慢加急性肝衰竭動(dòng)物模型研究現(xiàn)狀

劉 韋，白 浪

四川大學(xué)華西醫(yī)院感染性疾病中心，成都 610041

慢加急性肝衰竭（acute-on-chronic liver failure，ACLF）是指在慢性肝病基礎(chǔ)上，短期內(nèi)出現(xiàn)肝功能急性失代償?shù)呐R床綜合征。ACLF 發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，病情兇險(xiǎn)，進(jìn)展迅速，伴發(fā)多器官功能衰竭，短期病死率高，尚無具體有效的治療措施［1］。因此建立一個(gè)合適的、穩(wěn)定的并且高度模擬臨床的ACLF 動(dòng)物模型對(duì)于闡明ACLF 發(fā)病機(jī)制具有重要的價(jià)值和意義，有助于臨床制訂更加有效的早期診斷和治療策略，從而提高臨床ACLF 的救治成功率。然而，由于ACLF 病因復(fù)雜、并發(fā)癥眾多，其動(dòng)物模型研發(fā)一直存在較大挑戰(zhàn)。本文就目前常用的ACLF動(dòng)物模型建立方法進(jìn)行綜述。

1 ACLF概述

目前ACLF 的定義在國內(nèi)外尚無統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。我國將ACLF定義為：在慢性肝病基礎(chǔ)上，由各種誘因引起的以急性黃疸加深（總膽紅素≥10 倍正常值上限或每日上升≥17.1 μmol/L）、凝血功能障礙（凝血酶原活動(dòng)度≤40%或國際標(biāo)準(zhǔn)化比值≥1.5）為肝衰竭表現(xiàn)的綜合征，可合并包括HE、腹水、電解質(zhì)紊亂、感染、肝腎綜合征、肝肺綜合征等并發(fā)癥，以及肝外器官功能衰竭。根據(jù)不同慢性肝病基礎(chǔ)分為3型，A 型：在慢性非肝硬化肝病基礎(chǔ)上發(fā)生的慢加急性肝衰竭；B型：在代償期肝硬化基礎(chǔ)上發(fā)生的慢加急性肝衰竭，通常在4 周內(nèi)發(fā)生；C 型：在失代償期肝硬化基礎(chǔ)上發(fā)生的慢加急性肝衰竭［2］。目前ACLF 的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，可能與易患體質(zhì)、誘發(fā)因素、炎癥反應(yīng)、器官衰竭等有關(guān)［3］。常見的危險(xiǎn)因素主要有細(xì)菌感染、酒精、靜脈曲張破裂出血、肝毒性藥物、肥胖和血脂異常等。ACLF 尚缺乏具體有效的治療方案，主要依賴于藥物治療、人工肝支持治療以及肝移植等［1，4］。

2 建立ACLF動(dòng)物模型方法

目前建立ACLF 動(dòng)物模型的思路均是通過各種方法先誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝臟的慢性損傷，然后在慢性損傷的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步實(shí)施急性攻擊，從而導(dǎo)致肝臟發(fā)生急性肝衰竭。

目前在誘導(dǎo)肝臟慢性損傷階段采用的方法不同，主要有CCl4注射、硫代乙酰胺注射、血清白蛋白注射以及膽管結(jié)扎等方法。在急性攻擊階段，可采用不同急性攻擊方式，包括單用CCl4或D-氨基半乳糖胺（D-Gal Nactosamine，D-GaL N）LPS 聯(lián)合D-GaL N 等方法。Hassan 等［5］對(duì)目前所建立ACLF 動(dòng)物模型的方法進(jìn)行了較全面的總結(jié)，本文主要對(duì)CCl4法、硫代乙酰胺法、血清白蛋白法以及膽管結(jié)扎法4種常用的方法進(jìn)行總結(jié)、對(duì)比及思考。

ACLF 動(dòng)物模型首選嚙齒類動(dòng)物，尤其是老鼠，由于體型小，壽命短，妊娠期短，容易在圈養(yǎng)環(huán)境中飼養(yǎng)和繁殖，而且與人類在基因上的顯著相似性，加上基因操縱的便利性，因此老鼠成為目前模擬ACLF 的最常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物［6］。另外，建立大型動(dòng)物模型可選擇豬、兔、非人靈長類動(dòng)物等，其中非人靈長類動(dòng)物如猴、猩猩、狒狒等與人類十分相似，但其價(jià)格和造模的方法更為嚴(yán)格，導(dǎo)致其很難大規(guī)模開展，因此少有研究者以此建立ACLF動(dòng)物模型。

