豬大腸桿菌病的診斷與防治

呂玉蘭

（金安區農業綜合行政執法大隊 237000）

豬大腸桿菌病是一種高致病性的腸道傳染病，多發于仔豬群體，以脫水、下痢、水樣稀糞為典型發病癥狀，但是以上發病癥狀與其他病毒性疾病和寄生蟲性疾病具有一定相似性。因此要想做最終確診，需要對病豬組織樣本或糞便進行進一步診斷與檢測，才能做出最終確診，進而給出針對性防控措施，以此降低大腸桿菌病的蔓延與擴散。

1 豬大腸桿菌病病原學

大腸桿菌屬于大腸埃希氏菌屬，該病菌首次發現于1885 年，屬革蘭氏陰性菌，病菌無苞芽，兩頭鈍圓，且大部分大腸桿菌有鞭毛，其中產腸毒素大腸桿菌是豬只腹瀉最常見的致病性菌株。該類菌株毒性主要由腸毒素和粘附素性菌毛而決定，在不同外在環境下，該類病菌致命程度有所不同，豬群一旦感染，將導致體細胞迅速增加，同時產生內毒素，進而引起豬只炎癥，引發病豬腹瀉、臟器衰竭或敗血癥等癥狀。同時，致病性大腸桿菌常規情況下為動物體共生細菌，可調節腸道內菌群，但如果宿主免疫系統低下，將導致大腸桿菌毒力明顯增強，威脅豬群公共安全。

2 診斷

2.1 臨床癥狀診斷

從臨床癥狀上看，病豬一旦感染大腸桿菌病，其主要臨床癥狀可以分為三種類型，分別是仔豬黃痢、仔豬白痢和豬水腫，其中仔豬黃痢，主要臨床癥狀為排稀糞，大便失禁，且病豬肛門、陰門處為紅色或暗紅色，這一癥狀多發于出生3～10 d 左右的仔豬，常伴有精神頹廢，食欲不振，心率較快，呼吸急促等癥狀，在發病后期可能出現豬體消瘦、意志消沉、呼吸困難等病癥，最終死亡。

仔豬白痢主要發生在剛出生10 d 左右的豬群，病豬糞便呈白色或乳白色，臨床癥狀為突發性腹瀉，顏色為黃色、黃綠色，有特殊腥味或臭味，疾病初發時，腹瀉次數較少，之后隨著病程的逐漸增加，腹瀉次數最高可達到8～20 次/d，大便稀薄，有氣泡，部分糞便黏著在肛門處，發出腥臭味。如果是成年豬患病，皮毛粗糙，無光澤，身體消瘦，食欲不振，精神欠佳，畏寒，在發病后期，心音較弱，口鼻干燥且臥地不起，最終因身體極度虛弱而死。

如果是豬水腫，其主要臨床癥狀為病豬四肢不協調，精神萎靡，糞便顏色為青白色或青灰色，眼瞼增厚，身體水腫明顯，之后在發病中后期，病豬容易受到應激，即使在外界微弱的刺激下也會嚇壞病豬，嚴重時豬除易受驚之外，面部也出現水腫，且站立不穩，轉圈，或者出現結膜炎水腫，通常在幾天內死亡。該類病癥多發于體格健壯、生長速度較快的斷乳仔豬，一般得過黃痢的仔豬不感染豬水腫[1]。

