高廣嶺,李琴,郝洪丹,王若穎
(河北工程大學生命科學與食品工程學院,河北邯鄲 056038)
犬腹瀉是獸醫臨床較為常見, 且導致犬營養不良、生長發育受阻的原因之一。 目前,治療的首選方法是抗生素療法,長期使用抗生素破壞動物腸道內微生態的平衡, 造成長期慢性的腹瀉。 近年來,關于研究針灸治療腹瀉的報道越來越多。C 反應蛋白可以作為非特異性炎癥標志物來反應機體腹瀉情況。 血常規檢查是臨床上對血液最基礎的檢查之一,本研究以番瀉葉構建腹瀉模型, 采用針灸與/或抗生素聯合療法作為治療手段,從臨床表現、糞便形態及性狀、血糖水平、CRP 水平和血常規變化等方面探究不同給藥方式對犬腹瀉的防治效果。
疫苗接種完全的犬只, 中華田園犬和泰迪犬30 只,體重控制在4±0.2 千克。
自動血液細胞分析儀URIT-5160Vet、 寵物免疫熒光檢測儀YG-101、 離心機 (賽洛捷克SCILOGEX)、血糖血酮儀YZB/UK1071-2015、電熱恒溫水浴鍋(北京市永光明醫療儀器廠)、電子天平FA1104。
番瀉葉(安國京隆康藥業有限公司)、恩諾沙星片劑(KVP Kiel 有限責任公司)、針灸針(蘇州針灸用品有限公司)、犬C-反應蛋白(CPR)檢測試劑盒(廣州萬德康科科技有限公司)、越佳型至新血糖試紙(英國雅培糖尿病護理公司)。
使用GraphPad Prism 8 與IBM SPSS Statistics 21 軟件包進行數據分析整理。
飼喂基礎犬糧自由飲水3 日后, 健康犬30只,分為5 組,每組6 只。 空白組飼喂普通犬糧,試驗前3 天,其余各組在空白對照組處理的基礎上給予2 克/千克體重飼喂番瀉葉,每日1 次,連續3 天,建立犬的脾胃虛寒腹瀉模型。試驗第4~6 天,針灸組給予犬只針刺脾俞、胃俞、足三里、后海并留針30 分鐘,抗生素組給予恩諾沙星片劑5 毫克/千克口服給藥, 針灸加抗生素組聯合針刺脾俞、胃俞、足三里、后海再給犬恩諾沙星片劑5 毫克/千克,各治療組每日1 次,持續治療3天,實驗結束后從臂頭靜脈采血檢測。
1.4.1 血清中血糖和CPR 含量的檢測
采集犬只全血0.5 毫升血液與0.5 毫升抗凝管中,使用自動血糖分析儀測定血清中葡萄糖含量,4000 轉/分鐘離心10 分鐘, 吸取上層血清。 使用萬孚寵物免疫熒光檢測儀測犬只血清中CRP 的含量。
1.4.2 血液學分析
將經犬只臂頭靜脈采集到的血液立即使用全自動動物血液細胞分析儀進行犬只全血的血液學分析, 主要檢測指標包括:WBC、LY、MON、NEU、LY% 、MON% 、NEU、RBC、HGB、HCT)、MCV、MCH、MCHC、RDW、PLT、MPV、PCT、PDW。
1.4.3 糞便性質評分
按照布里斯托糞便分級法進行劃分腹瀉等級。Ⅰ,糞便呈一顆顆硬球。Ⅱ,表面凹凸的香腸狀。Ⅲ,表面有裂痕的香腸狀。Ⅳ,呈香腸狀或蛇狀且表面光滑。 Ⅴ,柔軟塊狀,斷邊光滑。 Ⅵ,代表糞便呈糊狀大便,粗邊蓬松。 Ⅶ,水樣便,無固體快。
1.4.4 數據分析
試驗的結果數據經IBM SPSS Statistics 21分析,使用One-way ANOVA 進行分析,組間多重比較使用LSD,結果均表示為“平均值±標準差” (x ± SD),P<0.05 表示差異性顯著,P<0.01表示差異性極顯著。
試驗開始前,各組犬只精神食欲均無異常,可視黏膜淡粉紅色,鼻鏡濕潤。 飼喂番瀉葉至第3 天,空白對照組排便正常;而腹瀉組、針灸組、抗生素組、 針灸+抗生素組犬只均出現精神沉郁、被毛雜亂、排便次數增加、糞便稀薄,肛門及尾根處有糞便污染。 試驗第3 天至第6 天,對針灸組、抗生素組和針灸+抗生素組犬進行相應治療,空白對照組犬只無明顯變化,精神食欲正常,排便正常;腹瀉組犬只持續腹瀉、精神沉郁、被毛雜亂、糞便稀薄;針灸組、抗生素組和針灸+抗生素組犬只腹瀉情況出現明顯好轉,犬只精神食欲正常、排便正常,偶有輕微稀便。
