3種佐劑對(duì)豬瘟病毒E2蛋白免疫效果的影響

陳玉梅,劉運(yùn)超,祁艷華,梁 超,周景明,王愛萍*

(1.鄭州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,河南鄭州 450001;2.河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物免疫學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,河南鄭州 450001)

豬瘟(Classical swine fever,CSF)是由豬瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的一種急性傳染病[1-2]。近年控制豬瘟應(yīng)用最廣泛的是減毒活疫苗[3],經(jīng)典的CSFV疫苗,如C-strain、GPE-strain、LPC-strain和LK-VNIVViM strain,雖然不具有區(qū)分感染和接種疫苗動(dòng)物的能力,但提供了對(duì)CSFV感染的強(qiáng)大保護(hù)。FlagT4Gv、TWEJ2、FLC-LOM-Berns等標(biāo)記疫苗接種家豬后可控制CSF的傳播并降低急性死亡率,但疫苗的廣泛使用也導(dǎo)致了豬瘟的復(fù)雜性,如臨床癥狀從典型轉(zhuǎn)向非典型,免疫抑制和持續(xù)感染的現(xiàn)象普遍存在,這也給控制CSF帶來(lái)了困難[4]。

囊膜糖蛋白E2是CSFV病毒顆粒的主要成分,有多種功能,如病毒對(duì)細(xì)胞的吸附、保護(hù)性免疫反應(yīng)的激發(fā)和病毒毒力[5]。研究顯示,強(qiáng)毒CSFV的Erns(E0)、E1或E2糖蛋白的糖基化降低了對(duì)豬的病毒毒性[1]。而糖蛋白E2和E0是感染動(dòng)物中激發(fā)抗豬瘟抗體的主要靶點(diǎn),因此基于E2和E0靶點(diǎn)的疫苗研究很多,用桿狀病毒系統(tǒng)表達(dá)糖蛋白E2和E0,并測(cè)試了它們?cè)谕皿w內(nèi)的保護(hù)性免疫,發(fā)現(xiàn)E2蛋白誘導(dǎo)的特異性抗體、中和抗體和細(xì)胞免疫應(yīng)答水平較高,而僅接種E0不能誘導(dǎo)保護(hù)性免疫反應(yīng)[6]。通過腺病毒載體表達(dá)E0和E2基因,構(gòu)建了重組腺病毒E0-E2(rAd-E0-E2)疫苗,并確定了最小免疫劑量和免疫持續(xù)時(shí)間[7]。制備E2-CD154亞單位候選疫苗,其在懷孕母豬中是安全有效的,并且在出生后第63天,傳遞給后代的被動(dòng)免疫仍然具有保護(hù)性[8]。用于CSFV E2純化的肽配體進(jìn)行分子對(duì)接,從轉(zhuǎn)基因水稻種子中表達(dá)純化E2蛋白,對(duì)小鼠免疫抗體的評(píng)估表明,接種后第42天抗體阻斷率達(dá)到86.18%和90.68%[9],而通常情況下阻斷率Blocking%≥50%的樣本可認(rèn)定為產(chǎn)生保護(hù)。……