枝條蜜環(huán)菌栽培種液體培養(yǎng)技術(shù)

胡萬金 祝勇 肖力 王江虹

摘? ?要? ?蜜環(huán)菌菌種是人工培養(yǎng)進(jìn)行擴(kuò)大繁殖和用于生產(chǎn)的純菌絲體。菌種質(zhì)量的好壞直接影響天麻、豬苓栽培的成敗和產(chǎn)量的高低。總結(jié)了枝條蜜環(huán)菌形態(tài)特征、生長環(huán)境要求以及栽培種液體培養(yǎng)操作流程。

關(guān)鍵詞? ?枝條蜜環(huán)菌;液體栽培種;生產(chǎn)技術(shù)

蜜環(huán)菌，又稱蜜環(huán)蕈、蜜蘑、榛蘑，是擔(dān)子菌門、傘菌綱、傘菌目、白蘑科、蜜環(huán)菌屬真菌，多生長在針葉林或闊葉林中，在我國的東北、華北、西北、四川、云南等地均有分布。

蜜環(huán)菌是天麻、豬苓的共生真菌，是天麻、豬苓生長發(fā)育的營養(yǎng)來源。此外，蜜環(huán)菌還具有一定的食用價值和藥用價值，其菌蓋和菌柄味道鮮美、營養(yǎng)豐富，可以食用;同時，蜜環(huán)菌具有祛風(fēng)通絡(luò)、強(qiáng)筋骨、益腸胃、清熱解毒等功效。

液體培養(yǎng)是枝條蜜環(huán)菌栽培種傳統(tǒng)生產(chǎn)方式，具有生產(chǎn)技術(shù)簡單、原材料易于收集、商品菌種易于保存且保存期長，栽培天麻、豬苓產(chǎn)量高等特點(diǎn)。陜西、甘肅、湖北、貴州等地農(nóng)戶廣泛使用枝條蜜環(huán)菌液體培養(yǎng)的菌種生產(chǎn)天麻、豬苓。目前，陜西漢中枝條蜜環(huán)菌液體栽培種產(chǎn)量已占全國60%以上。以下總結(jié)枝條蜜環(huán)菌液體栽培種生產(chǎn)技術(shù)，供參考。

1? ?蜜環(huán)菌的形態(tài)特征

蜜環(huán)菌的子實體為淺土黃色或淺黃褐色肉質(zhì)，菌蓋半球形，菌柄上有菌環(huán)，菌肉白色。子實體成熟后產(chǎn)生孢子，形成白色的孢子印（孢子粉聚集形成的一種現(xiàn)象）。孢子無色或微黃，光滑，呈圓形。孢子在適宜條件下萌發(fā)形成菌絲，菌絲聚集后形成繩索狀長束，稱為菌索，菌索棕褐色，老化后呈黑褐色，菌索從腐朽的樹木或活的樹根上吸取營養(yǎng)，在樹皮或土壤中蔓延。菌絲和菌索在黑暗條件下都能發(fā)出螢光，發(fā)光的強(qiáng)弱與溫度、菌絲的成熟度和接觸空氣量有關(guān)，溫度越高、菌絲成熟度越高、接觸空氣的面越大，螢光越強(qiáng)。

自然界中還有一種假蜜環(huán)菌，其與蜜環(huán)菌的主要區(qū)別是前者的子實體沒有菌環(huán)，不能為天麻、豬苓提供營養(yǎng)。

2? ?蜜環(huán)菌的生長條件

蜜環(huán)菌常在夏秋季節(jié)生長于闊葉林中，對生長環(huán)境要求比較嚴(yán)格，喜歡溫暖、濕潤、通風(fēng)良好的環(huán)境，同時還需要一定的光照條件，疏松、肥沃、排水良好、酸堿適度的土壤條件，以及充足的水分和氧氣。

1）溫度。蜜環(huán)菌的菌絲體在5～30 ℃環(huán)境下均可生長，但在18～24 ℃下生長最快，生產(chǎn)中一般采用15～18 ℃低溫培養(yǎng)發(fā)菌，這個溫度條件下培養(yǎng)出的蜜環(huán)菌菌絲體生長健壯。菌絲和菌索在20～25 ℃下發(fā)出的熒光最強(qiáng)。低于5 ℃菌絲體進(jìn)入休眠狀態(tài)，高于30 ℃菌絲體停止生長，超過34 ℃會導(dǎo)致菌絲體死亡。

2）濕度。蜜環(huán)菌喜歡在潮濕、透氣的條件下生長發(fā)育。在自然界中空氣濕度達(dá)到60%以上時，蜜環(huán)菌生長發(fā)育很好，空氣濕度低于30%時，菌絲生長緩慢甚至停止生長。人工培養(yǎng)蜜環(huán)菌的菌材（木質(zhì)）含水量應(yīng)保持在45%～60%，空氣濕度保持在70%～85%。

3）氧氣。蜜環(huán)菌是好氣性真菌，其菌絲、菌索和子實體生長發(fā)育都需要氧氣，同時菌索具有運(yùn)送氧氣的功能。因此，蜜環(huán)菌的菌索可以在固體或半固體培養(yǎng)基中穿透一定的距離，這也是蜜環(huán)菌可以在濕透的段木中生存的原因。

4）光線。蜜環(huán)菌的菌絲和菌索需要在暗光中培養(yǎng)，而子實體的形成則需要光線的刺激，子實體的生長發(fā)育需要散射光，否則生長不良，畸形或不孕。