試驗前,各組犬只糞便均呈香腸狀,表面光滑或有裂痕;飼喂番瀉葉至第3 天,各組均出現腹瀉癥狀,呈現糊狀甚至水樣糞便;試驗第3 天至第六天,對針灸組、抗生素組和針灸+抗生素組犬進行相應治療,針灸組和抗生素組犬只在治療至第3 天時腹瀉癥狀明顯好轉,部分犬只仍有糊狀糞便,針灸+抗生素組犬只在治療至第3 天時腹瀉癥狀基本痊愈,犬只糞便呈呈表面有裂痕或表面光滑的香腸狀,個別犬只糞便呈糊狀。
根據布里斯托糞便分級法對糞便進行分級后,除空白對照組外,其余各組犬只服用番瀉葉后當天出現腹瀉癥狀,隨著口服番瀉葉的時間延長其腹瀉程度逐漸增強,糞便分級也隨之升高,與空白對照組犬只的分辨分級具有極顯著差異(P<0.01),表明腹瀉模型建立成功。
試驗開始前,各組犬只體重相近。試驗第1~3 天,除空白組外,其余各組犬只出現腹瀉癥狀,各組犬只體重出現明顯下降,空白對照組犬只體重平穩且出現小幅上升。 試驗第4~6 天, 針灸組、抗生素組和針灸+抗生素組犬只體重出現不同程度上升,針灸+抗生素組犬只體重上升幅度最大,針灸組和抗生素組犬只體重小幅上升,腹瀉組犬只在停止口服番瀉葉后體重平穩。
試驗第0 天,各組犬只血糖無顯著差異(P>0.05)。 試驗第3 天,與空白對照組相比,針灸組和針灸+抗生素組犬只平均血糖水平顯著降低(P<0.05),腹瀉模型組和抗生素組犬只水平有小幅度降低,但不具有顯著差異(P>0.05)。 試驗第六天,腹瀉模型組、針灸組、抗生素組和針灸+抗生素組犬只血糖水平均出現上升,但與空白對照組相比不具有顯著差異(P>0.05)。
與空白對照組相比,其余各組在口服番瀉葉第3 天后血液中CRP 含量均極顯著升高 (P<0.01)。 試驗第6 天時,針灸+抗生素組犬只血液內CRP 含量顯著低于針灸組和抗生素組 (P<0.05),腹瀉模型組犬只血液內CRP 含量仍極顯著高于空白對照組(P<0.01)。
與腹瀉模型組相比,針灸組、抗生素組和針灸+抗生素組的WBC、MON、NEU 和MON%水平極顯著下降(P<0.01);針灸組RBC 和HCT 水平顯著降低(P<0.05)PLT 水平顯著升高(P<0.05),抗生素組NEU%、RBC、HGB 和HCT 水平顯著降低(P<0.05),針灸+抗生素組NEU%、RBC 和HCT 水平極顯著降低(P<0.01)HGB 水平顯著降低(P<0.05)PLT 水平顯著升高(P<0.05)。
針灸療法是中獸醫學科的重要構成部分,以中獸醫基礎理論為引導,經絡腧穴為基礎,通過一定手法針刺來防治疾病。 針灸可以提高疼痛閾值,具有鎮痛作用,也可以降低血清炎癥因子水平,中西醫結合的治療方法一直是現代獸醫臨床研究的熱點內容,有研究表明,中西醫結合治療腹瀉的總有效率和治愈率與單純西醫治療相比具有顯著差異具有更好的治療效果,與模型組相比, 針灸組和抗生素組犬只血清中CRP 含量顯著降低,而針灸+抗生素組犬只的血清中CRP含量極顯著降低且針灸+抗生素組犬只血清中CRP 含量顯著低于針灸組和抗生素組。 WBC 在機體中起著至關重要的防御作用,通過其吞噬功能和分泌細胞因子等途徑參與機體的防御反應,白細胞亞群的增加或減少可以反映機體的免疫功能。 而與腹瀉模型組相比,針灸組、抗生素組和針灸+抗生素組RBC 和HCT 水平顯著降低PLT 水平顯著升高。與單獨應用針灸治療和抗生素藥物治療相比,聯合應用針灸和抗生素藥物在緩解機體炎癥反應和減輕機體因腹瀉導致的脫水方面具有更顯著的效果。
針灸與抗生素藥物聯合應用對番瀉葉導致的犬腹瀉在糞便分級、體重變化、血糖水平、CRP水平、全身炎癥反應和機體脫水等方面表現出良好的治療作用,且較單獨應用針灸或單獨應用抗生素藥物同樣具有一定的治療效果。 由此可見,針灸與抗生素藥物聯合應用治療犬腹瀉在未來的寵物臨床應用方面具有很大潛力。