2.1 CCl4聯(lián)合LPS/D-Gal N法 CCl4是一種能引起肝細(xì)胞壞死的化合物，常作為誘發(fā)各種肝損傷的造模劑［7］。CCl4通過肝細(xì)胞的細(xì)胞色素P450的激活，生成自由基物質(zhì)CCl3·和CCl3OO·，這些自由基會(huì)對(duì)膜結(jié)構(gòu)上的多不飽和脂肪酸產(chǎn)生攻擊，促使細(xì)胞膜、線粒體膜等生物膜發(fā)生脂質(zhì)過氧化，從而導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化物的產(chǎn)生，后者反過來還能對(duì)各種生物膜造成進(jìn)一步的損傷，使其穩(wěn)定性和完整性降低、通透性增加，造成細(xì)胞內(nèi)各種酶的溢出以及其他細(xì)胞損傷，最終導(dǎo)致肝細(xì)胞的凋亡與壞死［8］。脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）又稱內(nèi)毒素，是革蘭陰性菌細(xì)胞壁表面的一種成分，通過刺激免疫細(xì)胞釋放炎癥因子，導(dǎo)致肝細(xì)胞發(fā)生凋亡與壞死［9］。D-Gal N可通過抑制mRNA合成和部分抑制糖復(fù)合物的轉(zhuǎn)移后修飾導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷，同時(shí)激活巨噬細(xì)胞和粒細(xì)胞，促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生，從而導(dǎo)致肝細(xì)胞凋亡。而毒性劑量的D-Gal N 主要是通過耗竭ATP、抑制大分子合成導(dǎo)致肝細(xì)胞壞死。在LPS 和D-Gal N 的協(xié)同作用下，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的肝細(xì)胞在短時(shí)間內(nèi)大量死亡，肝臟生理功能嚴(yán)重受損［8］。

CCl4聯(lián)合LPS/D-GaL N誘導(dǎo)的ACLF動(dòng)物模型，可用于模擬人類化學(xué)毒性物質(zhì)所致的肝損傷，是目前比較常用的方法，該方法常采用腹腔內(nèi)注射作為給藥方式，一方面操作簡便，便于掌握注射劑量，一方面藥物吸收較皮下注射快避免局部皮膚產(chǎn)生炎癥，而較血管注射慢避免導(dǎo)致急性藥物中毒。但研究者們?cè)趯?shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇、誘導(dǎo)方式、誘導(dǎo)劑量等方面存在一定的差異。

目前CCl4聯(lián)合LPS/D-GaL N 建立的ACLF 動(dòng)物模型可分為大鼠模型和小鼠模型。目前多數(shù)研究已經(jīng)證實(shí)，在誘導(dǎo)肝臟慢性損傷階段，無論是選擇大鼠或者小鼠建模，12周左右的建模時(shí)間可以導(dǎo)致大鼠或者小鼠的肝臟發(fā)生明顯的慢性損傷。在12周的造模過程中，為使肝功能維持損傷狀態(tài)并防止其完全恢復(fù)，同時(shí)又不會(huì)因?yàn)榻o藥頻繁，劑量過大導(dǎo)致其死亡，最合適的給藥頻率建議為2次/周［10］。根據(jù)用于建模的鼠的種類不同，CCl4的注射劑量有所不同。張慧蕓等［11］將3～4周齡BALB/C的雄性小鼠腹腔注射20% CCl4油溶液5 mL/kg；高安等［12］將3～4周齡的SPF級(jí)雄性C57BL/6小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，腹腔注射20% CCl4（橄欖油稀釋）5 mL/kg，2次/周，共12周。而誘導(dǎo)大鼠慢性肝損傷步驟相對(duì)繁瑣，研究［13-14］發(fā)現(xiàn)若選擇雄性SD大鼠（體質(zhì)量160～170 g），雖然同樣是通過腹腔注射50% CCl4植物油溶液，連續(xù)12 周，每3 天1 次，但是和小鼠不同，劑量需要做相應(yīng)的調(diào)整，其中第1個(gè)月劑量為1.5 mL/kg，第2、3 個(gè)月劑量為2.0 mL/kg。另外，為防止大鼠對(duì)CCl4產(chǎn)生耐藥性，需在4周后加大劑量，通常加至起始劑量的0.3 倍左右，而誘導(dǎo)小鼠肝硬化的給藥劑量相對(duì)穩(wěn)定。