2.2 實驗室診斷

通常情況下，對于豬大腸桿菌病，其實驗室診斷和鑒定方法分為兩種，分別是傳統表型鑒定法，比如血清學鑒定、菌體形態學觀察、菌落形態學觀察等，其次是新型分子生物學鑒定法，利用核酸擴增技術和高通量測序技術，做出最后診斷。一般情況下，基層畜牧獸醫單位仍然選擇傳統表型鑒定法，先將在無菌環境下收集到的病料在麥康凱平板培養基中進行分離培養，染色后完成鏡檢，該種方法操作簡單且不需要特殊檢測儀器，但是檢測時間較長，需要一周左右，故該種方法在大面積、大規模病料檢測中，使用效率較低，因此可以利用免疫血清學檢測方法，基于抗原抗體特異性反應進行定量和定性檢測。診斷步驟為：（1）無菌采集患病豬淋巴結、糞便等病料組織，37℃環境下培養10～15 h，對分離株進行PCR 擴增，95℃預變性5 min，57℃退火1 min；（2）PCR 反應條件為：72℃1 min 30 s，最后72℃延伸10 min，95℃預變性4 min，35 個循環，PCR產物用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測，其中，10 PCR 擴增體系為：Premix Ex TaqTM DNA 聚合酶，25 μL，菌液2 μL，ddH2O 共21 μL，10 pmol/μL 上游引物F1 μL，10 pmol/μL 下游引物R1 μL，總計50 μL。（3）第一，單菌落挑取：把LB 培養基倒入排槍槽中，然后用排槍加400 μL LB 培養基到48 孔深孔板，用鑷子拿已滅菌的小白槍頭挑取平板上的單菌落并放到48 孔深孔板中，同時在48 孔深孔板和相應的表單上做好記錄，注意對于藍白斑篩選的板子要挑的是白斑。挑好的48 孔深孔板用封口膜蓋好并做好相應標記（日期、板號等），用針頭在封口膜打孔，把它放在37℃搖床上搖一個小時。第二，菌落PCR 反應：配置好PCR 反應的反應體系，把配好的反應液加到96 孔反應板中，用排槍加2.5 μL 的菌液到其中，注意在96 孔反應板上做好標記。把96 孔反應板放在PCR 儀器上蓋好橡膠墊，按照PCR 反應條件設置反應程序，注意一定要把PCR 儀器的蓋子蓋緊。第三，瓊脂糖凝膠電泳：一般先配置1.0%～1.2%瓊脂糖凝膠（即稱1.2 g 的瓊脂糖加100 mL 的TAE），在96 孔反應板每個管中加0.5 μL 的溴酚藍，震蕩均勻，然后點樣，電泳好的瓊脂糖凝膠拍照，命名保存。第四，判斷陽性克隆并測序：根據瓊脂糖凝膠電泳圖條帶來判斷陽性克隆，把陽性克隆的菌液進行擴大培養，進行測序驗證，看看是否有完全正確的序列[2]。

3 豬大腸桿菌病的防治

3.1 豬大腸桿菌病預防

3.1.1 仔豬方面

從上文研究中，發現如果大腸桿菌病宿主免疫系統低下，將導致大腸桿菌毒力明顯增強，最終導致疾病大規模暴發和流行，因此在今后工作中，養殖技術人員必須重視仔豬機體抗病性能的提高，不斷提升機體免疫力，主要預防措施可體現在以下幾個方面：（1）剛出生的仔豬必須在出生后2 h 內哺足初乳，以此獲得被動免疫；（2）注重仔豬豬舍或保育舍的溫濕度控制，始終遵循“小豬怕冷，大豬怕熱，大豬小豬都怕濕”的原則，嚴格控制舍內溫濕度，通常情況下，仔豬豬舍在寒冷季節，溫度不能低于18℃，如果是剛出生2～3 周齡的仔豬，對溫度要求更高，約維持在26℃即可，如果仔豬剛出生1 周齡以內，豬舍內部環境不能低于30℃，成年豬豬舍氣溫最高不能高于28℃，最低不能低于15℃，濕度始終維持在65%～80%左右即可。（3）強化仔豬營養補給，科學調配飼料配方，比如：對于斷奶后仔豬，飼料配方可設置為：7%豆粕，10%麥麩皮，55%玉米，15%高粱粉，5%進口魚粉，4%維生素添加劑，2%微量元素添加劑，0.5%食鹽，1.5%骨粉，對于35 kg 以上的生長豬，可將配方設置為55%玉米，10%麥麩皮，5%進口魚粉，6%豆粕，2%骨粉，0.7%食鹽，1.3%氫氧化鈉，5%高粱粉，5%維生素添加劑，10%進口魚粉，以此補充仔豬和生長豬的蛋白質、維生素以及礦物質，從而提高機體抗病性。

