廣西百色芒果葉提取物穩(wěn)定性的研究

韋凱 梁莉 王萌 廖丹葵 蔣強(qiáng)

摘 要：采用HPLC法和紫外分光光度法，對(duì)芒果苷的吸光度和濃度進(jìn)行測(cè)定，系統(tǒng)研究了其對(duì)光、熱、酸堿的耐受情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)芒果苷在有光無(wú)光、高溫變化下的吸光值波動(dòng)起伏不大，在酸性和強(qiáng)堿性條件下芒果苷含量顯著降低，說(shuō)明芒果苷能耐受光照、高溫，但強(qiáng)酸強(qiáng)堿能迅速破壞芒果苷的穩(wěn)定性。

關(guān)鍵詞：芒果葉；芒果苷；穩(wěn)定性

A Research on the Stability of Guangxi Baise Mango

Leaf Extract

WEI Kai1，2， LIANG Li2， WANG Meng2， LIAO Dankui3， JIANG Qiang1

（1.Guangxi Baise National Agricultural Science and Technology Park， Baise 533612， China;

2.Guangxi Colleges and Universities Key Laboratory of Environmental-Friendly Materials and New Technology for Carbon Neutralization， Guangxi Key Laboratory of Advanced Structural Materials and Carbon Neutralization，

School of Materials and Environment， Guangxi Minzu University， Nanning 530105， China;

3.School of Chemistry and Chemical Engineering， Guangxi University， Nanning 530004， China）

Abstract： HPLC and UV spectrophotometry were used to determine the absorbance and concentration of mangiferin， and its tolerance to light， heat， and acid-base was systematically studied. The measurement result shows that the absorbance value of mangiferin fluctuates a little under high temperature and light conditions. In contrast， the content of mangiferin significantly decreases under acidic and alkaline solid conditions. The conclusion is that mangiferin can tolerate light and high temperatures， and strong acids and bases can quickly destroy its stability.

Keywords： mango leaves; mangiferin; stability.

百色市位于廣西壯族自治區(qū)的西部，氣候溫暖濕潤(rùn)，冬無(wú)嚴(yán)寒，夏無(wú)酷暑，年平均氣溫適宜，具有充足的日照和降水量以及富含礦物質(zhì)的土壤，為芒果的生長(zhǎng)提供了充足的養(yǎng)分和水分，是我國(guó)最重要的芒果產(chǎn)地之一。芒果葉是芒果植物（漆樹科）的葉子，富含芒果苷、高芒果苷、原兒茶酸等多種化學(xué)成分[1-2]。其性味為酸、甘、涼、平，具有行氣疏滯、祛痧積的功能，主要用于治療熱滯腹痛、氣脹、小兒疳積、消渴等癥[3-4]。

廣西百色憑借得天獨(dú)厚的區(qū)位優(yōu)勢(shì)，不僅擁有豐富的天然資源和優(yōu)越的氣候條件，而且以豐富多樣的芒果生產(chǎn)著稱。然而，目前廣西的芒果種植主要以果實(shí)獲取為主，整體開發(fā)和技術(shù)水平相對(duì)較低[5]。大量芒果葉片由于嫁接、修枝剪葉等原因被丟棄或在垃圾填埋場(chǎng)焚燒，導(dǎo)致資源浪費(fèi)[6]。因此，以芒果葉為原料制成芒果葉精油、口服膠囊、果脯、芒果葉粉等藥食兩用產(chǎn)品的潛力巨大。

芒果苷是芒果葉中的主要活性成分，具有潛在的藥用和保健功能。研究發(fā)現(xiàn)，芒果苷具有降血糖、降低炎性損傷、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞、抗氧化、抗病毒、利膽等功效，顯示出廣闊的研究前景[7]。百色芒果葉作為一種潛在的天然藥用資源，芒果苷的穩(wěn)定性對(duì)其藥理活性的發(fā)揮至關(guān)重要。然而，在光照、溫度和pH值的作用下，芒果苷可能會(huì)發(fā)生變質(zhì)，影響其在制備藥物或保健品中的應(yīng)用。因此，本研究以百色芒果葉中提取的芒果苷為原料，通過(guò)實(shí)驗(yàn)和分析，揭示芒果苷在不同光照、溫度和pH條件下的穩(wěn)定性變化規(guī)律，旨在為其在食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)和技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