在急性攻擊階段，可采用不同急性攻擊方式，分為單用CCl4或D-GaL N、LPS 聯(lián)合D-GaL N 三種方法，張海燕等［13］模擬了以上三種急性攻擊方法，以比較不同的方法是否能成功誘導(dǎo)慢性肝損傷基礎(chǔ)上急性肝衰竭的發(fā)生，在成功誘導(dǎo)大鼠慢性肝損傷后，將實(shí)驗(yàn)大鼠分為A、B、C三組，實(shí)驗(yàn)組A：2 g/kg D-Gal N；實(shí)驗(yàn)組B：100 μg/kg LPS聯(lián)合0.5 g/kg D-Gal N；實(shí)驗(yàn)組C：5 mL/kg 50% CCl4植物油溶液，給藥途徑均為腹腔注射。結(jié)果顯示三組實(shí)驗(yàn)大鼠肝臟均出現(xiàn)肝細(xì)胞大塊或亞大塊壞死，符合急性肝衰竭表現(xiàn)，其中實(shí)驗(yàn)組B肝細(xì)胞壞死程度大于A、C組，C組最輕。該研究表明三種方法均可成功誘導(dǎo)肝硬化基礎(chǔ)上的急性肝衰竭。其中單獨(dú)D-Gal N注射誘導(dǎo)生存時(shí)間最長提示該模型有較長的治療窗，更適合藥物篩選的實(shí)驗(yàn)研究，而單獨(dú)CCl4注射誘導(dǎo)的急性肝衰竭的發(fā)生雖然也迅速，但其肝細(xì)胞壞死程度不如LPS 聯(lián)合D-Gal N 誘導(dǎo)的急性肝衰竭明顯。LPS 聯(lián)合D-Gal N 誘導(dǎo)的急性肝衰竭發(fā)生時(shí)間快、肝細(xì)胞壞死程度最為嚴(yán)重，因此相對(duì)于其他兩種處理方式，LPS聯(lián)合D-Gal N誘導(dǎo)在慢性肝損傷基礎(chǔ)上的急性肝衰竭發(fā)生，可能更適合ACLF病理機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究。但是不同的研究也會(huì)采用不同的LPS 和D-Gal N劑量誘導(dǎo)急性肝衰竭發(fā)生。張慧蕓等［11］在12周末次給藥3 d后腹腔聯(lián)合注射D-Gal N 1 g/kg、LPS 10 μg/kg建立ACLF 小鼠模型。高安等［12］在12 周末次給藥10 d后，給予一次性腹腔聯(lián)合注射（LPS 0.5 mg/kg、D-Gal N 400 mg/kg），建立ACLF 小鼠模型。可見，在使用LPS 聯(lián)合D-GaL N急性攻擊方式時(shí)，研究者們?cè)贚PS和D-GaL N的劑量選擇上存在差異，考慮到LPS的毒性作用較強(qiáng)，因此急性攻擊時(shí)所需LPS的劑量通常都遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于D-GaL N，但是聯(lián)合這兩種藥物進(jìn)行急性攻擊時(shí)，其最優(yōu)劑量還值得進(jìn)一步探索。

綜上，多種研究證明CCl4聯(lián)合LPS/D-Gal N 法建立ACLF 動(dòng)物模型簡單易行、穩(wěn)定性好，適用于多種臨床研究。但有研究［15］表明CCl4模型在誘導(dǎo)因素停止后，肝纖維化程度、炎癥等逐漸減輕。特別是有學(xué)者［16］認(rèn)為細(xì)菌感染在ACLF患者中極為常見，急性細(xì)菌感染是亞洲ACLF最常見的誘發(fā)事件之一，通常與全身炎癥、不良的臨床結(jié)局和高病死率密切相關(guān)［17］。而僅僅通過CCl4或者D-Gal N 等藥物注射并沒有很好的模擬感染在肝衰竭發(fā)生中的作用以及肝外器官的損害。因此CCl4聯(lián)合LPS/D-Gal N 法在模擬ACLF 的進(jìn)展過程中仍然存在局限和不足。近年來有研究建立了更加完整模擬ACLF 病程及臨床特征的ACLF 小鼠模型，所采用的方法分為誘導(dǎo)慢性肝損傷、急性肝損傷、細(xì)菌感染三個(gè)階段，具體如下：首先將雄性C57BL/6J 小鼠腹腔內(nèi)注射CCl4（0.2 mL/kg），每周2 次，持續(xù)8 周，以誘導(dǎo)小鼠慢性肝損傷；在急性攻擊階段，再次注射雙倍劑量的CCl4（0.4 mL/kg），然后腹腔注射克雷伯氏菌肺炎菌株或行盲腸結(jié)扎穿刺術(shù)［18］。該方法通過誘導(dǎo)細(xì)菌感染成功構(gòu)建了一種嚴(yán)重肝損傷的ACLF小鼠模型，更佳地模擬了ACLF的臨床核心病程以及病程中易出現(xiàn)的肝外臟器損傷。該模型不僅具有合適的生存周期用于干預(yù)研究。同時(shí)，該模型造模方法能夠很好地標(biāo)準(zhǔn)化，取材容易，簡便快速，易于推廣，為ACLF 的相關(guān)機(jī)制研究和新治療靶點(diǎn)篩選提供了可靠的平臺(tái)。