3.1.2 母豬方面

大腸桿菌病的傳播方式與途徑多種多樣，其中最常見的傳播途徑為母豬與仔豬接觸傳染[3]。比如，仔豬在出生之后，通過吃母乳來獲得被動免疫，如果母豬在生產之前未能及時接種疫苗，可能導致仔豬機體能量低，抗病性差。其次，在母豬哺乳時，養殖技術人員不能對母豬乳房、乳頭進行消毒，在仔豬吃母乳過程中，通過乳房、乳頭傳播病菌。因此，在今后工作中，要想最大化抑制仔豬感染大腸桿菌病，技術人員應該在母豬產前及時接種疫苗，同時控制飼料中蛋白質水平，適當增加青飼料喂養量，嚴禁飼喂發霉變質飼料，始終保持飼料營養供給的相對穩定性。其次，在母豬產仔后，每次哺乳之前需要利用0.1%高錳酸鉀水溶液對母豬乳房和乳頭進行消毒，通過擦洗，降低胸腹部病菌含量，之后逐個乳頭擠掉幾滴奶水，接著再讓仔豬吃乳，以此最大化降低仔豬與大腸桿菌的接觸幾率，抑制仔豬出現大腸桿菌病。

3.1.3 環境方面

大腸桿菌病可以通過食槽、水槽直接接觸傳播，或者通過其他呼吸道及消化道途徑感染致病菌，因此養殖技術人員要想最大化降低大腸桿菌病暴發率，必須把好環境關，對養殖場附近和豬舍內部經常消毒消殺，確保環境清潔。主要體現在以下幾個方面：（1）對產房進行徹底沖洗與清掃，比如首先利用高壓水槍沖洗地面產床，之后利用2%燒堿水進行地面消毒，同時將黏著在地面和欄桿上的糞便清除干凈，等到清理完畢之后，利用福爾馬林溶液和高錳酸鉀溶液進行產房熏蒸，確保門窗環境密閉，保證產房封閉、不透氣，在熏蒸5～8 h 后開窗通風，之后鋪上干凈墊草；（2）對保育舍和育肥豬舍，可將漂白粉配制成10%混懸液，對用具、地面和污水、糞便等進行消毒，現配現用，但是應該注意該種消毒方式具有較強腐蝕性，噴霧器使用后應立即清洗干凈；也可以利用25%石灰乳，對欄舍、墻壁、頂棚進行消毒，可有效清除病原體、細菌和病毒，以此及時消滅大腸桿菌傳染源。（3）人員進場時，利用1∶1000 新潔爾滅溶液浸泡洗手，對工作服、工作靴、利用福爾馬林熏蒸20 min，利用3%氫氧化鈉溶液對金屬用具進行消毒。（4）打造物理隔離空間。如果豬群中出現大腸桿菌病，為避免同群健康豬感染，應該將脫水、腹瀉嚴重豬單獨隔離，一則可以切斷傳染源，二則避免脫水嚴重豬被同群豬踩踏。

3.1.4 免疫方面

養殖技術人員還應該加強豬群免疫，在母豬產前15 d 和40 d 接種大腸桿菌疫苗[4]。比如：肌肉注射仔豬大腸桿菌病基因工程滅活疫苗（GE-3 株），由遼寧益康生物股份有限公司生產，獸藥字號060131112，或者注射仔豬大腸桿菌病K88+K99+987p 和產氣莢膜梭菌病C 型2 聯滅活疫苗，由國家集團動物保健股份有限公司生產，獸藥字號170261126，嚴格按照疫苗使用說明書要求，控制注射時間、注射劑量以及注射方法，以此實現前置預防，降低后續豬群中出現大規模大腸桿菌病。

