EGFR、ALK、ROS-1基因在肺癌組織中表達(dá)及與其預(yù)后的關(guān)系

余春華 余淑華

肺癌為臨床常見的惡性腫瘤之一,具有較高的發(fā)生率與死亡率[1]。近年,伴隨臨床對于分子生物學(xué)與肺癌驅(qū)動基因研究的持續(xù)開展,臨床逐漸發(fā)現(xiàn)一些基因的表達(dá)與肺癌存在緊密聯(lián)系[2]。表皮生長因子受體(EGFR)、間變型淋巴瘤激酶(ALK)、肉瘤致癌因子-受體酪氨酸激酶(ROS-1)三種基因的突變、融合會通過激活下游不同信號通路進(jìn)而調(diào)節(jié)癌細(xì)胞的生長、繁殖、分化等生物學(xué)行為,但臨床關(guān)于三者是否與肺癌患者預(yù)后存在關(guān)系臨床尚未完全明晰。基于此,本研究以2019年2月至2020年2月本院收治的75例肺癌患者為研究對象,分析EGFR、ALK、ROS-1表達(dá)與患者預(yù)后間的聯(lián)系。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2019年2月至2020年2月本院收治的75例肺癌患者。納入標(biāo)準(zhǔn):經(jīng)病理檢查證實;患者具有較為優(yōu)良的依從性;未合并其它惡性腫瘤;意識清晰,可正常交流。排除標(biāo)準(zhǔn):存在精神疾病者;合并全身性感染者;伴有傳染性疾病者;存在血液系統(tǒng)疾病者;伴有凝血功能、免疫系統(tǒng)異常者;存在肝腎等臟器功能不全者。所有患者中男性42例,女性33例;年齡41～75歲,平均年齡(60.23±2.49)歲;病理類型:41例腺癌,34例鱗癌;臨床分期:45例Ⅰ～Ⅱ期,30例Ⅲ～Ⅳ期;分化程度:39例低分化,36例中高分化;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移:33例有,42例無。

1.2 方法

采集所有患者的癌組織與癌旁正常組織(距腫瘤組織邊緣≥3 cm),將其分別劃入觀察組與對照組,采用免疫組化法測定其EGFR、ALK、ROS-1表達(dá)。檢查措施:將癌組織、癌旁正常組織標(biāo)本以10%甲醇溶液固定,用石蠟包埋,然后制作成4 μm切片;用檸檬酸鈉緩沖液行抗原修復(fù),滴入3%過氧化氫溶液,在室溫下孵育15 min,結(jié)束后用磷酸緩沖鹽溶液(PBS)洗滌3次;用10%山羊血清在室溫下封閉30 min,滴加一抗,在4 ℃環(huán)境下過夜,次日再用PBS洗滌3次,滴加二抗后在室溫下孵育30 min,最后染色、脫水、封片、鏡檢。陽性評估依據(jù):①染色強(qiáng)度:不著色為0分;淺黃色為1分;棕黃色為2分;棕褐色為3分。②陽性表達(dá)率:<10%為0分;10%～40%為1分;41%～70%為2分;>70%為3分。兩者成績>3分為陽性,反之為陰性。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)兩者EGFR、ALK、ROS-1陽性表達(dá)率對比。(2)EGFR、ALK、ROS-1陽性表達(dá)與患者臨床病理特征的關(guān)系。(3)EGFR、ALK、ROS-1陽性表達(dá)與患者生存率的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 兩組EGFR、ALK、ROS-1陽性表達(dá)率對比

觀察組EGFR、ALK、ROS-1陽性表達(dá)率高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組EGFR、ALK、ROS-1陽性表達(dá)率對比(例,%)

2.2 EGFR、ALK、ROS-1陽性表達(dá)與患者臨床病理特征的關(guān)系

EGFR、ALK、ROS-1陽性表達(dá)與患者年齡、性別、病理類型無關(guān)(P>0.05);與臨床分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05),見表2。

表2 EGFR、ALK、ROS-1陽性表達(dá)與患者臨床病理特征的關(guān)系(例,%)

2.3 EGFR、ALK、ROS-1陽性表達(dá)與患者生存率的關(guān)系

隨訪3年后,EGFR、ALK、ROS-1陽性表達(dá)患者的生存率分別為56.52%(13/23)、46.15%(12/26)、42.11%(8/19),低于陰性表達(dá)患者的63.46%(33/52)、69.39%(34/49)、67.86%(38/56),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=4.710、3.867、3.967,P=0.030、0.049、0.046)。

3 討論

肺癌是源自肺部支氣管黏膜或腺體的惡性腫瘤,其患病率與死亡率均處于較高水平[3-4]。肺癌的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜,臨床尚未完全明晰,通常認(rèn)為與吸煙、職業(yè)暴露、空氣污染等有關(guān)[5-6]。由于肺癌患病早期無明顯癥狀,導(dǎo)致大部分患者確診時多為中晚期,預(yù)后較差。因此,積極的明晰肺癌的發(fā)生機(jī)制,以指導(dǎo)臨床施以及時的治療,對于改善患者預(yù)后至關(guān)重要。

EGFR屬于一跨膜糖蛋白,主要存在于基質(zhì)、表皮與部分平滑肌細(xì)胞內(nèi),可通過磷酸化調(diào)節(jié)癌細(xì)胞的增殖與生長相關(guān)信號傳導(dǎo),與多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展與預(yù)后密切相關(guān)[7]。ALK是一種Ⅰ型膜糖蛋白,正常僅存在于神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi),且呈低水平,當(dāng)其發(fā)生基因重排或基因融合后,將會刺激下游信號通路表達(dá),增加癌變風(fēng)險[8]。ROS-1屬于酪氨酸激酶胰島素受體基因,其異常表達(dá)會持續(xù)傳遞生長增殖型號,導(dǎo)致癌細(xì)胞出現(xiàn)異常增殖[9]。本研究結(jié)果顯示,觀察組EGFR、ALK、ROS-1陽性表達(dá)率高于對照組,且EGFR、ALK、ROS-1陽性表達(dá)與患者的臨床分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),提示在肺癌患者機(jī)體內(nèi),EGFR、ALK、ROS-1呈異常高表達(dá),而其與肺癌的發(fā)生與發(fā)展存在緊密聯(lián)系。分析可能與三者的陽性表達(dá)會激活多條下游信號通路,繼而調(diào)控腫瘤細(xì)胞增殖與分化有關(guān)。本研究結(jié)果還顯示,隨訪3年后,EGFR、ALK、ROS-1陽性表達(dá)患者的生存率分別為56.52%(13/23)、46.15%(12/26)、42.11%(8/19),低于陰性表達(dá)患者的63.46%(33/52)、69.39%(34/49)、67.86%(38/56),提示EGFR、ALK、ROS-1陽性表達(dá)與患者的預(yù)后存在緊密聯(lián)系,陽性表達(dá)患者表現(xiàn)出更低的生存率。

綜上所述,EGFR、ALK、ROS-1三者在肺癌組織內(nèi)呈異常的高表達(dá),三者與肺癌的發(fā)生與發(fā)展密切相關(guān),且陽性表達(dá)患者的生存率更低。