2.2 硫代乙酰胺（thioacetamide，TAA）聯(lián)合LPS 法 TAA是一種肝毒性藥物，被人體攝取后，可經(jīng)肝細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞色素P450 混合功能氧化酶代謝為TAA-硫氧化物，后者進(jìn)一步代謝為中間代謝產(chǎn)物及其他極性分子，并與肝臟大分子物質(zhì)結(jié)合，引起肝細(xì)胞功能的改變繼而壞死。一次性腹腔注射TAA 可導(dǎo)致急性肝炎，反復(fù)腹腔注射可導(dǎo)致肝細(xì)胞壞死、再生結(jié)節(jié)形成、毛細(xì)膽管增生、門靜脈高壓而導(dǎo)致肝硬化［19］。TAA 誘導(dǎo)慢性肝損傷的機(jī)制是影響蛋白合成及肝細(xì)胞中酶的代謝，在組織學(xué)和生化代謝的變化上與各種病因引起的人類肝硬化改變很相似，誘導(dǎo)所產(chǎn)生的肝纖維化更為穩(wěn)定和持久［20］。

de Mesquita 等［21］在TAA 注射前約1 h，將其溶解于0.9%生理鹽水中，給予雄性Wistar大鼠腹腔注射200 mg/kg TAA，每周2次，持續(xù)12周，用于建立慢性肝病動(dòng)物模型。Tripathi 等［22］將雄性大鼠（150～200 g）腹腔注射生理鹽水溶解的TAA，劑量為250 mg/kg，2 次/周，持續(xù)10 周，建立無腹水發(fā)生的慢性肝病大鼠模型，再給予代償期的大鼠腹膜內(nèi)或靜脈內(nèi)注射LPS（1 mg/kg），以建立ACLF 大鼠模型。

TAA 誘導(dǎo)的TAA 動(dòng)物模型也可用于模擬人類化學(xué)毒性物質(zhì)所致的肝損傷，與CCl4模型相比，其誘導(dǎo)的肝損傷穩(wěn)定性更好更持久，不易逆轉(zhuǎn)。但由于TAA 的毒性較強(qiáng)，對(duì)人體危害性較大，不利于研究者操作，因此目前不常用于建立ACLF動(dòng)物模型。

2.3 血清白蛋白法 Bhunchet 等［23］研究認(rèn)為，當(dāng)機(jī)體反復(fù)接受異體血清時(shí)，會(huì)導(dǎo)致體內(nèi)大量生產(chǎn)的免疫復(fù)合物，從而促使血管內(nèi)皮細(xì)胞、Kupffer 細(xì)胞產(chǎn)生大量細(xì)胞因子，作用于肝貯脂細(xì)胞，最終導(dǎo)致肝纖維化。目前主要通過牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）、人血清白蛋白（human albumin serum，HSA）、豬血清（porcine serum，PS）誘導(dǎo)免疫損傷性肝損傷模型，在此基礎(chǔ)上再進(jìn)一步聯(lián)合使用D-Gal N、LPS 以建立ACLF 動(dòng)物模型。該方法通常選擇大鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，不同研究應(yīng)用血清白蛋白法建立ACLF 模型的區(qū)別主要在于白蛋白的種類，給藥劑量，給藥途徑以及給藥時(shí)間不同。