芒果苷標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥97%）、0.1 mol·L-1氫氧化鈉、稀鹽酸；甲醇（CH3OH）、乙腈（CH3CN）、甲酸（HCOOH），均為色譜純。

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、數(shù)顯恒溫水浴鍋、電子天平、高效液相色譜儀。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 溶液配制

70%甲醇溶液：量取700 mL甲醇，加300 mL超純水?dāng)嚢杈鶆颉?.1%甲酸水溶液：1 L超純水中加入1 mL甲酸，充分混勻。0.1 g·L-1芒果苷標(biāo)準(zhǔn)溶液：取0.1 g芒果苷粉末，加入1 L的70%甲醇。同樣的方法配制出0.2 g·L-1、0.4 g·L-1、0.6 g·L-1、0.8 g·L-1系列濃度梯度的芒果苷標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密吸取0.2 g·L-1 、0.4 g·L-1、0.6 g·L-1、0.8 g·L-1的芒果苷對(duì)照品溶液5 μL注入高效液相色譜儀，在258 nm波長(zhǎng)下測(cè)定，以芒果苷含量（g·L-1）為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制芒果苷標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.2 色譜條件

根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)芒果葉中芒果苷的含量測(cè)定[8]，采用高效液相色譜參考條件對(duì)芒果苷進(jìn)行測(cè)量。色譜柱：C18反向柱，250 mm×4.6 mm，5 μm；流動(dòng)相為乙腈∶0.1%甲酸水溶液（15∶85）；流速1.0 mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)258 nm；進(jìn)樣體積5 μL；柱溫：25 ℃。

1.2.3 光照、溫度及pH對(duì)芒果苷穩(wěn)定性的影響

取20 mL 芒果苷標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.1 g·L-1），用超純水稀釋，定容至200 mL。無(wú)光組儲(chǔ)存在棕色瓶中，置于黑暗環(huán)境；有光組儲(chǔ)存在藍(lán)口瓶中，置于光照條件中（2210lx）。間隔24 h分別測(cè)兩組的吸光度，連續(xù)測(cè)6 d（n=3）。

取20 mL芒果苷標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.1 g·L-1）5份，分別用超純水稀釋至200 mL，恒溫水浴控制溫度，在30 ℃、40 ℃、50 ℃、60 ℃、70 ℃下分別均加熱24 h、48 h、72 h，冷卻后測(cè)定吸光度（n=3）。

稱取0.2 g芒果苷標(biāo)準(zhǔn)品，溶解于1 L 70%乙醇中，測(cè)得溶液初始pH值為7。用0.1 mol·L-1氫氧化鈉或稀鹽酸溶液調(diào)節(jié)酸堿度為3、5、7、9、11。靜置2 h，用高效液相色譜儀測(cè)其濃度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程來(lái)計(jì)算其穩(wěn)定性變化（n=3）。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線方程

以芒果苷含量（g·L-1）為橫坐標(biāo)，峰面積（mAU*s）為縱坐標(biāo)，得到芒果苷回歸方程：Y=9.813 3X，R2=0.995 5。標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖1。

2.2 芒果苷的光穩(wěn)定性

根據(jù)圖2的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可以觀察到在有光條件下，芒果苷在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行3 d后吸光度略有增加，之后逐漸降低，最終趨于與實(shí)驗(yàn)開始時(shí)相近的水平。與此相比，在無(wú)光條件下，芒果苷的吸光度在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行6 d后幾乎沒(méi)有發(fā)生變化。

2.3 芒果苷的熱穩(wěn)定性

通過(guò)觀察圖3可得，在相同的實(shí)驗(yàn)條件下，隨著時(shí)間的推移，30 ℃時(shí)芒果苷的吸光度呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢(shì)。在40 ℃下，芒果苷的吸光度相較實(shí)驗(yàn)開始時(shí)略微下降；而在50 ℃條件下，芒果苷的吸光度先降低后逐漸升高，最終與實(shí)驗(yàn)開始時(shí)相當(dāng)；60 ℃條件下，芒果苷的吸光度先上升后下降；而在70 ℃時(shí)，芒果苷的吸光度稍有降低。總體來(lái)看，隨著溫度的升高，芒果苷的吸光值并沒(méi)有呈現(xiàn)明顯的下降趨勢(shì)。這表明，以70%甲醇為溶劑，芒果苷具有較好的熱穩(wěn)定性。

