制率為4.45%，菌絲生長速度為4.69 mm/d。與對照（CK）相比，當PDA培養基添加0.1 g/L木質素磺酸鈣時，金針菇20菌株菌絲抑制率為4.31%，生長速度為2.85 mm/d；當PDA培養基添加0.4 g/L木質素磺酸鈣時，金針菇20菌株菌絲抑制率為2.56%，菌絲生長速度為2.91 mm/d。添加0.1 g/L木質素磺酸鈣對香菇4菌株和金針菇20菌株菌絲生長有明顯的抑制作用，而0.4 g/L木質素磺酸鈣對其抑制作用相對較弱。

3 小結

試驗結果表明：木質素磺酸鈣對平菇、毛木耳、黑木耳、杏鮑菇、秀珍菇、真姬菇、灰樹花和靈芝菌絲生長均有顯著的促進作用，對雞腿菇15、平菇1、香菇3、金針菇21、真姬菇18、真姬菇19菌株菌絲生長的促進作用不明顯，對雞腿菇14菌株和金針菇20菌株菌絲生長有抑制作用。木質素磺酸鈣與木質素相比價格更低廉、易溶于水，添加方便，所用試驗菌株也不同。研究所得結論與前人研究[7-13]基本相似，即在PDA培養基中添加木質素磺酸鈣對大部分試驗菌株菌絲生長具有促進作用。

食用菌菌種的質量對食用菌生產至關重要，直接影響其品質和產量。在生產中將木質素磺酸鈣添加在PDB培養基中培養液體菌種，提高菌種質量，但木質素磺酸鈣對菌絲生長的作用效果會因食用菌的種類和栽培的具體條件而異，在實際應用中要針對不同的菌株篩選最適宜添加量。