高效液相色譜-串聯質譜法同時測定茶葉中氯酸鹽、高氯酸鹽、溴酸鹽和次磷酸鹽

摘 要： 該文建立了高效液相色譜-串聯質譜法同時測定茶葉中氯酸鹽、高氯酸鹽、溴酸鹽和次磷酸鹽含量的方法。試樣采用純水超聲提取，Waters Anionic Polar Pesticide 色譜柱分離，負離子多反應監測模式測定，基質匹配曲線外標法定量。各待測目標物線性范圍良好，相關系數均＞0.99，方法檢出限為0.003～0.08 mg/kg，定量限為0.01～0.25 mg/kg，平均加標回收率為87.0%～115.2%，相對標準偏差為2.7%～8.4%。20 份茶葉樣品氯酸鹽檢出率為15%，高氯酸鹽檢出率為80%。該方法可滿足歐盟對茶葉中氯酸鹽和高氯酸鹽限量的檢測要求，實現茶葉中氯酸鹽、高氯酸鹽、溴酸鹽和次磷酸鹽含量的同時準確測定。

關鍵詞： 茶葉; 氯酸鹽; 高氯酸鹽; 溴酸鹽; 次磷酸鹽; 高效液相色譜-串聯質譜法; 測定

中圖分類號： TB99; O657.63 文獻標志碼： A 文章編號： 1674–5124（2024）12–0125–07

0 引 言

茶葉因富含茶多酚、茶氨酸、咖啡堿等多種天然活性物質，被譽為世界上最健康的天然飲料。自2016 年初我國輸歐茶葉被檢測出新型污染物“高氯酸鹽”以后，茶葉中高氯酸鹽、氯酸鹽等持久性無機污染物引起了廣泛的關注。資料表明，高氯酸鹽是一類具有高水溶性、低吸附性、強氧化性和高流動性特征的持久性有毒物質，被廣泛應用于航空航天、軍事制造、工業生產等領域。高氯酸鹽可干擾甲狀腺素的合成與分泌，導致甲狀腺功能退化，阻礙人體生長發育，尤其對孕婦、嬰幼兒、兒童等影響顯著。氯酸鹽是飲用水二氧化氯消毒產生的副產物，氯酸鈉也曾在20 世紀作為非選擇性除草劑、脫葉劑甚至土壤殺菌劑在農業上大量施用，氯酸鹽同樣會毒害甲狀腺，還會影響人體的血液系統、呼吸系統和生殖系統。溴酸鹽是飲用水臭氧消毒產生的副產物，溴酸鉀曾是使用了80 多年的面粉改良劑，被國際癌癥研究機構（IARC）認定為2B 級致癌物[1]。次磷酸鹽主要應用于工業生產，如次磷酸鈉是化學工業中重要的電鍍劑和還原劑，同時也是農業的作物殺菌劑和食品工業的防腐劑、抗氧化劑等。目前，包括乳及乳制品[2-4]、茶葉[5-7]、飲用水[8-11]、果蔬[12-15]等在內的食品農產品均檢出不同濃度的高氯酸鹽、氯酸鹽及溴酸鹽。2020 年6 月， 歐盟指令（ EU）2020/749[16] 修訂了氯酸鹽在部分食品中的最大殘留限量， 正式規定茶葉中的限量為0.05 mg/kg；2023 年5 月，歐盟指令（EU）2023/915[17]首次規定了茶葉中高氯酸鹽的限量為0.75 mg/kg，而我國僅有GB 5749—2022 《生活飲用水衛生標準》規定了飲用水中氯酸鹽的限量為 0.7 mg/L，高氯酸鹽的限量為0.07 mg/L，溴酸鹽的限量為 0.01 mg/L。

目前，可用于茶葉及食品中氯酸鹽、高氯酸鹽、溴酸鹽和次磷酸鹽含量測定的主要方法有離子色譜法[18-19]、電感耦合等離子體質譜法[20-21]、離子色譜-串聯質譜法[ 22-24] 和高效液相色譜-串聯質譜法[25-30]。其中，離子色譜法抗干擾能力差，靈敏度、檢出限及重現性難以達到要求；電感耦合等離子體質譜法易受復雜基質中陽離子或陰離子的干擾，質譜檢測器容易被污染；離子色譜-串聯質譜法雖然抗干擾能力強、靈敏度高，但設備普及率不高；而高效液相色譜-串聯質譜法具有抗干擾能力強、靈敏度高、選擇性好、檢測通量大、應用范圍廣等優勢，非常適合茶葉中氯酸鹽、高氯酸鹽、溴酸鹽等污染物的同時準確測定需要。現行GB 5009.291—2023《食品安全國家標準 食品中氯酸鹽和高氯酸鹽的測定》和BJS201706《食品中氯酸鹽和高氯酸鹽的測定》便均采用高效液相色譜-串聯質譜法，且適用范圍均包括茶葉，但均采用內標法定量，存在兩種同位素內標購買困難、檢測成本較高等使用局限，且尚未覆蓋溴酸鹽、次磷酸鹽等潛在安全風險因子的測定。因此，本文通過優化前處理條件和色譜與質譜參數，研究建立了基于基質匹配曲線外標法的茶葉中氯酸鹽、高氯酸鹽、溴酸鹽和次磷酸鹽的高效液相色譜-串聯質譜同時測定方法。

1 材料與方法

1.1 主要材料與試劑

氯酸鈉、高氯酸鈉、溴酸鈉、無水次磷酸鈉標準品分別購自于阿法埃莎（中國）化學有限公司、賽默飛世爾科技（中國）有限公司、成都市科龍化工試劑廠和上海麥克林生化科技有限公司，質量分數均gt;99%。甲醇、乙腈：色譜純，美國西格瑪奧德里奇公司；二氯甲烷：分析純，成都市科龍化工試劑廠；乙酸銨：優級純，成都市科龍化工試劑廠。實驗所需茶葉樣品購自成都市相關茶葉專賣店、超市等。

1.2 主要儀器與設備

1260-G6420A 型高效液相色譜-串聯質譜聯用儀：配電噴霧離子源，美國安捷倫科技公司；E3x 型電動移液器： 1 μL～50 mL，德國艾本德公司； BP211D 型電子天平：德國賽多利斯集團； KH7200DB型超聲波清洗器：昆山禾創超聲儀器有限公司；5810R 型高速冷凍離心機：德國艾本德公司；Milli-Q 型超純水器：美國密理博公司；HVS-10M 型垂直震蕩器：天津市恒奧科技發展有限公司；XW-80A型漩渦混合器：上海馳唐實業有限公司。