2.4 芒果苷的酸堿穩(wěn)定性

由圖4可知，芒果苷在強(qiáng)酸和強(qiáng)堿條件下濃度下降明顯，在中性和弱堿條件下較為穩(wěn)定。另外，從感官上來(lái)看，當(dāng)逐滴加入酸時(shí)，芒果苷標(biāo)準(zhǔn)溶液顏色逐漸變?yōu)闇\綠色；當(dāng)逐滴加入堿時(shí)，初期顏色變化不明顯，隨著pH值的升高，溶液逐漸變渾濁，顏色變?yōu)辄S綠色并有泡沫產(chǎn)生。

3 討論

李秀楠等[9]和郭伶伶等[10]通過(guò)測(cè)定芒果苷的峰面積和進(jìn)樣分析，對(duì)芒果葉中芒果苷的穩(wěn)定性進(jìn)行了詳細(xì)的研究。李秀楠等采用高效液相色譜法，以40%甲醇作為溶劑，超聲溶解芒果葉粉末，在不同時(shí)間點(diǎn)（2 h、4 h、6 h、8 h、10 h、12 h和24 h）進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示芒果苷的峰面積比值在這些時(shí)間間隔內(nèi)變化不大，說(shuō)明芒果葉中芒果苷在一定時(shí)間范圍內(nèi)穩(wěn)定性良好。郭伶伶等采用高效液相色譜法，以60 %甲醇溶劑，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過(guò)得芒果葉供試品溶液，再以0 h、2 h、6 h、12 h為時(shí)間間隔對(duì)供試品進(jìn)行進(jìn)樣分析，測(cè)定各峰面積。結(jié)果表明，在測(cè)定時(shí)間12 h內(nèi)，供試品的穩(wěn)定性良好，沒(méi)有明顯的波動(dòng)。這進(jìn)一步驗(yàn)證了芒果苷在一定條件下的良好穩(wěn)定性。

為深入了解芒果苷的穩(wěn)定特性，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步分析了其在有無(wú)光照（6 d）、高溫（24 h、48 h、72 h）、酸堿條件下的變化情況。研究發(fā)現(xiàn)，光照對(duì)芒果苷的穩(wěn)定性影響較小。在有光條件下，芒果苷吸光度先上升后下降，可能是因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間的光照會(huì)導(dǎo)致其發(fā)生光化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生的新產(chǎn)物可能具有不同的吸光特性，導(dǎo)致吸光度的變化，后面吸光度下降可能是芒果苷發(fā)生光降解反應(yīng)或者氧氣發(fā)生氧化反應(yīng)，反應(yīng)產(chǎn)物可能不具有原有芒果苷的吸光特性，導(dǎo)致吸光度的降低。雖然芒果苷能夠耐受相對(duì)較高的溫度，在不同溫度條件下并無(wú)明顯的下降趨勢(shì)，但在芒果苷的加工過(guò)程中仍應(yīng)避免超過(guò)酒精沸點(diǎn)的高溫和長(zhǎng)時(shí)間的高溫加熱。此外，pH值試驗(yàn)顯示，當(dāng)pH值小于7或大于9時(shí)，芒果苷的穩(wěn)定性急劇下降，這是可能是因?yàn)樵跇O端的酸堿條件下，芒果苷發(fā)生水解反應(yīng)或氧化還原反應(yīng)，導(dǎo)致其分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，影響其穩(wěn)定性。

4 結(jié)論

本研究采用高效液相法和紫外分光光度法對(duì)芒果葉中芒果苷的濃度和吸光度進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示芒果苷是一種相對(duì)穩(wěn)定的活性物質(zhì)。將芒果葉作為原材料提取芒果苷，并用于制作芒果葉茶、止咳片、顆粒劑等產(chǎn)品，有望推動(dòng)廢棄物的再利用。在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域，通過(guò)了解芒果苷對(duì)光照和高溫的相對(duì)不敏感性，可以為農(nóng)產(chǎn)品的保鮮技術(shù)提供方向，減緩芒果苷的降解過(guò)程。針對(duì)芒果苷對(duì)酸堿度的敏感性，食品和飲料制造商可以調(diào)整產(chǎn)品配方，以確保在生產(chǎn)和保存過(guò)程中維持產(chǎn)品的穩(wěn)定性。

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