3.2 豬大腸桿菌病治療

當仔豬或成年豬已經出現大腸桿菌病，養殖技術人員首先應該調整飼料配比，增加麥麩、麩糠等易消化飼料供給，降低蛋白質飼料供給，降低飼喂量，約為日常飼喂量的3/4 左右即可，保證病豬少食多飲水，水中加電解質，避免脫水。其次，利用中藥治療法和西藥治療法，給予針對性治療。

3.2.1 中藥治療法

利用烏梅10 g、黃芩15 g、黃連12 g、葛根15 g、霍香10 g、厚樸15 g、陳皮20 g、生姜15 g、黨參25 g、茯苓15 g、炒山藥10 g、炙甘草20 g、麥芽15 g、神曲15 g，按照1∶1000 比例加入純凈水煮沸，30 min 之后，畏火10 min，棄渣取湯給豬灌服，每頭豬灌服100 mL 左右，每日早晚2 次，連續服用7 d，可有效緩解病豬腹瀉、脫水等癥狀。也可以利用混合型飼料添加劑低聚殼聚糖，每500 g 藥劑拌料50 kg，保證每頭豬每天喂藥10 g 即可，據湖北農夫旺生物科技有限公司試驗研究顯示：將殼聚糖拌料之后5 d 可發現豬群采食量明顯增加10%左右，可補充普通蛋白飼料營養缺陷，調節腸道機能，保障整體豬群生長均勻，增重快，提高飼料吸收與消化率，并降低糞便中氨氣臭氣，在使用7 d 之后，豬群皮膚發亮，健康活潑，嘔吐、腹瀉、精神萎靡癥狀基本消失，在使用30～40 d 左右，能夠有效改善豬群體型，提高豬體瘦肉率，使得豬群收腹，臀大，背部增寬，生長速度加快，抗病性能更強，長期添加與其他豬群相比，可以盡早出欄，出欄時間可提前16 d 左右。

3.2.2 西藥治療法

養殖技術人員還可以利用西藥抗生素治療方法[5]。按照每次肌肉注射2～4 mg/kg 劑量，使用慶大霉素（由重慶方通動物藥業有限公司生產，獸藥字號230031506），每日1 次，連續使用3 d，同時按照15～25 mg/kg 體重口服硫酸新霉素（由綠康生化股份有限公司生產，獸藥字號130011519），每日早晚各1 次，連續服用3～5 d；或者取頭孢氨芐注射液（由哈爾濱銀山科技畜牧有限責任公司生產，獸藥字號080206634），每日1次，注射10 mL，結合磺胺脒0.5 g（由黑龍江齊泰動物保健品有限公司生產，獸藥字號080602705），將二者研制成粉末，按照5～10 mg/kg 體重給病豬拌料喂服，每日早晚各1 次，連續使用5～7 d，均可起到良好效果，能有效調解病豬腸道內菌群平衡，防止仔豬持續性脫水、下痢等問題。對于部分病重豬可以利用10%葡萄糖溶液補液，在焦巢穴采取激光治療，可有效抑制仔豬黃痢、仔豬白痢和豬水腫等癥狀。

4 結語

綜上所述，當前在生豬產業發展過程中，大腸桿菌病儼然成為關鍵性制約因素，不僅影響生豬安全生產，同時威脅人類生命健康。為穩定生豬市場，降低因大腸桿菌病而引起的生豬死亡發生數量，維護畜禽養殖業經濟秩序，養殖場（戶）應該在基層畜牧獸醫人員和相關部門指導下，做好疫病防控，根據畜禽具體養殖情況，給予合適飼料，選擇科學疫病防控體制機制，將中西醫治療方法相結合，以此提高機體抗病性，降低豬群大腸桿菌病感染幾率。