目前常用的血清白蛋白包括BSA、HSA 和PS。我國劉旭華等［24］首先利用HSA 聯(lián)合D-GalN/LPS 建立大鼠ACLF 模型。BSA 和HSA 誘導(dǎo)肝臟慢性損傷通常分為兩個(gè)階段，一是免疫階段，血清白蛋白用生理鹽水稀釋與等體積的完全福氏佐劑乳化，每次皮下注射0.5 mL（內(nèi)含白蛋白4 mg），共4次（第1、15、25、35天）。二是免疫攻擊階段，即靜脈注射血清白蛋白。劉子倩等［25］將SPF 級(jí)雄性大鼠皮下多點(diǎn)注射含4 mg的BSA乳化液0.5 mL，分別于第1、15、25、35 天時(shí)皮下多點(diǎn)注射致敏（共4 次）；再向大鼠尾靜脈注射BSA 溶液，每周2 次，共計(jì)6 周（12 次），BSA含量從每次2 mg開始，每次增加0.5 mg注射，逐次增加至每次4 mg 后維持此劑量。劉旭華等［23］給予雌性Wistar大鼠皮下注射4次0.5 mL的HSA乳化液后，向大鼠尾靜脈注射2.5 mg的HSA，逐次增加0.5 mg直至4.5 mg，并維持次劑量，每周2次，共6周。Wang等［26］給予Wistar雄性大鼠皮下多點(diǎn)注射4 次含有4 mg 的HSA 乳化液0.5mL。HSA 致敏后，向大鼠尾靜脈注射4 mg HSA，每周2 次，持續(xù)6 周，導(dǎo)致大鼠肝臟慢性損傷。BSA 或者HSA 法的主要區(qū)別在于致敏后靜脈注射白蛋白的劑量，HSA法既可采用2.5 mg起始，逐次增加0.5 mg，至4.5 mg后維持該劑量，也可直接采用維持劑量4 mg，而BSA法則多選擇從2 mg起始，逐次增加0.5 mg，至4 mg后維持該劑量。采用逐次遞增劑量的方式可能使大鼠的死亡率降低，提高建模成功率，但對(duì)于更好地模擬人類ACLF而言，兩者孰優(yōu)孰劣需要進(jìn)一步探索。相對(duì)于BSA或者HSA誘導(dǎo)肝臟慢性損傷相對(duì)繁瑣的步驟，Li 等［27］給予雄性Wistar 大鼠腹腔注射0.5 mL 的PS，每周2 次，持續(xù)11 周，建立肝纖維化模型。PS誘導(dǎo)肝臟慢性損傷則更為簡便，利于操作，可重復(fù)，同時(shí)PS 法所選擇的給藥途徑為腹腔注射，相對(duì)于皮下注射、靜脈注射更為安全，成模率高。

在急性攻擊階段，BSA 法、HSA 法和PS 法均采用聯(lián)合使用D-Gal N、LPS 的方式，但是由于誘導(dǎo)慢性肝損傷的白蛋白種類不同，D-Gal N、LPS 的給藥劑量、給藥途徑存在差異。其中，BSA 法、HSA 法可采用相同的急性攻擊方式，在大鼠慢性肝損傷的基礎(chǔ)上，于第6 周末，聯(lián)合給予腹腔注射100 μg/kg 的LPS 和400 mg/kg 的D-Gal N以誘導(dǎo)急性肝衰竭［24-26］。而通過PS 誘導(dǎo)的大鼠，將于11 周后給予其靜脈注射劑量為50 μg/kg 的LPS，30 min后再腹腔注射劑量為600 mg/kg 的D-Gal N 以誘導(dǎo)急性肝衰竭［27］。

綜上，BSA 法、HSA 法和PS 法均可成功建立ACLF大鼠模型。目前利用免疫誘導(dǎo)法建立ACLF動(dòng)物模型的常見造模方式，是HSA 法建立的ACLF 大鼠模型［28］，但其建立的模型死亡率相對(duì)較高，為23%［29］。與BSA 和HSA 法建立的ACLF 大鼠模型相比，PS 模型的死亡率更低，更容易操作，同時(shí)該模型與人類ACLF更加相似［27］。

2.4 膽管結(jié)扎術(shù)（bile duct ligation，BDL）法 BDL通過結(jié)扎膽管使膽汁反流造成肝細(xì)胞損傷來誘導(dǎo)肝纖維化。BDL誘導(dǎo)后的大鼠對(duì)內(nèi)毒素敏感性增加，通常使用D-Gal N或LPS使大鼠發(fā)生急性肝損傷。