5）酸堿度。蜜環(huán)菌的菌絲體在pH值4.5～7之間可以正常生長，最適宜的pH值為4.5～6.5，pH值超過7生長不良。因此微酸性環(huán)境最適合蜜環(huán)菌生長。

6）營養(yǎng)條件。蜜環(huán)菌可以木材中的纖維素、半纖維素和木質(zhì)素等作為營養(yǎng)來源，同時還需要一定的氮、磷、鉀等元素，可選擇櫟樹、樺樹、蘋果樹等作為蜜環(huán)菌培養(yǎng)基質(zhì)。

3? ?蜜環(huán)菌栽培種液體培育

3.1? ?培育時間? ?氣溫8～25 ℃均可，最適氣溫15～ 26 ℃，從接種至菌絲長滿需25～35 d。陜西漢中地區(qū)枝條蜜環(huán)菌液體栽培種一般從10月初開始生產(chǎn)，一直到次年4月底結(jié)束。

3.2? ?原材料準(zhǔn)備與處理

3.2.1? ?準(zhǔn)備塑料瓶? ?枝條蜜環(huán)菌液體栽培種生產(chǎn)一般采用帶海綿、透氣瓶蓋的塑料瓶，常用750 mL塑料瓶，少量的用1 500 mL塑料瓶，根據(jù)生產(chǎn)季節(jié)提前預(yù)備。

3.2.2? ?準(zhǔn)備菌枝? ?培養(yǎng)蜜環(huán)菌的樹種可選擇樺類、櫟類等闊葉樹種。秋后樹體落葉后至第2年發(fā)芽前收集直徑1.5～2.5 cm的枝條，用機(jī)器截成長3～4 cm的小段，截口呈45°。裝瓶前1～2 d將菌枝在水中浸泡24～48 h，瀝干水分備用。

3.3? ?生產(chǎn)技術(shù)

3.3.1? ?裝瓶? ?采用人工或機(jī)器搖瓶的方式裝瓶。將浸泡后的菌枝裝入塑料瓶中，裝入量一般為瓶子容積的4/5，750 mL塑料瓶約需0.3 kg枝條。裝好枝條后加入3～5粒玉米粒，然后加滿清水，蓋上蓋子。當(dāng)天加水當(dāng)天滅菌，不能放置太長時間。

3.3.2? ?滅菌? ?將裝好瓶的原料放入高壓滅菌鍋內(nèi)滅菌，開大火迅速將滅菌容器壓力升至0.05 MPa，排氣，排完氣后將壓力升至0.125 MPa，保持2.5～3 h。待壓力下降至0.05 MPa后再緩慢排氣。切不可在高壓狀態(tài)下快速排氣，以免瓶內(nèi)水分溢出，造成瓶內(nèi)缺水。

3.3.3? ?冷卻? ?滅菌完成后，將菌瓶放入冷卻車間自然降溫。菌瓶移動過程中要保持直立，瓶內(nèi)的水不能溢出。

3.3.4? ?接種? ?當(dāng)菌瓶內(nèi)溫度降至25 ℃以下時便可以接種。按照常規(guī)無菌操作在接種箱或接種室內(nèi)進(jìn)行。需要注意的是，枝條蜜環(huán)菌液體栽培種生產(chǎn)用的蜜環(huán)菌原種通常是固體或液體。在接種時需要嚴(yán)格控制菌瓶內(nèi)的水位：使用固體蜜環(huán)菌原種接種時，瓶內(nèi)水位以剛剛和枝條平齊為宜，接種后要求蜜環(huán)菌原種的菌塊一半在水中一半露出水面;使用液體蜜環(huán)菌原種接種時，瓶內(nèi)水位以枝條露出水面1～2 cm為宜，接種后要求菌球（液體菌種中的菌絲結(jié)團(tuán)）露出水面。這樣操作有利于促進(jìn)菌種快速萌發(fā)，提高成活率。

3.3.5? ?保溫培養(yǎng)? ?接種后搬運(yùn)菌瓶時務(wù)必要保持直立，輕拿輕放。將菌瓶放入培養(yǎng)室內(nèi)發(fā)菌培養(yǎng)，培養(yǎng)室溫度控制在18～24 ℃，一般25～35 d可以長滿菌瓶。蜜環(huán)菌長滿瓶后，繼續(xù)培養(yǎng)45～60 d，待菌絲由棕紅色逐漸變成亮白色，瓶內(nèi)結(jié)塊呈果凍狀后方可打包銷售。枝條蜜環(huán)菌栽培種菌種菌齡不足，播種后易被污染或菌絲不萌發(fā)。

3.3.6? ?留樣保存? ?每個蜜環(huán)菌品種、每個批次留樣5～7瓶，于0～6 ℃下保存至正常生產(chǎn)條件下該批菌種生產(chǎn)出天麻或豬苓為止。

4? ?小結(jié)

科學(xué)應(yīng)用枝條蜜環(huán)菌液體栽培種生產(chǎn)技術(shù)，可以提高蜜環(huán)菌的產(chǎn)量和質(zhì)量，降低生產(chǎn)成本，減少環(huán)境污染。生產(chǎn)過程中要嚴(yán)格控制培養(yǎng)條件，如溫度、濕度、光照等，同時還要注意防止雜菌污染，保證蜜環(huán)菌的品質(zhì)和產(chǎn)量。

胡萬金，肖力，王江虹，陜西省西鄉(xiāng)縣農(nóng)業(yè)綜合執(zhí)法大隊，郵編723500;祝勇，西鄉(xiāng)縣農(nóng)村合作經(jīng)濟(jì)與社會事務(wù)服務(wù)中心。

收稿日期：2023-11-14