叢偉［30］通過此方法成功建立了ACLF 大鼠模型，首先將雄性SD 大鼠（體質(zhì)量250～280 g），術(shù)前禁食12 h，結(jié)扎膽總管，4 周后可建立膽汁淤積性肝硬化模型。然后取膽管結(jié)扎4 周后存活的大鼠（已建立膽汁淤積性肝硬化模型），禁食12 h，按1.4 g/kg 給藥劑量配置D-Gal N（配置濃度0.2～0.4 g/mL），腹腔注射24 h 后可誘導(dǎo)肝硬化基礎(chǔ)上的急性肝損傷。

Tripathi 等［22］使用BDL 建立ACLF 動(dòng)物模型，首先結(jié)扎雄性大鼠（200～225 g）膽總管，誘導(dǎo)繼發(fā)性膽汁性肝硬化（共28 天）。在血流動(dòng)力學(xué)研究前4 h，給予肝硬化失代償期的大鼠腹膜內(nèi)或靜脈內(nèi)注射1 mg/kg的LPS，以建立ACLF大鼠模型。

BDL 模型可用于模擬人類膽管阻塞而造成的肝損傷，但BDL模型手術(shù)復(fù)雜，模型較不穩(wěn)定。

3 建立ACLF動(dòng)物模型的挑戰(zhàn)與展望

綜上所述，CCl4聯(lián)合LPS/D-Gal N 法、TAA 聯(lián)合LPS法、血清白蛋白法、膽管結(jié)扎術(shù)法是目前建立ACLF 動(dòng)物模型常用的方法，CCl4模型、TAA模型均為化學(xué)毒物的損傷，操作簡單便利，但對(duì)于劑量的選擇有一定要求，劑量過大易導(dǎo)致動(dòng)物死亡，過小則達(dá)不到診斷要求。血清蛋白法主要模擬免疫性的肝損傷，模型穩(wěn)定，可重復(fù)。BDL法模擬人類膽管阻塞而造成的肝損傷操作復(fù)雜，對(duì)動(dòng)物損傷大，較不穩(wěn)定。可見，建立ACLF 動(dòng)物模型有多種方法，研究者可以根據(jù)具體研究目的選擇一種合適的方法。但ACLF 的病因、病理機(jī)制復(fù)雜多樣，同時(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與人類之間存在異質(zhì)性，而臨床情況更加復(fù)雜，將同時(shí)或依次出現(xiàn)多種誘發(fā)因素和并發(fā)癥，導(dǎo)致多種疾病和器官衰竭，因此無法準(zhǔn)確地模擬人類ACLF發(fā)生發(fā)展過程［31］。

ACLF發(fā)生于慢性肝病的基礎(chǔ)上，通常包括病毒性肝病、酒精性肝病、藥物性肝病、自身免疫性肝病等，其病因多種多樣，不同病因所致的肝損傷機(jī)制各有不同。HBV的再激活是亞洲地區(qū)ACLF 的主要原因，其患病率高，HBV 相關(guān)的急性慢性肝衰竭占ACLF 的70%以上［32-34］。但是目前所建立的ACLF 動(dòng)物模型，包括可模擬化學(xué)毒物性損傷、免疫性肝損傷、膽汁淤積性肝損傷，均無法模擬病毒性肝損傷，因此建立HBV相關(guān)的急性慢性肝衰竭動(dòng)物模型是目前的一大難題和挑戰(zhàn)。另外，為建立合適的ACLF動(dòng)物模型，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇也很重要，根據(jù)不同的研究目的，選擇最適合的動(dòng)物模型，考慮到嚙齒類動(dòng)物的優(yōu)勢，目前通常選擇大鼠或者小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

理想的ACLF 動(dòng)物模型應(yīng)盡量模擬人類的肝損傷發(fā)病機(jī)制，雖然此過程可通過使用不同藥物、毒物或其他有創(chuàng)操作而實(shí)現(xiàn)，也可調(diào)整給藥劑量或其他方式盡可能模擬人類ACLF的死亡率、生存率，但目前由于動(dòng)物本身與人類之間存在異質(zhì)性以及外界因素的不可控性，暫時(shí)無法完整復(fù)制人類ACLF。因此選擇更符合人類發(fā)病機(jī)制的動(dòng)物、更佳的毒物藥物、合適的藥物劑量等，需要研究者們進(jìn)一步探索。

利益沖突聲明：本文不存在任何利益沖突。

作者貢獻(xiàn)聲明：劉韋起草論文；白浪負(fù)責(zé)擬定寫作思路，論文審閱修改。